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文档简介

.(2012新课卷) 40,生物选矿3现代生物科学技术专集(15点)基于对基因工程的知识,回答以下问题: (1)限制酶切断DNA分子后产生的片段,其末端类型和谐。 粘性末端、平末端、(2)质粒载体经ecori切割后产生的片段,为了将载体与目标基因连接起来,除了含目标基因的DNA可以经ecori切割外,还具有可以用另一种限制酶切割的特征。 被切断的DNA片段的末端与被EcoR切断的DNA片段相同,(3)根据其来源,基因工程中使用的DNA连接酶有DNA连接酶和DNA连接酶两种。 E.Coli,T4,(5)基因工程中除质粒外,和也可作为载体使用。 (4)逆转录作用的模板为产物。 体外获得大量逆转录产物,多采用技术。 (6)用重组质粒转化大肠杆菌一般不能直接将未处理大肠杆菌作为受体细胞的原因是mRNA (或RNA )、cDNA (或DNA )、噬菌体、未处理大肠杆菌吸收质粒(外源DNA )的能力极弱【生物-现代生物技术专辑】为扩大耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等碱地的开发利用备受瞩目。 我国科学家应用耐盐基因培育耐盐水稻新品系。 (1)获得耐盐性基因后,用于重建DNA分子的限制酶作用于图中的处理,DNA连接酶作用于处理。 将(a或b填埋),(2)重组DNA分子导入水稻受体细胞的一般方法是农杆菌转化法和方法。 (3)从导入目标基因的水稻细胞中培育植物体需要利用_技术。 这项技术的核心是。 (4)为确认耐盐转基因水稻的培育是否成功,应用放射性同位素标记探针进行分子杂交检测,并应用方法从个体水平鉴定水稻株的耐盐性。基因枪法(花粉管道法)、植物组织培养、去分化和再分化、耐盐基因、一定浓度盐水灌溉(移植盐碱地)、专题2、细胞工程学、1、概念:植物细胞工程学、所采用技术的理论基础、植物细胞工程学、通常采用的技术手段、植物组织培养、植物细胞杂交、 植物细胞的全能性、一、植物细胞工程. (离体植物器官、组织或细胞)、去分化遮光、再分化光、培养条件:离体、含有全营养成分的培养基、激素、一定温度、空气、无菌环境、适当的PH、适当的光等外植体,例如花药离体培养; 基因工程培育的抗棉铃虫棉花株细胞工程培育的“西红柿土豆”杂种株等。 1、植物组织培养,去壁,纤维素酶,原生质体,植物细胞,融合原生质体,离心,振动,电刺激聚乙二醇,再生细胞壁,杂种细胞,去分化,愈伤组织,杂种植物体,激素,筛选,激素,再分化,2, 植物细胞杂交过程的形象是,(1)分离原生质体的酶解法(2)原生质体融合-物、化学法(3)新细胞壁形成-杂交细胞形成标志(4)植物组织培养-植物细胞杂交的技术环节之一,意义:克服远缘杂交亲和性障碍,培育新品种。 6、下图是植物体细胞杂交过程的示意图,图中:步骤去除,最常用的方法是用酶去除,使植物细胞成为。 程序常用化学试剂,有目的。 在利用杂种细胞培育杂种株的过程中,运用的技术手段相当于其中的步骤,相当于步骤。诱导细胞壁、纤维素酶与果胶酶、原生质体、聚乙二醇、原生质体融合,诱导植物组织培养、去分化、再分化,植物细胞杂交的目的是获得新的杂交株,使两株植物的性状可以表现在新的植物体内。 理论上杂种植株的育成性。 用传统的有性杂交法能实现吗? 因此,该研究对培育作物新品种具有重要意义。 在利用植物体细胞杂交方法培育作物新品种的过程中,遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律? 为什么杂交细胞具有两个亲本遗传物质,能够培育,不能克服远缘杂交的无亲和性障碍,不服从,植物细胞杂交是无性生殖。(1)的过程,在实际融合过程中原生质体可能形成种细胞团(只考虑两个细胞融合的情况)。 与工艺密切相关的细胞器。 3、高尔基体和线粒体,教室练习,原生质体融合,2 )番茄细胞中含有a条染色体,马铃薯细胞中含有b条染色体时,用有性杂交的育种方法培育番茄和马铃薯,得到的后代中含有条染色体,体细胞杂交技术得到的株中含有条染色体,3 )番茄练习题是(A B)/2,A B,6,(4)在培养杂种苗的过程中,一般在2428小时后,大部分原生质体再生了细胞壁。 如何判别细胞壁是否再生的? 