抗体药物59634PPT课件

第五章抗体工程药物，一种由抗体体受抗原物质刺激而产生的免疫球蛋白(主要由淋巴细胞产生)，因其与细菌、病毒或毒素等异源物质结合，可在预防和治疗疾病中发挥作用。抗体因其高特异性、有效性和安全性，正在国际药物市场上发展成为一种新型的诊断和治疗药物。一是开发抗体药物，第一代抗体药物是动物多价抗血清。主要用于某些细菌感染性疾病的早期被动免疫治疗。它有一定的疗效，但异源蛋白引起的强烈的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素所取代。第二代抗体药物第三代抗体药物，1890年白喉抗毒素，多克隆抗体，第一，抗体药物的发展历程，单克隆抗体及其衍生物由杂交瘤技术制备，由第一代抗体药物第二代抗体药物。第三代抗体药物，1。单克隆抗体杂交瘤技术诞生了。图1。治疗性抗体的发展历程和事件。2.淋巴瘤抗体的成功应用。3.OKT3单克隆抗体已被美国食品及药物管理局批准上市。4.用于肿瘤治疗的单克隆抗体无效。5.抗内毒素单克隆抗体未能用于感染性休克的治疗。6.反17-1A和ReoPro被列入名单。7.美国食品和药物管理局批准了21种治疗性单克隆抗体上市。1.抗体药物的发展历程。杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物用于第二代抗体药物。第三代抗体药物基因工程抗体是基因工程抗体的概念，它将制备单克隆抗体的细胞工程技术与生产重组分子的基因工程技术和蛋白质工程技术相结合，根据不同的需要加工和改造编码蛋白的基因，并在转染合适的受体细胞后表达抗体分子。这种基因重组抗体被称为基因工程抗体，也称为重组抗体。基因工程抗体的优点：通过基因工程技术的改造，可以减少甚至消除人体对抗体的排斥反应；(2)基因工程抗体的分子量小，可以部分减少抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病变的核心部分；(3)根据治疗需要，制备新的抗体；(4)可以采用原核细胞、真核细胞、植物等表达形式大量表达抗体分子，大大降低了生产成本。二、抗体药物的应用进展目前正在开发和投放市场的抗体药物主要有：逆转器官移植排斥反应、肿瘤免疫诊断、肿瘤免疫显像、肿瘤导向治疗哮喘、银屑病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、急性心肌梗死、脓毒症、多发性硬化等自身免疫性疾病、抗独特型抗体作为肿瘤分子疫苗治疗肿瘤的多功能抗体(双特异性抗体、三特异性抗体、抗体细胞因子融合蛋白、抗体酶等)。)，(1)抗体诊断试剂，1)用于血清学鉴定的抗体试剂，用于病原体鉴定的抗体试剂，用于乙型肝炎病毒表面抗原的抗体试剂，用于妊娠诊断试剂的反向被动血凝诊断试剂，抗ABO血型系统血清， 用于鉴定致病菌的抗体(1)常用诊断血清的种类和用途(1)沙门氏菌诊断血清(2)志贺氏菌诊断血清(3)致病性大肠杆菌诊断血清(2)诊断血清的制备步骤(1)细菌抗原的制备(2)动物免疫和抗体血清的制备(2)用于免疫标记技术的抗体试剂， 荧光抗体诊断试剂(1)荧光抗体的制备(2)免疫荧光法免疫酶抗体诊断试剂(1)免疫酶染色法抗体诊断试剂(2)酶免疫测定抗体诊断试剂放射免疫测定抗体诊断试剂，酶免疫测定抗体诊断试剂HBsAg酶标诊断试剂HBeAg酶标诊断试剂HAVAg酶标诊断试剂酶标抗放射性核素标记抗体法：氯胺-T法碘量法。抗原测定包括：夹心法间接法竞争法常用标记抗体试剂HBsAg放射性核素标记抗体诊断试剂HBeAg放射性核素标记抗体诊断试剂HAV抗原放射性核素标记抗体诊断试剂甲胎蛋白放射性核素标记抗体诊断试剂癌胚抗原放射性核素标记抗体诊断试剂。