色谱峰拖尾或出现双峰的原因ppt课件

(2011332145)世家苑，色谱峰拖尾或双峰的原因，1，色谱峰拖尾，2，原因及解决方法，1，溶解样品的溶剂极性强于流动相；2、样品量过载；3.固定相中硅烷醇基和胺的相互作用：4.酸性化合物在硅胶上的吸附；5.色谱柱床层空隙；6、色谱柱污染；7.色谱柱填料表面惰性不够好；8、色谱柱本身填充问题，筛板堵塞或填料塌陷；3，1，溶解样品的溶剂极性引起的拖尾比流动相强。有几条线索有助于确定这一原因造成的拖尾。第一，先流出的峰尾比后流出的峰尾更严重。另一个迹象是样品被流动相稀释后，样品体积减小或样品峰尾减小。解决方法很简单：将样品溶解在流动相中，或者通过流动相稀释样品，直到样品的尾部符合要求。样品量过载导致的峰拖尾当样品量超过色谱柱容量时，样品峰呈直角三角形。当注入更多样品时，峰的前端变得非常尖锐，而后端变得更加严重。解决方案：减少注射量。大多数由于固定相中硅烷醇基和胺之间的相互作用而具有显著硅烷醇活性的固定相色谱柱将遭受这种现象，并且它更可能发生在中性ph (6 8)而不是酸性pH(3)下。溶液：(1)确认流动相中有合适的缓冲盐，并尽可能在pH3下操作(在pH3下操作可以质子化硅胶固定相上的硅烷醇基，降低溶质与硅烷醇反应的可能性)。使用足够的缓冲溶液来控制酸碱度和减少离子交换效应。(2)在流动相中加入竞争性胺三乙胺(TEA)，TEA能与硅烷醇发生强烈反应，抑制样品中胺与硅烷醇的反应。解决硅胶吸附酸性化合物引起的拖尾的方法：应增加流动相中盐的浓度以抑制二次反应，应降低流动相的ph值以质子化硅烷醇和溶质，必要时可向流动相中加入竞争性酸。加入的酸优先与硅胶固定相表面的酸性硅烷醇基反应，从而抑制酸性化合物和硅烷醇基之间的反应并减少拖尾。如果色谱柱通常具有良好的色谱柱效率，并且突然发现所有的峰都是拖尾的，则色谱柱可能会有间隙。先洗脱的峰比后洗脱的峰更容易出现柱空。尽管许多色谱分析人员试图用相同的固定相材料修复色谱柱的间隙，但从经验来看，这种方法很少能达到预期的效果。最好的解决办法是更换立柱间隙造成的拖尾，这样可以节省时间、金钱和麻烦。色谱柱污染导致的尾部如果色谱柱在使用初期峰形正常，使用一段时间后峰尾逐渐出现，色谱柱污染的可能性非常高。解决方案：色谱柱需要更强烈地冲洗，也就是说，色谱柱需要用比方法的流动相更强的溶剂冲洗。样品预处理应做好，但如果预处理后样品仍然脏，建议配置保护柱。一旦峰值变形差，柱效率下降，应及时更换保护柱芯。色谱柱填料的惰性表面导致拖尾键合硅胶型填料表面残留硅羟基或金属杂质，容易与待测化合物发生二次反应，导致拖尾。解决方案：选择高纯度硅胶合成填料色谱柱和有效的硅胶羟基封端填料色谱柱。10，8。色谱柱本身的填充问题，筛板堵塞或填料塌陷造成的尾液：如果色谱柱塌陷，填充色谱柱；如果筛板堵塞，反冲洗色谱柱或更换筛板。11，2，色谱峰中出现双峰，色谱图中的双峰指同一物质的色谱图中的两个峰，表明存在一个色谱柱部分堵塞导致色谱峰分裂，如果色谱柱堵塞，解决方法是将色谱柱反向连接，用流动相冲洗，冲洗掉堵塞在色谱柱中的残留物，然后反向。溶剂的极性和注入的样品量通常溶解在可溶于流动相中的溶剂中。最佳溶解方法是在流动相中溶解，但许多情况下是不一致的。当样品用溶剂极性强的试剂溶解，分析系统以水为主时，样品进样量大，在这种情况下，完全可以肯定一种纯物质有两个峰，第二个峰比第一个峰小且拖尾。如果注射量减少一半以上，峰值类型将变得正常。这是因为样品溶剂的极性与流动相的极性太不相同，流动相没有时间将其稀释至平衡。注射体积不一定很大，但绝对体积非常大。色谱图上的双峰靠得很近，高度基本一致，没有拖尾。稀释样品并再次进样就足够了，这是由于进样量大导致色谱柱过载造成的。样品的特性和酸碱度有些样品由于其化学结构而具有互变异构性。这种互变异构现象不能分离，而是存在于动态平衡中。在色谱分析中，在特定条件下，物质会有两个峰。一般来说，两个峰彼此靠近，高度基本一致，没有拖尾。当酸碱度稍有变化时，双峰现象就会消失。如果仪器参数的记录间隔太短，一个峰将变成两个或更多的峰，然后间隔需要设置得稍长一些。还有一种情况是，参考波长设置得太小，一个峰最初变成两个对称的峰，那么参考波长应该设置得更大或取消。17、5、保护柱