植物细胞质壁的分离和恢复实验,植物组织培养技术有哪些应用? 植物繁殖的新途径微繁殖:不仅能够维持优良品种的遗传特性,而且能够有效地实现种苗的大量繁殖。 作物脱毒:利用植物的分生组织(如茎尖、根尖)培养,可以脱毒新生植物。 应注意,人工种皮可加入适量养分、无机盐、有机碳源及农药、抗生素、有益菌等,有利于胚状体的生长。 人工种子:植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽,包裹人工种皮后成为人工种子。 右图为人工种子的结构图。人工种子、自然种子、胚状体包埋在胶囊内形成球状结构:解决胶质化合物薄膜种皮营养成分和植物激素人工胚乳胚状体新植物幼体、优点:快速繁殖、作物繁殖能力下降、结子困难、发芽率等问题。 保持杂种优势。转基因植物(如抗虫棉等)培育;(2)作物新品种培育1倍体育种:花离体培养过程为植物组织培养过程。 单倍体育种的优点是后代不发生性状分离,均为纯子,稳定遗传,显着缩短育种年数。突变体的利用:在植物组织培养过程中,培养细胞常处于分裂状态,易受培养条件和应激(放射线、化学物质等)的影响。 从这些发生突变的个体中筛选出对人们有用的突变体,能够培育出新品种。 细胞产物的工厂化生产:利用植物组织培养技术,可大量生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等细胞产物。. 1细胞全能表达正确的是a .非离体植物细胞全能性b .动物细胞融合实现动物细胞全能性c .单克隆抗体的制备原理是细胞全能性d .花粉单倍体培育是细胞全能性的表达2 .植物细胞表达全能性的必要条件是a .适当的营养和外界条件b .给予离体后适当的营养和给予外界条件的c .其他植物细胞的基因d .将成熟的筛管核移植到去核卵泡内,3 .生物体全部细胞中,全能性最高的是a .卵泡b植物花粉c .体细胞d .受精卵4 .生物体内,细胞不显示全能性,分化为不同的组织、器官,a .细胞失去全能性的b .基因的表达有选择性c .不同5、对植物组织培养可形成愈伤组织的以下愈伤组织的描述,a .愈伤组织或离体细胞去分化形成的b .形成愈伤组织的培养基不包括有机分子c。 愈伤组织具有定影能力的胚状结构d .愈伤组织细胞的线粒体和核糖体可能形成碱基互补对6 .刺激愈伤组织的诱导剂是a .细胞因子和生长素b .赤霉素c .生长素和赤霉素d .细胞因子和乙烯, 7 .胡萝卜麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻植物组织培养过程a .基因10 .植物细胞杂交的目的是通过a .酶解法去除细胞壁有活力的原生质体b .人工诱导法融合两种不同植物原生质体c .植物组织培养法培养融合的原生质体获得杂交株d.11 .细胞工程原生质体在托融育种技术中,其技术的一个重要环节是去除营养细胞的细胞壁,通常采用纤维素酶的酶解壁法处理。 取出细胞壁后将成熟的植物细胞置于清水中,细胞最终将a .皱纹b .膨胀破坏c .保持球形d .二是动物细胞工程、植物细胞工程中常用的技术手段:植物组织培养、植物细胞杂交等动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体制备等,回顾: 常用技术手段:动物组织块、细胞悬液、原代培养、传代培养、胰蛋白酶和胶原酶处理分散于单一细胞、幼年动物器官组织中。 动物胚胎,动物细胞培养过程,加入培养液,用胰蛋白酶等处理壁细胞,适宜条件,无菌,无毒环境,营养适宜温度和pH适宜气体环境,1 .动物细胞培养的基本原理是什么? 2 .动物细胞培养液的主要成分是什么3 .动物细胞培养材料的一般特征是离体细胞能够在适当的条件下增殖(细胞增殖),通常包括葡萄糖、氨基酸、生长促进因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 一般对胚胎组织和幼龄动物组织进行动物细胞培养。 胚胎组织和幼龄动物组织细胞生命力旺盛,分裂能力强。4.哪些细胞会失去接触抑制? 5 .体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件6 .动物细胞培养的应用价值是? 肿瘤细胞,无菌无毒环境,充分营养(血清或血浆),适温,PH,气体环境(O2和CO2,C02的主要作用是维持培养液的PH值)。