放射免疫显像定位技术在体外将抗肿瘤单克隆抗体(Ab)和二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)偶联到Ab-DTPA中，在体内注射后可与体内组织结合。由于抗体分子量大，需要3天才能完成。3天后，注入放射性核素In-113M(半衰期为100米)。因为DTPA是一种重金属离子络合剂，In-113M可以结合到DTPA分子上来观察肿瘤组织。这个过程可以在2小时内完成。3。指导诊断药物，放射免疫测定的优点：体内肿瘤定位准确，准确率达90%，灵敏度达100%。可在体内检测到0.5厘米大小的病灶，并可检测到肺和脑的转移灶。(3)小分子抗体容易到达肿瘤部位，并能显著提高氮/氮比值。抗体可在肿瘤部位保留6-9天。可观察抗体在血液中的半衰期及可能的不良反应。建立预定位技术需要解决三个问题：抗体在肿瘤组织中滞留时间超过7天。Ab-DTPA共轭相对稳定；内源性金属离子对DTPA的阻滞作用较小。(2)抗体治疗药物，即基于抗体的导向治疗药物，尚未成熟。1.放射性核素标记抗体治疗药物抗体作为放射性核素的导向载体，标记操作简单，剂量小。放射性核素标记抗体对肿瘤细胞有较大的杀伤作用。2、抗癌药物偶联抗体药物常用抗癌药物甲氨蝶呤(MTX)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)等。以人血浆白蛋白为中间载体，可以明显增加每分子抗体携带的MTX量，从而使体外细胞毒性增加一倍。3、毒素偶联抗体药物1)免疫毒素及其替代产品在导向药物中，毒素和抗体的交联产物称为免疫毒素。第一代免疫毒素是一种交联产物，含有A链和B链完整的毒素和抗体，其中B链是非特异性结合的，使其仅适用于体外。第二代免疫毒素是抗体或抗体片段与毒素A链或类似于A链的单链核糖体失活蛋白的组合。因此，避免了第一代免疫毒素的非特异性，使其在体内具有一定的抗肿瘤作用。第三代免疫毒素：重组免疫毒素利用基因克隆来修饰毒素基因和小分子抗体基因的重组表达。特异性好，稳定性强，渗透性好，免疫原性低，可大量制备。(2)免疫毒素的制备(1)毒素来源细菌毒素植物毒素(2)载体类型(1)小分子抗体FV或SCFV (2)细胞生长因子(3)激素(4) CD4，(3)制备方法首先克隆毒素基因，然后利用基因重组技术去除毒素中的非特异性细胞结合位点基因。然后将修饰的毒素基因与载体基因重组，并转移到受体细菌中进行表达，形成融合蛋白，然后对其进行纯化，获得重组免疫毒素。(3)免疫毒素的临床应用可治疗肿瘤和自身免疫性疾病，并可治疗组织移植排斥反应。它可以单独给药或包裹在脂质体和其他微粒中。3、国际抗体药物研究和产业化现状，2004年已有22种抗体药物上市，主要是人源化和嵌合抗体。转基因作物生产的抗体价格低廉，前景广阔。全球超过225家公司正在开发用于临床治疗的单克隆抗体。据估计，有335种产品正在开发中，其中64%处于临床前研究阶段。临床应用：癌症占50%，自身免疫性疾病占18%，感染占13%，心血管疾病占6%，器官移植排斥占5%，其他疾病占8%。图2抗体药物销售趋势。2000年销售额达到29亿美元，2002年接近40亿美元，年平均增长率为30%。2008年的市场销售额预计将达到140亿美元。4.当前(1)细胞表面抗原，如血型抗原、分化簇、组织相容性抗原、膜受体等。(2)肿瘤相关抗原，如胃癌、肝癌、结直肠癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌、神经胶质瘤、乳腺癌等。(3)病原微生物，如流感病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒及其他病毒抗原；痢疾志贺氏菌脂多糖、沙门氏菌和其他细菌抗原；寄生虫抗原，如恶性疟原虫和日本血吸虫；大肠杆菌内毒素、破伤风类毒素和其他微生物类毒素抗原。(4)其他抗原，如细胞因子、酶、血浆原蛋白、免疫球蛋白