基因工程的基本操作程序.ppt

1.2基因工程的基本操作程序，基因工程的基本操作程序，获得目的基因，基因表达载体的构建，目的基因导入受体细胞，操作过程，目的基因的检测和鉴定，目的基因主要是苏云金杆菌耐药基因、植物抗病基因(抗病毒、抗病毒)、人类胰岛素基因等。1)从基因库中获取目标基因。1.什么是基因库？2.如何从基因库中获得我们需要的目标基因？如何获得目标基因，2)，2)利用PCR技术扩增目标基因3)人工合成，一种生物的整个基因，包含部分基因，根据基因的相关信息：如基因的转录产物mrna，1。特定的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _目标基因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，核心，3。剪下的目的基因片段是质粒的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 两个切口获得目的基因的过程，DNA结合酶，重组DNA分子(重组质粒)，相同的限制性酶，目的基因和转运载体的结合过程，事实上重组不同来源的基因的过程。科学家在种植抗虫棉的过程中，通过很多复杂的过程和不懈的努力，取得了成功。最初，将苏云金杆菌的抗虫基因插入载体质粒，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花中没有表达。然后，在插入抗虫基因的质粒上插入启动子(抗虫基因的第一端)，带进棉花受精卵，成熟的棉花植物仍然没有抗虫能力。科学家还在启动子、具有抗虫基因的质粒上插入终结符(抗虫基因的末端)，把棉花受精卵引入体内，结果生长的植物就有了抗虫基因。数据：基因表达载体的构成：目的：在受体细胞中，目的基因稳定存在，使目的基因能够遗传给下一代，同时使目的基因表达并发挥功能。a，目的基因，b，启动子，c，终结器，d，标记基因，(e)，克隆原点，(c)目的基因导入受体细胞，常用受体细胞：动植物细胞，大肠杆菌，土壤农杆菌，以细菌或病毒沿着感染细胞的途径为原则，将目的基因导入受体细胞。转化， 目标基因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的稳定、表达、方法、植物细胞导入、动物细胞导入、微生物细胞导入、基因枪法、花粉管途径法、微注法、感观细胞将DNA (c)靶基因导入受体细胞、(4)靶基因的检测和鉴定、 DNA-RNA分子杂交，抗原-抗体杂交，PCR技术-聚合酶链反应，原理：PCR扩增装置，DNA双链克隆的基本原理，定义：PCR是克隆体外特定DNA片段的核酸合成技术，四种脱氧核苷酸目的基因DNA热变性，降解链；底漆和单链互补性的结合；合成链通过DNA聚合酶作用扩展。，PCR仪器，微型离心管，一次性吸头，调整轮，卸头按钮，推进按钮，卸头，微型吸管，PCR技术放大过程，a，DNA变性(90 95):双股dnna 引物和DNA模板组合在一起，并在本地_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ，氢键，单链DNA，双链，DNA链，用PCR技术扩增目的基因，核，单链DNA，4个核糖核苷酸，RNA聚合酶，ATP，A-UC-GT-AG-AG 1)反转录方法：以目的基因转录的信使RNA为模板，用互补的单链DNA反转录，然后通过酶作用合成双链DNA，获得所需的基因。蛋白质的氨基酸序列，mRNA的核苷酸序列，结构基因的核苷酸序列，目的基因，推测，化学合成，2)根据已知氨基酸序列合成DNA的方法：2。微生物作为受体细胞的原因：目的基因导入微生物细胞的方法，3。转基因方法：大肠杆菌，繁殖快，单细胞，遗传物质相对较少，加工细胞细胞表达载体和易感细胞混合共同细菌：目的基因导入T-DNA，插入Ti质粒，植物细胞整合到受体细胞的染色体上，目的基因的遗传特性稳定和表达，1。农杆菌特征：容易感染双子叶植物和裸子植物。T-DNA在T-DNA中可以转移到受体细胞的染色体上，2。转基因、不同大小电泳、带、琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术，可用于分离、鉴定和纯化DNA片段。大小和形状不同、结构不同的DNA分子在相同的电泳条件下具有不同的迁移率，例如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等，因此可以通过电泳分离。凝胶的DNA与荧光染料溴化乙烷(EB)相结合，可以看到紫外线灯下的荧光带，从而分析实验结果。1.下表对遗传工程上与基因操作相关的名词及其内容进行了准确的组合。2、下一个方法是获取目标基因。()从mRNA逆转录形成基因组库中提取。从受体细胞提取。从受体细胞提取。 DNA转录DNA，PCR技术合成a。，细菌的质粒分子对抗生素耐药b .有利于检测是否引入目的基因。c .增加质粒分子的分子量。容易与外源基因连接。4.对基因工程的叙述仅在a .限制性酶获得目的基因的情况下，b .重组质粒的形成在细胞内完成。c .质粒是载体d .蛋白的结构，提供了合成目的基