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文档简介
循环、呼吸、泌尿综合实验 通过观察动物在整体情况下,各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变,加深对机体在整体状态下的整合机制的认识。一、 材料与方法1. 材料: 健康成年家兔、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素生理盐水、1:10000去甲肾上腺素、呋塞米(速尿)、神经垂体素、20%葡萄糖溶液、生理盐水、3%乳酸、CO2气体、手术器械一套、兔手术台、动脉夹、注射器(1mL、5 mL、50 mL)计算机生物信号采集处理系统(刺激器、计滴器)、刺激电极、压力换能器、气管插管、橡皮管,球囊、动脉插管,膀胱套管、刻度试管、金属钩、铁支架、丝线 。2. 方法:2.1实验的准备(1)麻醉固定:动物称重后,自耳缘静脉缓慢注入20%氨基酸乙酯溶液 (5mL.kg-1),麻醉后仰卧固定于兔手术台。(2)颈部手术: 行常规气管插管术; 行右侧颈总动脉插管术,并连接压力换能器,记录血压。(3)上腹部手术:上腹部剪毛,切开胸骨剑突部位的皮肤,沿腹白线切开长约2cm的切口,小心分离暴露剑突软骨及骨柄,用金冠剪剪断剑骨柄,将缚有长线的金属钩钩于剑突中间部位,线的另一端连张力换能器,记录呼吸(见呼吸实验)。(4)下腹部手术:下腹部剪毛,沿耻骨上缘正中线切开皮肤约4cm,剪开腹壁(不要伤及腹腔内器官),在腹腔底部找出两侧输尿管,作膀胱插管,暴露膀胱行膀胱漏斗结扎术。2.2连接实验装置 分别将压力换能器、张力换能器和记滴器与计算机生物信号采集处理系统相连, 选定各信号输入的通道,调整好波宽、增益、刺激强度、时间常数等实验参数,调整动脉血压波形、呼吸波形和尿滴,以便获得更良好的观察效果。2.3实验项目 (1)记录一段正常的动脉血压曲线、呼吸曲线和尿量。 (2)吸入CO2气体:将装有CO2气囊(可用呼出气体)的管口对准气管插管,观察 血压、呼吸及尿量的变化。(3)增大无效腔:在气管插管的一侧管接上一长50cm的胶管观察血压、呼吸及尿量的变化。(4)改变血液的酸碱度 由耳缘静脉较快的注入3%乳酸2mL,观察H+增多时对血压、呼吸及尿量的影 响。(5)夹闭颈总动脉:待血压稳定后,用动脉夹夹住左侧颈总动脉,观察血压、呼吸及尿 量的变化。出现明显变化后去除夹闭。(6)电刺激迷走神经和减压神经:将保护电极与刺激输出线(通道)连接,待血压恢复后,分别将右侧迷走神经、减压神经轻轻搭在保护电极上,选择刺激强度6V,刺激频率4050次.S-1,刺激1520s,观察血压、呼吸及尿量的变化。(7)切断迷走神经:剪断左侧迷走神经,记录并观察呼吸运动的变化。然后剪断右侧迷走神经,记录并观察呼吸运动的变化。(8)以2V、25Hz,持续10s,波宽2ms的串刺激刺激右侧迷走神经中枢端,记录并观察呼吸运动的变化。(9)静脉注射呋塞米(速尿):待血压恢复后,以5ml/kg体重剂量由耳缘静脉注射呋塞米,观察血压、呼吸及尿量的变化。(10)静脉注射去甲肾上腺素(NE):待尿量恢复后,由耳缘静脉注射0.1g/l去甲肾上腺素0.3ml,观察血压、呼吸及尿量的变化。(11)静脉注射葡萄糖:待尿量恢复后,由耳缘静脉注射20%葡萄糖5mL,观察血压、呼吸及尿量的变化。(12)静脉注射垂体后叶素:待尿量恢复后,由耳缘静脉缓慢注射垂体后叶素2U,观察血压、呼吸及尿量的变化。