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文档简介
。枸杞多糖提取工艺的研究:药物制剂名称:李罗导师:张爽,毕业论文,目录,摘要第1章概述1.1多糖和枸杞多糖1.1.1多糖和枸杞多糖1.1.2多糖和枸杞多糖的药理作用1.2本研究的目的和意义1.3多糖的提取方法第2章枸杞多糖的提取2.1实验材料和仪器2.2实验程序和方法2.2.1多糖含量标准曲线的绘制。2.2.2枸杞多糖得率的计算2.2.3超声波辅助提取枸杞多糖第三章试验结果与分析3.1多糖含量标准曲线的绘制3.2单因素试验结果3.3正交试验结果超声波辅助提取枸杞多糖与分析3.4正交试验结果验证3.5总结第四章结论第五章展望参考鸣谢,摘要:枸杞是茄科植物枸杞的干燥成熟果实,主要产于河北和宁夏,是药食两用植物,味甘、性温、味甘、肾经,具有多种特性。枸杞多糖是枸杞的主要活性成分之一。其中,枸杞多糖的化学、药理和临床研究备受关注。许多研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、抗衰老、增强造血功能、防止遗传损伤、抑制肿瘤生长和细胞突变等功能。枸杞多糖具有多种药理和生理功能,因此受到广泛关注。本实验旨在研究超声波辅助法对枸杞多糖提取的影响。目的研究超声波辅助提取在枸杞多糖提取中的应用,并选择最佳提取条件。方法采用:正交试验,考察超声辅助提取枸杞多糖的加水量、提取时间、提取温度和超声功率。以枸杞多糖得率为评价指标,找出最佳提取条件。结果当加水量为20倍,提取时间为40分钟,提取温度为80,超声功率为250瓦时,枸杞多糖提取率最高,达到3.06%。结论:超声辅助提取法可作为枸杞多糖的有效提取方法。枸杞多糖;超声波辅助提取;正交实验。Abstraet,Ch .WolfBerry theMarefruitiageand MostlyPlantedinhebeiand宁夏. itisakinodefeandofeficinallPlantandhasvariopharmacologicaleffectandbiologalfacti on .ch . WOLFberrypolySudithemainfunctioncomponentinch .枸杞. theudyofch . WOLFberryfocusattentionuponchemistry,pharmacologyandclinic .IstReportedThatch . Wolfberrybeabletobuildupimmunicitycapability,resistcancer,preventconsenescence,enhancehematopoieticfunction,avoldgenetictrauma,restraintumurgrowindcellexchange .Ch . Wolfberrypolysicydeisbloadeatended,因为它具有多种药理作用和生物作用。嘿。methods : usingthemethodofsorthogonalexperience,theultrasonicassistedrightactionoflyBabarumpolysicydesbywater,extractiontime,extraction temperature and dultrasonicpowereweresthed,inodertolbprateaseevaluationindex,fintheoptimalextractionconditions of .结果Results:Theamountofwaterto20times次,提取时间为40,提取温度为80,theultrasonicpower 250 wwolberrypoly糖deyed,高达3.06%,结论: ultrasoundsassistedextractionoflymium barbarumpoly糖deextractioncanuseaseffectiveemethod .关键字: BP;提取;正交试验,第一章概述了多糖又称多糖,是由十几个单糖基团通过万向键连接而成的一种结构复杂的高分子化合物。