动物实验基本操作技术PPT课件

28.05.2020，1，第四部分动物实验的基本操作技术，实验动物的捕获和性别鉴定年龄的大致判定妊娠检查组和编号，通常的采血方法的给药途径和方法麻醉方法的死刑方法，28.05.2020，2，一，大，鼠的捕获固定，第一节实验动物的捕获和固定，28.05.2020，3鼠标固定外壳固定，28.05.2020，4，鼠标固定外壳固定，28.05.2020，5，2，豚鼠夹固定，28.05.2020，6，3，兔夹固定，28.05.2020，7，28.05.2020，8，1，大小， 鼠标性别鉴定、FeMale、male、二、兔性别鉴定、28.05.2020、10、一、大、鼠标1 .形态检测日期龄(大、小时大致相同)、第三节年龄的大致判断、28.05.2020、11、28.05.2020、12、28.05 28.05.2020、14 28.05.2020、15、28.05.2020、16、28.05.2020、17、28.05.2020、18、2 .根据体重来规定日期年龄的鼠标的日期年龄与体重的对应关系、28.05.2020、19、鼠标28.05.2020，20，2，豚鼠常见老年豚鼠牙齿和爪长，毛稀疏无光泽，眼疲劳，行为迟缓。 年轻豚鼠牙齿短，爪短，眼圆，行为敏捷，毛光泽，紧贴身体。 同样，也可以根据体重推算出大约的年龄。 同日龄豚鼠的雌性体重略高于雄性。 和大鼠一样，体重受各种因素的制约。 实验在年龄要求严格的情况下，必须从卡片记录中提供正确的年龄。28.05.2020、21、3、家兔门齿和爪随年龄增长，是年龄鉴别的重要指标。 青年兔门齿洁白，短小，整齐排列的老年兔前齿黄色，厚而长，排列不规则，有时破损。 白兔脚趾几乎是红色的，尖端是白色的。 1岁的兔子是红色和白色长度相等的1岁以下，红色比白色多的1岁以上，白色比红色多。 根据脚趾甲的长度和弯曲程度也不同。 年轻兔子的脚趾指甲短，笔直，藏在脚毛里，随着年龄的增长，脚趾指甲露出脚毛外，指尖弯曲。 另外，兔皮又薄又紧，眼睛明亮，行动活跃的是青年兔皮又厚又松，眼睛颓废，行动慢的是老年兔。28.05.2020、22、5、狗年龄主要通过牙齿生长状况、磨损程度、外形颜色等情况进行综合判断。 小狗在出生后十几天开始产生乳牙，2个月后按照门齿犬齿臼齿的顺序被换成恒齿，8l0个月之后牙齿开始整齐。 狗的牙齿一岁半就会结实。 饲养场饲养的品种犬，可以根据记录明确知道年龄，收购的杂种犬不能知道正确的年龄。 实际上，可以根据犬齿的更换和磨损情况来估算犬的年龄。 28.05.2020，23，28.05.2020，24，为了及时了解雌性动物在交配后是否怀孕、怀孕时间、胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室方法进行检查，又称妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancydiagnosis ) 通过妊娠检查，及时加强母动物的护理和再接种，保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早死和流产，减少繁殖时间的损失。 妊娠检查不仅准确，早期确诊也很重要。 28.05.2020，25，外部检查法触摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法，妊娠检查法为28.05.2020，26，第五节组和编号，动物实验前必须给实验动物标上随机组和编号一、将随机组(一)分为两组：雄性Wistar大鼠12只，按体重大小顺序编排为1、2、3、12号，尝试完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：如果假设所发生的点为随机数字表格的第21行第31列的78，则从78起向下重写12个随机数字，如下： 28.05.2020.27。 动物编号： 123456789101112随机数字： 7838536574565326541组：乙甲甲、甲、甲、甲、甲、甲、甲、甲因组数字不同，继续用随机方法将甲组多馀的一只调整为乙组，从上面最后的随机数字41开始，继续抄写一只数字62，得到除以7 (因甲组的原因分配7只)和6，即将甲组的第6只甲(即11只大鼠)转入乙组。