三、结果 平均动脉压(mmHg)呼吸流量(ml/s)尿量对照105.093.389.440.9正常增大无效腔105.533.1831.56.5增加吸入CO2102.871.3196.910增加乳酸120.365.7053.16.6增加夹闭右颈总动脉132.892.569.60.9增加葡萄糖105.346.239.61增加刺激减压神经64.471.239.40.8减少刺激迷走神经78.616.1710.2减少NE137.5214.719.40.9减少Ach减少呋塞米98.746.399.91.1增加垂体后叶素107.325.399.41.1减少四、讨论与分析 1. 增加浓度:表现家兔呼吸幅度增加,尿量增加,血压无明显变化。原理动脉血中CO2分压升高,CO2的浓度也增高,可使呼吸加深加快,肺通气量增加。其机制是:通过延髓中枢化学感受区兴奋,使呼吸中枢兴奋由于血液CO2能迅速通过血-脑脊液屏障,由于脑脊液的缓冲能力差,故PH值下降,从而使中枢化学感受区周围液体中的氢离子浓度升高。刺激中枢化学感受区,引起呼吸中枢兴奋,呼吸增强。通过外周化学感受器兴奋,反射性地引起呼吸中枢兴奋当血中CO2浓度升高时,可刺激颈动脉体和主动脉体,冲动经窦神经和主动脉神经,然后分别并入第九与第十对脑神经入延髓,反射性地增强呼吸运动。吸入气中CO2浓度增加,将导致肺泡气PCO2升高,动脉血CO2浓度也随之升高,呼吸加深加快。 2. 增大无效腔:表现呼吸深度加深,尿量增加,血压无明显变化。 原理实现方法:通过接上一根长50cm胶管的方法来增加气道长度;增加气道长度就等于增加大家兔解剖无效腔,增加无效腔从而减少了肺泡的通气量,使肺泡气体更新率下降造成动脉血PO2降低,PCO2升高,反射性引起呼吸运动加强;PO2降低 和PCO2升高都可引起呼吸运动加强。但以PCO2的作用为主,CO2对呼吸的刺激作用主要通过刺激中枢化学感受器,进而引起延髓呼吸中枢兴奋,导致呼吸加快。也可刺激颈动脉体和主动脉体外周化学感受器,通过窦神经和主动脉神经传入延髓呼吸中枢,使呼吸运动加强,PO2下降主要是通过刺激外周化学感受器,引起呼吸中枢兴奋;气道加长使呼吸气道阻力增大,反射性呼吸加深加快。3. 静脉注射乳酸溶液:表现呼吸加深,但程度较小,血压升高,尿量增加。 原理注射乳酸,使家兔血液中的。H+浓度升高,刺激外周化学感受器和中枢化学感受器中枢化学感受器对H+的敏感较外周的高,但H+不易通过血-脑屏障,因而此时H+的效应主要是刺激外周化学感受器,使膈肌、肋间外肌收缩,肺通气量增加,呼吸加深加快。4.夹闭右侧颈总动脉表现家兔的血压上升,尿量增加,呼吸无明显变化。原理当正常情况时:心脏射血经主动脉弓、颈总动脉而到达颈动脉窦。当血压升高时,该处动脉管壁受到机械牵张而扩张,从而使血管壁外膜上作为压力感受器的感觉神经末 梢兴奋,引起降压反射,使血压下降。当夹闭颈总动脉时:心室射出的血液不能流经该侧颈动脉窦,使窦内压力降低,压力感受器受到刺激减弱,经窦神经上传中枢的冲动减少,降压反射活动减弱,因而心率加快、心缩力加强、回心血量增加(因容量血管收缩)、心输出量增加;阻力血管收缩,外周阻力增加。导致动脉血压升高。5.刺激主动脉神经表现家兔血压明显见降低,尿量减少,呼吸无明显变化。 原理主动脉神经是单纯的传入神经,具有稳定动脉血压的作用。当动脉血压升高或降低时,压力感受器的传入冲动也随之增多或减少,使减压反射相应地增加或减弱,以 保持动脉血压相对稳定。当电刺激主动脉神经时:主动脉神经传入冲动增多,使心迷走中枢兴奋、心交感中枢抑制、缩血管中枢抑制,使迷走神经传出冲动增加,交感神经传出冲动减少,而至心率减慢、心缩力减弱、小静脉舒张回心血量减少,心输出量减少;小动脉舒张,外周阻力降低,最终导致血压下降。6.刺激迷走神经表现家兔的血压下降。原理迷走神经含有感觉、运动和副交感神经纤维。