一般来说,多糖由超过100个甚至数千个分子量在几万到几百万之间的单糖组成。它们是构成生命活动的四种基本物质之一,与生命密切相关1.1多糖和枸杞多糖概述1.1.1多糖和枸杞多糖,多糖的分类3:多糖根据来源不同可分为三类:植物多糖、动物多糖和微生物多糖。常见的植物多糖包括淀粉、纤维素、葡聚糖、果聚糖、半纤维素、树胶、粘液、角叉菜胶等4。常见的动物多糖包括糖原、几丁质、肝素、硫酸软骨素、透明质酸等。常见的微生物多糖包括黄原胶等。按生物功能多糖可分为储能多糖和结构多糖,结构多糖是一种水不溶性多糖,分子为直链糖链型,如纤维素、甲壳素等。储能多糖可溶于热水形成胶体溶液,并可被酶水解释放单糖提供能量。分子为支链糖链型,如淀粉、肝糖原等。根据微生物中多糖的分泌部位,可分为胞内多糖、细胞壁多糖和胞外多糖。胞外多糖是微生物大量生产的多糖,易于从菌体中分离出来,从而实现工业化生产。多糖可分为游离多糖和结合多糖(如蛋白聚糖、脂多糖等)。)根据现有状态。多糖根据分子结构的组成可分为同多糖和异多糖。同聚糖是由单糖分子缩合形成的多糖。在自然界中,如淀粉和己糖(分别是植物和动物体内葡萄糖的储存形式)以及纤维素(植物细胞的主要结构成分)都是由葡萄糖组成的。杂多糖是由两种以上的单糖如透明质酸、硫酸软骨素等缩合而成的多糖。一些杂多糖由含有糖胺的重复二糖系列组成,称为糖胺聚糖,也称为氨基多糖、粘多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要成分,根据重复二糖单位的不同,可分为五类:硫酸软骨素:硫酸层酸、透明质酸、肝素、硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素5,6。1.1.2多糖和枸杞多糖的药理作用。自20世纪70年代以来,科学家发现多糖和糖复合物参与并调节细胞的各种生命现象,尤其是免疫调节。20世纪80年代,分析、测序、合成和结构等现代生物技术的成熟导致了多糖研究的深化。发现多糖的糖链能控制细胞分裂和分化,调节细胞生长和衰老,在分子生物学中起决定性作用。20世纪80年代后期,糖蛋白糖链的发现与细胞识别和免疫保护等许多生理功能相关,导致了“糖生物学”和“糖工程”两个新学科的形成和迅速发展。近年来,多糖,尤其是中药多糖,具有增强免疫力、抗肿瘤、抗衰老等药理作用。枸杞多糖是枸杞的有效成分之一。研究发现,枸杞多糖不仅是一种保健功能因子,还是一种非特异性免疫增强剂,具有调节免疫功能、降血糖、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、增加造血功能、防止遗传损伤等功能。7 11。现代医学研究证明,枸杞具有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血脂、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、护肤、健脑、解毒、保护生殖系统和抗辐射损伤等16项功能。现代中医药科学研究表明,枸杞滋补肝肾,具有人参、当归、黄花、肉桂等优点。它的营养价值很高,所以它既是食物又是药物。本研究的目的和意义是研究超声波辅助提取在枸杞提取中的应用溶剂性质、提取温度和时间都会影响提取效果。多糖提取中常用的酶包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶和复合酶。杨云等人用蛋白酶提取大枣多糖12号,孟庆凡等人用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶复合酶提取百合多糖13号,林俞晔和杨红用它提取银耳多糖14号,取得了良好的效果,不仅提高了多糖的得率,而且缩短了提取时间。1.3多糖的提取方法,此外,采用超声波、微波等技术有效提高多糖的产率和产品质量,缩短反应时间。李钟Ok等用超声波提取灵芝多糖15,刘霞等用超声波提取甘草多糖16,多糖得率明显提高。此外,李富荣和吕波用微波提取刺五加多糖17,孙平等用微波提取甘草多糖18,也取得了良好的效果。