宠物传染病生物制品

宠物传染病生物制品,第一节犬瘟热（CD）,一、病况与病原概述：（一）、病况：1、概念：犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬和肉食目中许多动物的一种热性高度接触性传染病。2、流行特点：主要感染犬和水貂，幼犬和幼貂感染死亡率高达30-80%。该病不同年龄、性别和品种的犬都可感染，但2月龄以内的仔犬由于受母源抗体的保护，80%不受感染，3-12月龄的幼犬易感性最高，2岁以上的犬发病率逐渐降低。犬瘟热病康复犬可获终身免疫力。,3、主要症状：呼吸道症状：表现为支气管炎、卡他性肺炎、咳嗽、气喘、呼吸困难。神经症状：表现为癫痫、转圈、共济失调、肌肉强直痉挛等。消化道症状：严重病犬腹泻水样粪便，恶臭，混有血液。特征性症状：双相热型，少数病犬的鼻和足垫可发生角质化过度。,犬瘟热足掌角质化,犬瘟热全身抽搐,（二）、病原：CDV，只有一个血清型。1、分类地位及形态结构特征：该病毒属于副粘病毒科副粘病毒亚科麻疹病毒属。病毒核酸为单股RNA，病毒粒子外观呈球形，大小直径150-200nm。核衣壳呈螺旋状立体对称。有囊膜，37时有的毒株可以凝集鸡的红细胞，只有一个血清型。2、生长繁殖特征：适应鸡成纤维细胞的犬瘟热病毒在鸡胚上传100代后不致病可做疫苗。该病毒在犬、雪貂、犊牛肾、脾、肺、睾丸等细胞上都可生长，在乳地鼠和乳小鼠脑内可传代，也可用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞株）培养。,二、疫苗与免疫：（一）疫苗：现用于犬的犬瘟热疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。包括犬瘟热组织灭活疫苗、细胞培养灭活疫苗、雪貂组织活疫苗、鸡胚活疫苗、鸡胚细胞活疫苗和犬六联疫苗、犬七联疫苗。目前多使用六联疫苗和七联疫苗。,1、犬瘟热鸡胚细胞活疫苗：毒株为犬瘟热病毒鸡胚化弱毒株适应于鸡胚成纤维细胞的传代毒，用鸡胚成纤维细胞增殖病毒，制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水貂，安全有效。欧美国家广泛用于水貂犬瘟热的预防。我国用于配制犬的六联疫苗或七联疫苗，广泛用于预防犬的犬瘟热。,制苗过程如下：（1）毒种：低温保存的毒种使用前经鸡胚成纤维细胞培养传23代。脑内接种12日龄小白鼠，最小发病量不低于10-3/0.03ml。1520g小鼠脑内接种0.03ml或皮下注射0.5ml，观察10d无异常反应为合格。（2）制苗：取911日龄SPF鸡胚制备鸡成纤维细胞，待细胞长成单层后按2.5%3%比例将种毒接入维持液，37恒温培养。接毒后35d出现细胞肿大、聚集如星芒状、拉网变圆，脱落，当CPE达85%以上时，收获培养物，反复冻融3次，加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加5%蔗糖脱脂乳冻干成冻干疫苗。,（3）疫苗检验：疫苗病毒毒价应达10-3.5/ml以上，安全检验时用1618g小鼠4只，每只腹腔接种0.2ml；另用250300g豚鼠2只腹腔接种0.5ml，观察10d应健活。（4）保存与使用：冻干疫苗27保存，有效期2年。使用时，每只犬皮下或肌肉注射1ml，间隔23周加强免疫一次，保护期1年。,2、组织灭活疫苗：（1）制苗：犬瘟热病毒感染雪貂或犬发病，无菌采集病死犬肝、脾、淋巴结制成20%组织乳悬液，冻融三次，三层纱布过滤，加入终浓度0.1%甲醛，37灭活24h。（2）疫苗检验：无菌检验按常规进行，安全检验用健康小犬2只，皮下或肌肉注射10ml，观察7d，无不良反应，判为合格。