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文档简介

精选文件选择1专题1一、知识总结1、常用发酵菌种的比较菌种/项目酵母菌醋酸菌发霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢的种类异养性厌氧性需要氧气需要氧气培养厌氧性繁殖方法在适当的条件下出芽生殖双分裂生殖孢子生殖双分裂生殖生产应用程序酿酒做醋制作腐乳做泡菜发酵条件前期需要氧气,后期不需要氧气一直需要氧气一直需要氧气不需要氧气2、葡萄酒、果醋、腐乳、泡菜生产中使用菌种与控制条件的比较创建内容/比较项目葡萄酒果醋腐乳泡菜使用菌种酵母菌醋酸菌主要是霉菌乳酸菌控制条件有无O2缺氧有氧运动有氧运动缺氧最佳温度182530351518常温时间控制十月十二日7月8日腌制大约8天腌制十天左右其他条件关闭气体封入口及时打气控制盐酒的使用量控制盐水的比例相关反应式3、果酒、果醋、腐乳和泡菜生产过程比较和亚硝酸盐含量测定比较项目用红酒和醋做腐乳的制作方法制作泡菜检测亚硝酸盐的含量制作原理葡萄酒:缺氧呼吸果醋:有氧呼吸多种微生物发酵泡菜制作:乳酸菌无氧呼吸亚硝酸盐检测:在盐酸酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红实验流程图选择葡萄洗涤榨汁酒精发酵醋酸发酵 果酒果醋豆腐也发霉盐渍盐渍装盐渍瓶密封腌制操作提示好好控制材料选择和处理发酵液污染的发酵条件。控制材料使用量,防止杂菌污染。泡菜的选择腌制条件测定亚硝酸盐含量的操作。专题2课题1微生物的培养与应用一、知识总结1 .消毒与灭菌的区别比较项目消毒灭菌条件使用比较温和的理化方法使用强的理化因素结果杀死物体表面或部分内部对人体有害的微生物(芽胞或孢子除外)杀死物体内外的所有微生物,如芽胞和孢子适用实验操作的空间,操作者的衣服和手微生物培养器、接种器具、培养基等常用方法使用煮沸消毒法(例如100、煮沸56 min )、巴氏消毒法(例如80、煮沸15 min )醇、氯气、苯酚等化学药品进行消毒灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌4 .微生物纯化培养包括培养基的制备和微生物的精制两个阶段,精制(分离)微生物的常用接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。微生物培养:水、无机盐、碳源、氮源等平板刻划法:琼脂固体培养基表面接种环连续刻划,逐渐稀释聚集的菌种分散在培养基表面。 划片数次后,得到一个细胞繁殖的肉眼可见的子细胞群,这就是菌落。稀释涂布平板法:将菌液按一系列梯度稀释,然后分别在琼脂固体培养基表面涂布不同稀释度的菌液进行培养。 在稀释度足够高的菌液中,聚集的微生物可分散在单一细胞中,在培养基表面形成单一菌落。5 .微生物的分离和计数(1)分解土壤中尿素的细菌的分离和计数(以尿素为唯一氮源的选择性培养基)筛选菌株:用所选培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法:菌落数(非活菌数)和显微镜直接计数。土壤取样样品稀释微生物培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明环来筛选纤维素分解菌。流程:土壤采样培养选择坡度稀释平板涂布菌落选择。专题3课题1植物组织培养(见选择3 )专题3课题2月期的花药培养材料选择:选择花药时(通常选择单核期),一般通过镜检判断其中花粉是否处于适当的发育期。 确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。 但有些植物的花粉细胞核不易着色,应采用焙花青-氯矾法。 该方法可将花粉细胞核染成蓝黑色主题4课题1果胶酶在果汁生产中的作用1、酶反应速率(酶活性):单位时间内每单位体积反应物的减少量或产物的增加量。2 .影响酶活性的因素:温度、PH。 (探讨温度、PH对酶活性的影响的实验参照作业)注意酶抑制剂。主题4课题2探讨加酶洗涤剂的洗涤效果一、实验原理1 .酶添加洗涤剂是含酶制剂的洗涤剂,目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶4种,其中最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性酶。2 .碱性蛋白酶将血液污染、乳斑等中含有的大分子蛋白质水解成可溶性氨基酸和小分子的肽,从衣物上去除污垢。 脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶也分别将大分子脂肪、淀粉、纤维素水解成小分子物质,使洗涤剂具有更好的去污能力。专题4课题3酵母细胞的固定化一、实验原理1 .固定化酶和固定化细胞是将酶或细胞在物理或化学上固定在一定空间的技术,包括包埋法、化学键合法和物理吸附法。 一般来说酶适合用化学结合法和物理吸附法固定,但细胞多用包埋法固定。 