大量生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等生物制品药性、毒性检测基因工程中受体细胞的培养、动物组织、单一细胞、细胞悬浊液、附壁生长、分瓶培养、10代细胞、50代细胞、不死细胞、原代培养、继代培养、胰蛋白酶、剪切、 培养液、接触抑制、少数癌变、动物细胞培养技术流程、畸形分化、细胞质、核移植、多力羊育成过程动物细胞核移植技术与克隆动物、动物细胞核移植:将动物细胞核移植到去除细胞核的卵母细胞中,制成新胚胎,该新胚胎最终为动物个体(克隆动物)、分类: 细胞分化程度低,易于恢复全能性,细胞分化程度高,难于恢复全能性,原理:动物细胞核全能性体核移植过程中,卵母细胞取核,体细胞取核,重组细胞,体核移植技术的应用前景,1、加快畜牧业家畜遗传改良进程,2、保护濒危物种, 3、医疗卫生领域生产医用蛋白质和组织器官的移植、细胞膜流动性、灭活病毒、PEG、电击等,融合细胞有丝分裂,形成和诱导完整的杂交细胞的手段? 融合的细胞类型是什么? AB杂种细胞遗传物质有哪些特征,包括3种AA、AB、BB、2种生物遗传物质,1.2动物细胞融合过程、原理?1.2动物细胞的融合过程,为什么灭活病毒会成为诱导剂? 灭活失去感染性,保持融合活性,反复注射植物细胞杂交技术、抗原、动物,从动物血清中分离抗体,用这种方法制备抗体的缺点:产量低、纯度低现在,怎么解决这个问题呢? 单克隆抗体!阅读以下资料,找到单克隆抗体的概念,发现在动物发生免疫反应的过程中,体内的b细胞能产生百万种以上的特异抗体,但每个b细胞只能产生化学性质单一、特异性强的抗体。 要获得大量的单一抗体,必须在单一的b细胞中进行无性繁殖,即克隆。 2.1单克隆抗体概念:单克隆抗体:单一b细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体,单一b淋巴细胞只能产生特异性抗体的骨髓瘤细胞无限增殖的杂交瘤细胞、动物细胞培养技术、设计方案:动物细胞融合技术、单克隆抗体、 1975年英国科学家米尔斯坦和可乐实验室产生了大量的特异性抗体,有多少融合方式? 杂交瘤细胞是如何筛选出来的? 有什么特点所有杂交瘤细胞都能产生特异性抗体? 如何大规模培养获得大量的单克隆抗体?BB、b瘤、肿瘤(b、瘤)、(一选)选择性培养基:选择只有杂交瘤细胞存活、能产生相应抗体的b细胞,(二选):选择能产生所需特异抗体的杂交瘤细胞,体外培养、小鼠腹腔培养、杂交瘤细胞特征:产生特异抗体,能大量增殖。单克隆抗体、杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞、特异性杂交瘤细胞、杂交瘤细胞系、提取、免疫后b淋巴细胞、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术、单克隆抗体的制备过程:特征:产生特异性抗体,可大量繁殖,特异性强灵敏度高,可大量制备,强调:其他动物细胞、动物细胞培养技术、单抗制造过程分为多少步骤?请用箭头按正确顺序连接图解性文字,表示以下单克隆抗体制造过程的顺序。 顺序怎么样? 现在记住了吗?2.3单克隆抗体的应用,1、诊断试剂应用最广泛,准确、高效、简易、快速、单克隆抗体的最主要优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备。.“生物导弹”=单克隆抗体药物的单克隆抗体诱导,药物用于弹头、2、疾病治疗和药物搬运,主要用于癌症治疗,单克隆抗体作为载体搬运抗癌剂,形成“生物导弹”,正确杀伤癌变细胞。例.下图显示了单克隆抗体的制备工艺阶段。 (1) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _技术是单克隆抗体技术的基础。 (2)按培养基用途分类,图中HAT培养基属于_培养基。 (3)单克隆抗体与通常的血清抗体相比,最大的优势是 (4)动物细胞融合除了使用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外,还可

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