（3）使用方法：每只犬皮下接种5ml，间隔2-3周加强免疫一次，免疫保护期3-6个月。,（二）免疫程序：1、犬瘟热鸡胚弱毒冻干苗：首免：9周龄刚断奶犬注射一针。二免：15周龄加强免疫一次。免疫期一年，以后每年加强免疫一次。,2、犬六联或七联苗：首免：断奶（45-60日龄）幼犬注射1头份。二免：首免后15天再注射1头份。三免：二免后15天再注射1头份。免疫期一年，以后每年免疫一次两针（首免1头份，15天后二免1头份）。,第二节犬细小病毒病（CPD）,一、病况与病原概述：1、病况：概念：该病又称犬传染性肠炎（拉稀呈番茄酱样发出特殊腥臭味）。是由犬细小病毒（CPV）引起的一种急性接触性致死性传染病。流行特点：多发生于幼犬，病死率1050%。小于4周龄的仔犬和大于5岁的老犬发病率低，一般分别为2%和16%。,特征性病变：表现为出血性肠炎和心肌炎。34周龄犬感染后以心肌炎为主，810周龄犬感染后以肠炎为主，先呕吐，后腹泻，拉出灰黄色或番茄酱样稀粪发出难闻的特殊腥臭味。,2、病原：CPV。该病毒属于细小病毒科细小病毒属。病毒核酸为单股DNA，病毒粒子大小直径20-22nm，病毒粒子外观呈足球形，蛋白质衣壳为20面体立体对称，无囊膜。该病毒在4和25能凝集猪和恒河猴的红细胞，但不能凝集其它动物的红细胞。可在犬肾、猫肾细胞上增殖并产生CPE。,二、疫苗和免疫：（一）疫苗：目前用于预防犬细小病毒病的疫苗主要有CPV灭活疫苗、CPV弱毒疫苗(犬细小病毒-犬钩端螺旋体二联疫苗、犬瘟热-CPV-犬传染性肝炎-副流感-犬钩端螺旋体五联疫苗、狂犬病-犬瘟热-CPV-犬肝炎-副流感-犬钩端螺旋体六联疫苗)。,1、CPV细胞培养灭活疫苗：(1)种毒：CPV-GN毒株。(2)制苗：用CPV-GN种毒接种CRFK（猫肾细胞株）细胞，37培养24h形成单层后换入维持液，37继续培养7296h，待CPE达80%以上时(HA1:1024)，收获病毒，冻融3次，3000r/min离心15min，取上清，除去细胞碎片,上清加入终浓度0.25%甲醛，37持续搅拌24h，HA1:512，再加入7%8%氢氧化铝胶混匀即成CPV灭活疫苗。,（3）疫苗检验：安全检验：选取5只断奶幼犬，3只皮下或肌肉接种疫苗35ml，另2只作对照，观察710d均应健活，粪便检查HA为阴性。效价检验：HA1:512。,（4）保存与使用：于4保存，有效期1年。断奶幼犬肌肉注射1ml，间隔23周再接种1ml，怀孕犬产前20d肌肉注射疫苗1ml，免疫保护期1年。,2、异源灭活疫苗：(1)种毒：猫泛白细胞减少症病毒FNF8毒株，由病死猫分离并鉴定，TCID5010-5.5/ml。(2)制苗：种毒稀释后接种CRFK（猫肾细胞株）单层细胞。37培养7296h，当细胞出现80%以上CPE时收获病毒。冻融3次，3000r/min离心20min，取上清，除去细胞碎片。用BEI（二乙烯亚胺）灭活病毒。加5%氢氧化铝胶混合，制成CPV异源灭活疫苗。,（3）疫苗检验：一次免疫后1015dHI抗体效价在1:40以上，2次免疫后效价可达1:80以上，并能经受强毒口服的攻击。（4）保存与使用：于4保存，有效期1年。6周龄和14周龄犬分别免疫接种一次，每次皮下注射23ml，间隔34周。妊娠犬产前20d注射一次，可获得良好的免疫效果。,3、CPV细胞培养活疫苗：(1)种毒：CPV-780916弱毒株，为CPV强毒株在犬肾原代细胞上传代80115代，经筛选获得的适应弱毒。(2)制苗：疫苗用犬肾原代细胞或MDCK细胞（犬肾细胞株）生产病毒，加保护剂冻干而成。疫苗安全有效，免疫接种后4d即可产生高滴度的HI抗体。(3)保存与使用：疫苗于15保存，保存期1年，皮下注射1ml，免疫2次，间隔时间23周，妊娠犬产前20d免疫一次，免疫期1年。