这些纤维末梢释放的递质是乙酰胆碱(ACh),ACh与心肌细胞膜上的M胆碱受体结合,可导致心率减慢,心房肌收缩力减弱,心房肌不应期缩短,房室传导速度减慢,甚至出现房室传导阻滞,即负性变时、变力和变传导效应。一般说,右侧迷走神经以支配窦房结为主,而左侧迷走神经则主要支配房室传导系统。在实验中,刺激外右侧迷走神经,其末梢释放的Ach:一方面使窦房结细胞在复极过程中K+外流增加,结果使最大复极电位绝对值增大;另一方面,使自动去极速度减慢。这两种因素均使窦房结自律性降低,心率因而减慢,血压降低。刺激强度加大时,甚至可出现窦性停搏,使血压迅速下降的情况。7.切断迷走神经:表现切断一侧迷走神经家兔呼吸加深,但呼吸频率变小;切断另一侧迷走神经,家兔呼吸幅度进一步加深,呼吸频率进一步减小。原理迷走神经的作用:迷走神经中含有肺牵张反射传入纤维,当吸气运动使肺扩张时,该神经纤维兴奋,冲动传入中枢后引起吸气切断机制,吸气神经元活动抑制,吸气停止转为呼气运动,从而加速吸气呼气运动的交替。当切断迷走神经后,中断了肺扩张反射的传入通路,反射作用减弱,从而出现了呼吸程度加深,呼吸速度减慢的现象。(另外,迷走神经是外周化学感受性反射的传入神经,切断两侧迷走神经,呼吸中枢将不能感受外周的化学性刺激,失去外周的化学感受器反射调节作用)8. 电刺激迷走神经中枢端:表现家兔的呼吸变得浅快,血压下降,尿量减少。 原理迷走神经中含有肺牵张反射传入纤维,肺的牵张反射包括:肺扩张后引起吸气活动的抑制,呼气加强;肺缩小后引起呼气活动抑制,吸气加强的过程。这两种反射传入神经纤维都经由迷走神经传入中枢,调节呼吸运动。电刺激迷走神经中枢端,引起这两种纤维成分都同时持续兴奋,故家兔的呼吸运动变得浅快,严重时甚至将导致呼吸运动的暂停。9. 静脉注射呋塞米:表现尿量增加,血压和呼吸无明显变化。原理静脉注射速尿后尿量增加,因为速尿一方面使肾血流量增加,肾小球的过滤作用增强从而使尿量增加;另一方面通过调节载体转运功能,使Nacl的重吸收量减少,使肾小管液渗透压下降,肾髓质组织间液渗透压下降,最终影响肾小管重吸收水的功能下降,尿量增多,尿速变快。10. 静脉注射去甲肾上腺素:表现家兔的血压上升,尿量减少,呼吸无明显变化。原理去甲肾上腺素主要与受体结合,也可与心肌1受体结合,但与血管平滑肌的2受体结合的能力较弱。通过受体的激动,可引起血管极度收缩,使血压升高,冠状动脉血流增加;通过受体的激动,使心肌收缩加强,心排出量增加。总的来说其作用是使外周大多数血管收缩,外周阻力明显增大,动脉血压明显升高。同时,去甲肾上腺素可作用于心肌1受体而使心跳加快加强,但在整体内由于它使动脉血压明显升高,通过降压反射增强而引起心率减慢。去甲肾上腺素可使肾小球入球小动脉收缩,使肾小球毛细血管中血流量降低,滤过率减少,尿量减少,尿速变慢。11.静脉注射葡萄糖:表现尿量增加,血压和呼吸无明显变化。原理耳缘静脉注射葡萄糖溶液,加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的肾糖阈,经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收,致使小管液中出现较多的葡萄糖,使肾小管液中的渗透压增加,防碍水的重吸收,于是水随葡萄糖一起排出(在糖的定性试验中,我们从尿液中检测到葡萄糖),尿量增加,尿速再次变快。12. 静脉注射垂体后叶素:表现尿量减少,血压和呼吸无明显变化。原理垂体后叶素增加了远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性,促进了肾小管和集合管对水的重吸收,尿量减少,尿速变慢。五、结论1
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