28.05.2020、28，如果甲组多两个的话，连写两个个数。 分别除以8、7的话，馀数是转入乙组的第几个甲，馀数以下类推。 最后各组鼠标的数量相等了。 调整后的各组鼠标编号按照各组鼠标编号ABC的顺序为123、12，尝试完全随机的方法，分为ABC的3组。 分组方法：假设指定的点是随机数表的第40行17列的08， 从08起从左到右写入12个随机数：动物编号： 1234567895293943796910随机数53535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353馀数为2，回归人b组馀数为结果a组4只，b组3只，c组5只。 c组至少应转入b组一只。 方法同上。 采用随机的方法。从10后面抄写，就是61。 除以5，馀数为1，将第1只c，即第2只鼠标转入b组。 调整后各组鼠标编号，组鼠标编号a组391012B组l246C组57811将动物随机分为4组以上的原理大致一致，按照28.05.2020、31、(3)动物有组时：例如a、b、c、d、e 分组方法：从随机数字表中用铅笔指定任意点，如果是第21行第17列的33，则从33开始左侧抄写6个数字，分别用6、5、4、3、2、l除。 一切不能打破的东西，不久就要用馀数写。 割开的东西，写多馀的时候写其除数。 如下： 28.05.2020.32、随机数字3346952687除子654321多于311121随机数字CABDFE上的第一个随机数字的馀数为3，即六个字符中的第三个字符c在该数字之下，第二个数字的馀数为1，其馀五个字符为第一个字符、28.05.2020、33、2、编号方法对动物进行分组实验后，为了区别、观察、记录每个个体的反应情况，必须对每个动物进行编号。 1 .体表颜料着色法一般用颜料在短期试验的白色动物上涂抹毛的方法标记。 常用的涂装化学药品为红色：0.5%中性红色或品红色溶液黄色：3%5%苦味酸溶液或80%90%苦味酸醇饱和液； 咖啡色：2%硝酸银溶液； 黑色：煤焦油醇溶液。 28.05.2020，34，左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前到后依次为7、8、9。 一位以黄色显示，十位以红色显示。 28.05.2020，35，2 .个体耳朵标记法3 .个体耳朵标记法4 .耳朵标记法5 .招牌法28.05.2020，36，第6节通常采血方法，一、大、小鼠的采血方法1 .颈静脉或颈动脉采血2 .股静脉或股动脉采血3 .心脏采血4 .尾部采血5 .眼窝采血6 .断血采血， 28.05.2020 .37，颈静脉或颈动脉采血，尾部采血，28.05.2020，38，心脏采血，28.05.2020，39，2，豚鼠采血方法1 .边缘切开采血2 .心脏采血方法同样大小鼠。 3 .股动脉采血方法同样大小、小鼠。4 .后肢背足静脉采血，28.05.2020，40，3，家兔采血方法1 .心脏采血2 .耳中央动脉采血3 .耳静脉采血，28.05.2020，41，4，狗，猫的采血方法1 .后肢外侧横足外静脉，内侧隐静脉，前肢内侧皮下头静脉采血2 .股动脉采血3 .与心脏采血同大小， 小鼠心脏采血4 .边缘静脉采血和兔边缘静脉采血，28.05.2020，42，采血方法选择血量少的检查，如红、白细胞数、血红蛋白的测定、血涂、酶活性微量分析法等，可以刺破组织取毛细血管的血。 血液量多的情况下可以静脉采血。 静脉采血时，如果需要重复多次的话，请离开心脏的边缘后，不要引起栓塞，影响整个静脉。 研究毒物对肺功能的影响、血酸碱平衡、水盐代谢障碍，必须比较动脉血氧分压、二氧化碳分压与血液pH值及k、Na、cl离子浓度，采集动脉血液。 28.05.2020.43、采血场所有足够光线室温夏季宜保持在2528、冬季宜保持在1520采血用部位时，一般需要消毒的采血用注射器和试管需要清洁干燥的抗凝血全血时，在注射器和试管的内需中加入抗凝血剂、采血时取28.05.2020、44、1 .少量血，取28.05.2020、45、2 .少量血，取28.05.2020、46、3 .大量血，取28.05.2020、47、4 .最大安全采血量和最小致死采血量，28.05.2020、48、 第七节的给药途径和方法，在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物种类决定动物给药途径和方法。 