,（二）免疫程序：首免：7-8周龄（断奶60日龄）免疫接种一次弱毒苗；二免：间隔2周加强免疫接种一次灭活苗。以后每年加强免疫接种一次。,第三节犬传染性肝炎（ICH）,一、病况与病原概述：1、病况：概念：ICH是由ICHV（犬型腺病毒）引起的一种急性、高度接触性、败血性的传染病。流行特点：主要感染犬和狐狸，可发生于任何季节，无年龄和品种差异。该病常见于1岁以内的幼犬，刚断奶的小犬最易发病，幼犬病死率高达2540%。幼犬患病时，常于12天内突然死亡，如耐过48小时，多能康复。成年犬多能耐过，产生坚强的免疫力。,、临床症状和病理变化特征：表现为高热稽留、贫血、血液不易凝结而出血不止，肝小叶中心坏死，肝实质和内皮细胞出现核内包涵体，康复犬的一眼或两眼呈暂时性角膜色素炎症称肝炎性蓝眼病。康复犬长期带毒，并获得免疫力。,2、病原：ICHV。分类地位及形态结构特征：该病毒属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属犬腺病毒型病毒（CAV-I），核酸为双股DNA，球形，正20面体对称，大小直径80100nm，无囊膜，衣壳顶角上有1根纤丝向外突出，长约2050nm。该病毒与引起犬传染性支气管炎（犬窝咳）的犬腺病毒型（CAV-）具有共同的抗原决定簇，但在毒力、抗原结构和致病性等方面都不同，两者具有70%的相同基因，所以在免疫上能交叉保护。,、生长繁殖特征：该病毒能在犬、猴、猪、豚鼠和水貂等肾、肺原代细胞中增殖，易形成蚀斑和核内包涵体。通过细胞传代可导致毒力减弱。、凝集特征：能凝集人O型、鸡、豚鼠红细胞，但不能凝集犬红细胞。,二、疫苗和免疫：（一）疫苗：用于预防犬传染性肝炎的疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗。1、组织灭活疫苗：(1)种毒：为CAV-I标准毒株，也可选择经分离鉴定的犬传染性肝炎病毒强毒株。种毒稀释后，静脉接种易感犬，发病后出现典型临床症状时，捕杀，无菌采取肝、脾组织，用高速组织捣碎机捣碎，用PBS制成20%悬液，加入0.1%0.2%甲醛，37灭活24h，制成组织灭活疫苗。,(2)疫苗检验：按常规进行。安全检验：选择15g左右健康小鼠10只，5只脑内接种0.03ml，5只腹腔接种0.5ml，观察7d应无异常反应；也可选择敏感犬5只，3只皮下接种5.0ml，2只作对照，观察21d无异常反应。效力检验：取免疫犬3只和对照犬2只，用强毒攻击，观察14d，免疫犬应健活，对照犬出现严重症状至少1只死亡。,（3）保存与使用：于4保存，有效期1年。体重3kg以下犬皮下接种3ml，3kg以上犬皮下接种5ml，免疫保护期6个月。,2、细胞培养灭活疫苗：制苗过程：(1)种毒：用CAV-I强毒株。(2)制苗：毒种稀释后接种MDCK（犬肾传代细胞株）单层细胞，37吸附30min，加入EME维持液，继续培养4872h，出现80%以上CPE时收获病毒，TCID5010-6.0/ml。冻融3次，3000r/min离心20min取上清，加入0.2%0.3%甲醛37灭活24h。灭活后进行无菌检验，合格后加入5%7%的氢氧化铝胶，即成犬传染性肝炎细胞培养灭活疫苗。,（3）疫苗检验：常规检验：进行无菌检验，应无菌生长。安全检验：选12月龄未经免疫健康犬3只，其CAV-I抗体效价小于1:4，每只皮下注射疫苗2ml，在1周内应无体温升高、白细胞减少及注射部位红肿等不良反应。,（4）保存与使用：在48保存期1年。妊娠犬产前20d免疫，仔犬在7周龄和9周龄各免疫1次，皮下或肌肉注射1ml/只。,3、犬传染性肝炎活疫苗：种毒选用已适应犬肾原代细胞的CAV-I弱毒株。将种毒稀释后接种MDCK（犬肾传代细胞株）细胞，37吸附30min，加入MEM维持液，培养至CPE达85%以上时收获病毒，冻融3次后，离心除去细胞碎片，加入5%蔗糖脱脂乳保护剂，冻干制成冻干疫苗。