实验五、无菌操作及接种技术ppt课件

7种无菌操作和接种技术，1，1，微生物接种技术1)，实验目的学习使用微生物接种工具，掌握无菌手术方法，建立细菌概念。第二，实验原理无菌技术：在微生物实验工作中，指控制或防止各种微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和相关措施。接种：将微生物放入适于繁育和繁殖的人工培养基或活生物中的过程。2，3)实验用品，3，4)实验阶段：1，接种工具介绍接种环，接种针，接种权，锄头，玻璃铜版棒，其他接种工具，4，2，超净工作队，超净工作队保护实验不受外部环境的影响。原理：超清洁工作台的清洁环境是在特定空间内，清洁空气(进入的空气)沿设定的方向流动而形成的。传统的超清洁工作台可以按气流方向分割，分为内部外部和侧面。5，垂直流动超净工作台，水平流动超净工作台，6，超净工作站使用和维护，风速为0.32-0.48m/秒使用前紫外线灯打开40-60min超净工作台操作电源打开，紫外线灯关闭，酒精75%或0.5%过使用中有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉棒擦拭。请用水性棉布擦掉。超清洁站清洁，干燥，不要堆放杂物。使用完毕，关闭煤气开关或酒灯；使用后，用消毒液擦拭工作台，关闭工作电源，重新打开紫外线灯，照射15分钟。定期进行无菌检查，测定净化台是否符合无菌要求。7，2，无菌操作点1)，要求细菌概念。2)接种时要有干净的环境，整个操作过程要在火边进行。3)接种环、棉签一定要拿在手里，不能随便丢失。3、微生物接种技术1)，称为斜面预防接种，将细菌从斜面菌转移到其他斜面培养基。8，接种方法：a，免疫前用酒精棉棒擦桌面；b、在试管上贴上标签，标明细菌名称、接种日期、接种者姓名等，然后用酒精棉棒搓手消毒；c、点燃酒精灯后，将各试管内的棉花塞在火边稍微转动，以便接种时容易拔出，将试管等放在试管上，放在接种台的右侧前面；9，D，菌株和倾斜培养基的两个试管，用拇指和其他四个手指握住左手，将中间手指放在两个试管之间的部分，倾斜向上，使水平，或将试管横在左手手掌的中央，用四个手指支撑棺材，用拇指按在试管上方倾斜；e，右手带预防环，在火焰中燃烧环的一部分进行杀菌，环以上接种能进入试管的部分都要通过火焰燃烧。见图4)，图10，图4为环状灭菌，11，需要将喷嘴从火旁f，右手小指，无名指，手掌中拔出面插头，以进行以下操作；g，用火焰燃烧喷嘴，继续转动试管入口，燃烧被试管入口污染的少量细菌；h，将弯曲的接种环伸入菌管内，接触没有肠道细菌的培养基部分，冷却，使接种的细菌不燃烧，然后轻轻接触细菌，取下来一点，慢慢地在试管(图5)中注意接种环部分不要碰到钉子，清除后防止环通过火焰。12、图5从一个试管移到另一个试管种植，13、I、迅速将接种环放在火旁，在斜培养基上从下到上画线，但不要割培养基，也不要让菌株污染管壁；j、取出接种环，烧试管入口，在火旁插入棉塞，不要走向试管，使试管携带时不注入不干净的空气，k、在火焰上进行预防注射，杀菌后重新恢复原状，用手钉棉签，将新接种的试管斜面放在试管架上；l，接种后，将倾斜培养基放入孵化器中培养。14，倾斜接种图，15，A，加热熔融培养基三角瓶瓶绷带绳索，轻轻转动面插头，将瓶子放入微波炉加热，选择高火力，1分钟加热后消除摇晃，反复加热，直到培养基完全融化。b、倒置的盘子右手拿着培养徽章三角瓶，放在火焰旁边，左手轻轻推瓶盖，瓶口保持火焰；然后，左手将盘子盖放在火焰附近，快速倒入约15毫升的培养液，轻轻摇动培养盘，均匀地分配到培养盘底部，然后平放在桌子上，凝固后变成扁平的板。2)，平板接种技术，16，17，免疫方法：a抓住右手免疫环，火焰灭菌，冷却后，选择培养物一点。左手倾斜地拿着琼脂平板，盘子盖放在桌子上，在火焰附近琼脂平板顶部涂上细菌，前后刮擦，涂上薄膜(总平板表面积的约1/10)，在刮削时用环和平板表面的3040角轻轻接触，用手腕在平板表面轻快地滑动，接种环不得穿透培养基表面b、燃烧接种环，杀死留在环中的细菌，直到冷(取决于是否冷)为止，先在培养基边缘摸，韩亚融化表示不冷，过一会儿再试，在薄膜中连续平行线上拍摄细菌，占据平板表面的约五分之一左右，3次平行划线，直到再次燃烧接种环以同样的方式，第四、第五次划线。c，完成划线，盖上碟子盖子，在地板上，用标签或蜡笔标记细菌名称检查编号，接种者信息等37 放置24小时培养后观察结果。18，划线接种，目的：使混合细菌单分散生长，单菌落形