动物给药方法主要分为注射法和投药法，不同的给药途径可分为多种具体类型。 注射法分为皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。 投入法分为鼻腔内投入、胃腔内投入、肠道内投入、气管内投入和口服投入。 下面介绍各种动物的主要给药途径和方法。 28.05.2020，49，(1)皮下注射时用左手拇指和食指抬起皮肤，将带有第5(1/2)针的注射器扎入皮下。 皮下注射部位一般多为犬，猫多位于大腿外侧，豚鼠可位于后大腿内侧或下腹部，大鼠可位于侧下腹部。 兔子注射到背部和耳朵根部。 青蛙可以注射到背部的淋巴腔。 (二)皮内注射皮内注射将注射的部分从毛中拔出消毒后，用左手拇指和食指按压皮肤使其紧张，用结核菌素注射器将4(1/2)细针连接在两手指之间，紧贴皮肤表层刺入皮肤内，再提起刺入，注射药液后，皮肤表面白丘隆起。 28.05.2020，50，(4)用腹腔注射用大鼠进行实验时，左手抓住动物，腹部向上，右手将注射针扎入左(或右)下腹部皮下，将针向前按0.51.0cm，再以45度角度穿入腹肌，固定针，慢慢注入药液，以免损伤内脏如果实验动物是兔子的话，放针的部位下腹部的腹白线相距1cm。28.05.2020、51、(5)静脉注射1 .兔：兔耳血管分布明显。 兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。 内缘静脉的深度不容易固定，所以不用。 外缘静脉表浅易固定，常用。 拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻轻揉动兔耳朵，充满静脉，用左手食指和中指夹住静脉的近位部，用拇指拉紧静脉的远位部，用无名指和小指向下，用右手拿着注射器尽量从静脉的远位部刺入6号针，将拇指移动到针上固定针，离开食指和中指28.05.2020，52，2 .大鼠和大鼠一般采用尾静脉注射，操作时将动物固定在小鼠缸内或留在烧杯中露出尾巴，用4550的温水浸润尾巴一半，或用酒精擦拭使血管扩张，使表皮角质软化， 用左手拇指和食指捏住鼠尾两侧充满静脉，用中指从下方抬起尾部，用无名指和小指夹住尾部末梢，右手拿着注射器4(1/2)号细针，使针与静脉平行(不足30)，从尾部下方四分之一处(距尾尖约23厘米)放入针，这里皮肤薄先缓慢注射少量药液，如无抵抗，则指针进入静脉，可继续注射。 打完针后把尾部向注射侧弯曲止血。 需要反复注射时，请尽量从末端开始，向脊部方向移动注射。 28.05.2020，53，3 .犬静脉注射多次前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。 注射前助手侧卧动物，切掉注射部位的被毛，用橡皮带扎住(或用手握住)静脉的近端充满血管，从静脉的远端将注射针与血管平行刺入，血液返回后，松开袖带(或双手)慢慢注入药液。28.05.2020，54，一些动物不同给药途径常用注射量(毫升)、28.05.2020，55，(6)口服多为灌胃方法，该方法剂量准确，适用于小鼠、大鼠、兔等动物。 1 .小鼠、大鼠(或豚鼠)灌胃时，用注射器按住胃注射针吸入药液。 左手抓住小鼠的背部和颈部的皮肤固定动物，右手拿着注射器，将胃注射针插入动物的口中，沿着咽后壁慢慢插入食道。 动物应固定在垂直体位，插入针时无阻力。 感到抵抗或动物的明信片时，必须立即停止针或拔针，用兔子伤害食道、穿透食道，或误入气管。 一般来说，将胃注射针插入小鼠34cm后，大鼠和豚鼠可以在46cm后注入药物。 常用灌胃量小鼠0.21ml，大鼠14ml，豚鼠15ml。 28.05.2020、56、2 .狗、兔、猫、猴子进胃时，固定动物，将特制扩口器放入动物口中。 扩口器的宽度取决于动物嘴的大小。 狗的扩口器可用木材制成长方形，长约1015cm，粗约23cm，中间粘着小孔，孔径约510cm。 入胃时将扩口器放置在上述动物的上下前齿后，用绳子固定在口上，通过扩口器的小圆孔插入有弹性的橡胶制导管(例如导管)，沿着咽后壁进入食道时，应检查导管是否正确插入食道，将导管的外口插入装水的烧杯中28.05.2020、57、喂狗、喂兔时，不用扩口器。 给狗灌胃时，用12号插入胃管，用左手抓住狗的嘴，用