效力检验，可取疫苗稀释后做TCID50测定，TCID5010-4.0/ml。,（二）免疫程序：用弱毒苗。首免：9周龄断奶犬接种一次。二免：15周龄加强免疫一次。以后每半年加强免疫一次。犬型腺病毒弱毒苗接种后会出现111天轻度角膜混浊水肿反应。也可用犬型腺病毒弱毒苗接种，既可预防该病，又不会发生角膜水肿。犬传肝的免疫预防在兽医实践中是见效的，原因是疫苗弱毒被接种犬排放到环境，其它犬与之接触而获得免疫，造成了高水平的群体免疫。,第四节猫泛白细胞减少症（FP）,第四节猫泛白细胞减少症（FP）,一、病况与病原概述：1、病况：概念：猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热、猫传染性肠炎、猫细小病毒感染,此病是由猫泛白细胞减少症病毒(felinepanleukopeniavirus,FPV)引起的猫特别是幼龄猫的一种发热性、高度接触性、致死性传染病。该病以体温升高、呕吐、腹泻和白细胞减少为主要特征,传染性极强。,流行特点家猫对FPV易感，断奶不久的幼猫最敏感。除此之外，大多数猫科动物(如山猫、豹猫、野猫、豹、虎、狮)和部分鼬科动物(水貂、臭鼬)也非常易感，浣熊科动物中的长吻浣熊、密熊及小熊猫也可被感染。猫一旦被感染便可迅速流行，多数呈急性经过，死亡率极高,往往形成地方性流行。经过长途运输、饲养条件剧变以及来源不同和不明的猫混合饲养,也会引起该病的急性暴发，死亡率可达90%以上。在母猫繁育季节(冬末至春季)多发，特别是12月至来年的3月发病率可占全年的55.8%。1岁以内的幼猫发病率很高，可达38.5%，随着年龄的增长发病率会有所降低。同时，全窝幼猫发病的情况非常普遍。,临床症状潜伏期为29d，平均为4d。发病早期主要表现为精神倦怠，食欲减退。体温升高到40左右，持续24h，然后恢复到正常，过23d又再次升高，呈现明显的双相热。随着病程的延长，病猫精神极度沉郁，食欲废绝，频繁呕吐，每天呕吐几次到几十次，呕吐物病初为食物，后转为黄绿色胃液，呈顽固性呕吐。34d后腹泻，后期带血，呈咖啡色、脱水，眼球下陷，最后严重脱水，衰竭死亡。妊娠母猫感染后多发生流产、早产、产死胎或畸胎，出生的仔猫表现共济失调等症状。幼猫死亡率最高，可达90%，病程37d。,病理变化鼻、眼出现脓性分泌物，眼球下陷，腹部蜷缩，皮下组织干燥、脱水。剖检时内脏病变主要在消化道，表现为胃肠空虚，黏膜充血、出血或水肿。肠道黏膜出血，在空肠和回肠还有纤维素性渗出物。肠道发生水肿时，可见肠道壁增厚。肠系膜淋巴结肿大、出血,其切面呈现红、灰或白相间的大理石样花纹。胸腺有萎缩、水肿，肝、脾仅见瘀血变化。死于心肌炎综合征的病例，则见肺脏局部充血、出血及水肿，心肌红黄相间呈虎斑状（虎斑心）。,2、病原：FPV。分类地位及形态结构特征：该病毒属于细小病毒科细小病毒属，核酸为单股DNA，球形，正20面体对称，大小直径2024nm，无囊膜。生长繁殖特征：该病毒能在仔猫肾、肺、睾丸等细胞内增殖。除猫的细胞外，还能在水貂和雪貂的组织细胞内增殖。该病毒要在细胞形成单层以前接种病毒，才能达到病毒大量增殖的目的。虽能产生细胞病变但不明显。血凝特性：仅在4下对猴和猪的红细胞有凝集作用。,二、疫苗和免疫：（一）疫苗：用于预防猫瘟热的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。1、弱毒疫苗：选择免疫原性良好的强毒株在同源或异源细胞上驯化致弱,通过蚀斑纯化,筛选出免疫原性好的毒株作为种毒生产疫苗。目前国外已经研制并使用猫泛白细胞减少症-猫鼻气管炎-猫杯状病毒病三联疫苗,免疫试验证明,可使机体同时获得对3种传