影响反相高效液相色谱分离的因素_第1页
影响反相高效液相色谱分离的因素_第2页
影响反相高效液相色谱分离的因素_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验二 影响反相高效液相色谱分离的因素一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪器结构；2. 熟悉溶质结构、溶剂组成和固定相对溶质保留值的影响；3. 了解影响反相高效液相色谱分离的因素。二、实验原理1. 反相色谱保留机制：疏溶剂理论溶质的疏水性、流动相的极性（表面张力）和固定相的烷基链长影响溶质的保留。2. 影响溶质分离的因素n：柱长、柱效：流动相组成与性质、固定相性质、柱温等k：流动相组成与性质、固定相性质、柱温等三、实验条件色谱柱：C18（150 mm4.6mm；250 mm4.6mm）流动相：甲醇-水（100，95/5，90/10）；流速：1.0（0.8，0.6，）mLmin-1检测：UV 254 nm样品：苯、萘、蒽四、操作步骤1. 流动相组成对分离的影响在C18（150 mm4.6mm）和1.0 mLmin-1流速下，依次更换流动相，在每个体系中，均注入5 L苯-甲苯-萘混合样品，记录色谱图，计算对应的k、和R。甲醇-水kRk1k2k32,13,2R2,1R3,210095/590/102. 流动相流速对分离的影响在C18（150 mm4.6mm）和甲醇-水（90/10）下，依次更换流动相流速，在每个体系中，均注入5 L苯-甲苯-萘混合样品，记录色谱图，计算对应的n、k和R。流速（mLmin-1）nkRn1n2n3k1k2k3R2,1R3,21.00.80.63. 柱长对分离的影响更换色谱柱，在甲醇-水（90/10，v=1.0 mLmin-1）体系中，注入5 L苯-甲苯-萘混合样品，记录色谱图，计算对应的k、和R。柱长nkRn1n2n3k1k2k3R2,1R3,215cm25cm五、数据处理1. 根据操作步骤1，绘制lgkCH3OH曲线。2. 根据操作步骤1、2和3，说明流动相组成、流速和柱长对k和R的影响。六、思考题1. 根据本实验的主要结论，指出下列各组物质在反相色谱中的洗脱顺序。（1）苯、苯酚和萘；（2）苯酚、邻甲酚和2,4-二甲酚；（3）正丁醇、仲
人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论