DNA琼脂糖凝胶电泳制备全过程图解_第1页
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文档简介

.,DNA琼脂糖凝胶电泳,.,实验原理,琼脂糖为链状多糖绳状琼脂糖束大网孔型凝胶分离、鉴定、纯化DNA影响DNA迁移率的因素：DNA分子的大小、构象，凝胶浓度，电压，电泳缓冲液的组成缓冲液pHDNAPi，DNA带负电荷，迁移率与分子量对数成反比DNA分子构象影响迁移率：共价闭环DNA线状DNA开环DNA,.,不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围,琼脂糖浓度（%）分离范围（kb）0.35-600.61-200.70.8-100.90.5-71.20.4-61.50.2-42.00.1-3,.,琼脂糖凝胶中DNA的观察,溴化乙锭（EB）DNA：紫外光下红色荧光,.,主要实验器材,.,电泳槽结构,.,操作步骤,琼脂糖凝胶的制备：溶化，冷却，EB凝胶板的制备：加梳子，倒胶样品的制备：样品+1/5体积溴酚蓝加样：加样端为负极（黑）电泳：5V/cm观察：紫外灯下观察，照相,.,溶胶,.,准备胶槽,.,凝胶冷却至50C，加EB至终浓度0.5g/ml,.,铺胶,.,凝胶凝固后取出梳子,.,加缓冲液,.,准备样品,.,点样,.,电泳,.,注意观察溴酚蓝染液的迁移,.,紫外灯下观察电泳结果,.,照相,
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