这是因为细胞大,酶分子小。大酶难以吸附或结合,小酶容易从包埋材料中漏出。固定化酶的优点:酶与反应物接触,与产物分离,可重复利用。固定化细胞的优点:成本更低,操作方便,可催化一系列化学反应。题目5课题5 DNA的粗提取与鉴定一、实验原理提取生物高分子的基本思路是选择一定的物理或化学方法,分离出具有不同物理或化学性质的生物高分子。 DNA粗提取利用DNA和RNA、蛋白质、脂质等物理化学性质的差异提取DNA,去除其他成分。1.DNA溶解性利用DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同的特点,选择合适的盐浓度可使DNA充分溶解,使杂质沉淀,反而达到分离的目的。 (0.14mol/L时溶解度最低)另外,DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质不溶于酒精。 利用该原理,可以进一步分离DNA和蛋白质。2.DNA对酶、高温和洗涤剂的抗性蛋白酶水解蛋白质,但不影响DNA。 很多蛋白质经不起6080oC的高温,但DNA在80oC以上变性。 洗涤剂可破坏细胞膜,但对DNA没有影响。3.DNA的鉴定沸水浴条件下,DNA遇到二苯胺时会变成蓝色,因此二苯胺成为鉴定DNA的试剂。二、实验设计1 .实验材料的选择尽管包括DNA在内的生物材料都是可能的,但使用DNA含量相对较高的生物组织很有可能获得成功。2 .粉碎细胞,得到含有DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易,以鸡细胞为例,鸡细胞液中加入一定量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌,过滤后取滤液即可。 如果实验材料是植物细胞的话,首先需要用洗涤剂溶解细胞膜。 例如,提取洋葱的DNA时,在切好的洋葱中加入洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤收集研磨液。注意:为什么加入蒸馏水会使鸡血细胞破裂?利用细胞吸水破裂的原理。加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂是一些离子去除剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放的食盐主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。为什么DNA反复溶解和析出,可以除去杂质?用高盐浓度的溶液溶解DNA的话,可以除去不能溶解在高盐中的杂质,用低盐浓度析出DNA,可以除去溶解在低盐溶液中的杂质。 因此,通过反复进行DNA的溶解和析出,可以除去与DNA的溶解度不同的许多杂质。3. DNA的析出和鉴定过滤处理后的溶液,加入以与滤液相同体积冷却的醇溶液,静置23min后,溶液中出现白线状物,这就是粗提取的DNA。 用玻璃棒单向搅拌,卷起丝状物,用滤纸吸收上面的水分。取2根20ml的试管,放入各添加物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将线状物放入一个试管中,用玻璃棒搅拌使线状物溶解。 其次,在两试管中分别加入二苯胺试剂4ml。 混合均匀后,将试管放入沸水中加热5min,冷却试管后,比较2根试管溶液的颜色变化,调查溶解有DNA的溶液是否变蓝。四、注意事项1 .以血液为实验材料时,血液100ml中加入柠檬酸钠3g防止血液凝固。2 .加入洗涤剂后,动作应轻、柔软。 否则,容易产生大量泡沫,不利于下一步操作。 加入酒精或用玻璃棒搅拌时,必须减轻动作,以免DNA分子被切断,DNA分子形成棉状沉淀物。三苯胺试剂如果目前不在使用中,将影响鉴定的效果。4.DNA溶解度与NaCl溶液浓度的关系:如果NaCl溶液的浓度低于0.14mol/L,则随着浓度增高,DNA溶解度降低,如果NaCl溶液的浓度超过0.14mol/L,则随着浓度增高,DNA的溶解度增高。专题4课题6血红蛋白的提取与分离一、实验原理蛋白质的物理性质:按形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,提取分离各种蛋白质。1 .凝胶色谱(分配色谱):(1)原理:分子量大的分子通过多孔凝胶粒子的间隙,程度短,流动快,先洗脱的分子量小的分子通过多孔凝胶粒子的内部,程度长,流动慢。(2)凝胶材料:多孔性、多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。(3)分离过程:混合物上柱溶出大分子流动快,小分子流动慢聚集大分子聚集小分子溶出:从柱的上端不断注入缓冲液,促进蛋白质分子的快速流动。2 .缓冲溶液缓冲液的作用:抵抗外部酸、碱对溶液pH的干扰,保持pH稳定。3 .凝胶电泳法:(1)原理

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