根据多糖的性质和结构,可以采用热水提取、酸提取、碱提取、超声波提取、微波提取、超声波辅助提取和微波辅助提取等方法。前三种方法不仅耗时,而且酸和碱都容易破坏多糖的化学结构。然而,超声波提取时间相对较短。参考赵颖的文献20对柿子多糖的提取、分离、结构分析和体外抗氧化作用,采用超声波辅助提取。第二章枸杞多糖的提取。材料、试剂、仪器产地或生产厂家葡萄糖标准(纯度=99%紫外)中国食品药品检验所枸杞Xi安盛兴中药饮片有限公司(宁夏)石油醚(分析纯度)红岩试剂厂H2SO4(分析纯度)北京化工厂苯酚(分析纯度)红岩试剂厂乙醇(分析纯度)天津河东区红岩试剂厂氯仿(分析纯度)北京化工厂KQ5200DE数控超声波清洗机昆山超声波仪器有限公司RE.52A旋转蒸发器上海安亭实验仪器有限公司S2S数字显示恒温水浴锅天津泰斯仪器有限公司DHC.9502A电热恒温吹风干燥机上海姬阆实验设备有限公司SHB-III循环水真空泵郑州长城科工贸有限公司精密电子天平上海第二分析仪器厂UV752紫外可见分光光度计上海精密科学仪器有限公司2.1实验材料和仪器表1实验材料和仪器、2.2实验步骤和方法2.2.1多糖含量标准曲线的绘制,用硫酸-苯酚法改进。准确称取25.0毫克无水葡萄糖标准品,放入25毫升容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,配制1毫克/毫升储备液,分别准确吸收0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5毫升储备液,放入25毫升容量瓶中,加入1.0毫升5%苯酚溶液,摇匀,用移液管垂直快速加入5.0毫升浓硫酸,立即摇匀,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,煮沸;冷却后,用分光光度计在490纳米波长下测量吸光度值。以样品的糖含量C(毫克/毫升)为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线并计算回归方程。嘿。 2.2.2枸杞多糖产量计算21,枸杞粗多糖质量(G)多糖产量=100%(式2-1)枸杞原料质量(G), 2.2.3超声波辅助提取枸杞多糖2.2.3.1枸杞多糖提取工艺22,枸杞粉碎石油醚回流脱脂(水浴温度60)过滤滤渣风干称样(预处理样品)超声波提取抽滤粗多糖提取液浓缩至原体积的1/4醇沉脱蛋白Sevag 水溶解二次醇沉冷冻干燥枸杞粗多糖,2.2.3.2单因素实验,(1)料液比对枸杞多糖得率的影响(2)超声波功率对枸杞多糖得率的影响:称取10克中碎枸杞,超声波功率为100、150、250、300 W,固液比为1:20,在90下提取2次,根据枸杞多糖得率确定超声波功率。(3)提取温度对枸杞多糖得率的影响:称取10克粉碎的枸杞,以枸杞多糖得率为指标,采用60、70、80、904个温度水平,料液比为1:20,提取2次,每次30分钟,确定提取温度。(4)超声波处理时间对枸杞多糖得率的影响:称取10克中碎枸杞,超声波处理时间分别为20、25、30、35和40分钟,固液比为1:20,在90下提取2次,根据枸杞多糖得率确定超声波处理时间。嘿。 2.2.3.3超声波辅助提取枸杞多糖的正交试验24,25。在单因素试验的基础上,以枸杞多糖得率为考察指标,采用L9(34)正交表确定了枸杞多糖超声波辅助提取的最佳工艺参数,并从料液比、提取温度、提取时间和超声波功率4个因素进行了正交试验。正交试验的因子水平见表2。称取枸杞9份,适度粉碎,每份10g,按照正交实验设计条件提取。每次提取后过滤,合并滤液,浓缩至10毫升备用。(a)超声波功率/水(B)提取温度/(C)提取时间/分钟(d)110:15030223203360150353233601309040,表2正交试验因素为超声波辅助提取枸杞多糖(LBP)表2醇沉26),本研究采用95%乙醇沉淀枸杞多糖。当提取液浓缩至原始体积的1/4时,加入4倍体积的95%乙醇以完全沉淀多糖,在脱蛋白后多糖再次沉淀。2.2.3.5Sevag法
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