flcAAA生物技术题-25

名词解释：（每题3分）1、背景着色 2、一抗和二抗3、探针4、免疫组织化学技术答案：名词解释：1、是指免疫组化过程中产生的非检测抗原（或抗体）的着色，又称非特异性着色，往往造成假阳性。可干扰显色结果的判断，因此染色时，应尽量减小或消除背景着色。2、第一抗体，简称一抗（Ab1）：是针对待测抗原的抗体。第二抗体，简称二抗(Ab2)：是用一抗作为抗原免疫另一种动物制备的抗体3、探针是指已知碱基序列的、用标记物标记了的一段核苷酸片断，用来检测组织或细胞内的某一特定DNA片段或RNA片段。4、是应用抗原、抗体间特异性免疫反应的原理,用标记物标记的已知抗体（或抗原）检测组织细胞内的蛋白质、多肽等相应的抗原（或抗体）的方法。选择题A型题一、选择题 （一）A1型题(标准型)1.免疫组化技术的关键步骤是 A.标本处理 B.抗体的处理与保存 C.免疫染色D.设立对照试验 E.结果判断2.免疫组化技术的首要试剂是 A.抗原 B.抗体 C.标记物D.固定剂 E.洗涤液3.酶免疫组化技术中，关于标本处理的说法正确的是 A.充分洗后于室温用0.3%H2O2和80%甲醇处理2030min。B.充分洗后于室温用0.3%H2O2和80%甲醇处理4050min。C.充分洗后于室温用0.5%H2O2和90%甲醇处理2030min。D.充分洗后于4用0.3%H2O2和80%甲醇处理2030min。E.充分洗后于4用0.3%H2O2和80%甲醇处理4050min。4.PAP法是Sterberger等于哪一年建立的 A.1950B.1960C.1970D.1980E.19905.PAP复合物中的酶是 A.辣根过氧化物酶B.碱性磷酸酶C.葡萄糖氧化酶D.胃蛋白酶E.胶原酶6.PAP的特点是几个抗酶抗体和3个过氧化物酶分子组成复合物，结构非常稳定 A.1B.2C.3D.4E.67.双桥PAP法建立于哪一年A.1955B.1965C.1970D.1975E.19858.PAP法中的“桥”是 A.第一抗体B. 第二抗体C. 第三抗体D.亲和素E.第四抗体9.ABC技术由美籍华人Hsu于哪一年建立，已广泛应用于免疫学检测技术 A.1961B.1975C.1981D.1985E.199010.ABC法中的“桥”是指 A.第一抗体B. 第二抗体C. 第三抗体D.亲和素E.链霉素亲和素11.LSAB法的操作时间仅为ABC法的多少，具有实用价值。 A.1/2左右B.1/3左右C.1/4左右D.1/5左右E.1/6左右12.双标记荧光免疫法中，如用罗丹明标记A抗体，呈什么颜色，用异硫氰酸荧光素标记B抗体，呈什么颜色 A.黄绿色，橘红色B.橘红色，黄绿色C.红色，淡黄色D.淡黄色，红色E.橙黄色，浅绿色13. 荧光免疫间接法比直接法荧光增强多少倍，敏感性提高多少倍A.12B.24C.36D.48E.51014.免疫组化法吸收试验是用过量已知抗原与抗体在多少度以下充分反应，离心后再行免疫组化染色 A.4B.20C.40D.37E.5015.胶体金标记蛋白加稳定剂后，在一定浓度下，4可保存多久 A.几天B.几个星期C.半个月D.几个月E.几年16. 胶体金标记蛋白时，待标记蛋白的实际用量是在稳定1ml胶体金所需蛋白基础上再增加多少A. 510%B. 1020%C. 2030%D. 3040%E. 4050%17.铁蛋白是一种含铁 多少，相对分子量为650900KD的球形蛋白 A.15%B.20%C.25%D.30%E.35%18. 铁蛋白含铁核心直径为多少 A.34.5nmB.47.5nmC.3.57nmD.4.58nmE.26nm19. 铁蛋白的中央的含铁核心约含有多少个铁原子 A.1001000B. 10002000C. 20003000D. 30004000E. 4000500020.铁蛋白是由几个亚基组成的高电子密度氢氧化铁胶态分子团 A.2B.3C.4D.5E.621.下列哪种方法制备的胶体金是红色 A.白磷B.维生素CC.乙醇-超声波D.枸橼酸三钠E.硼酸钠22下列哪种方法制备的胶体金是酒红色 A.白磷B.维生素CC.乙醇-超声波D.枸橼酸三钠E.硼酸钠23PAS反应是检测组织内的：A.核酸 B.脂C.蛋白质D.多糖E.抗原（二）A1型题（否定型）1.下列技术中不属于免疫细胞组织化学技术 A.酶免疫组织化学技术 B.荧光免疫组织化学技术C.亲和免疫细胞组织化学技术 D.免疫金（银）细胞染色组织化学技术E.ELISA2.组织细胞标本固定的目的，下列说法不正确的是 A.使细胞内蛋白质凝固 B.防止细胞自溶C.保持细胞固有形态与结构 D.使细胞脱落E.保存组织细胞的抗原性3.免疫染色过程中使用蛋白酶消化法，下列说法错误的是 A.暴露抗原 B.增加细胞和组织的通透性C.利于抗体与抗原最大限度的结合 D.限制抗体与抗原的结合E.减少非特异性干扰4.关于石蜡切片，下列说法不正确的是 A.组织块经固定、脱水处理后，浸蜡包埋B.4保存备用 C.切片厚度为23umD.是观察组织细胞结构的理想方法E.不能长期保存5.关于冰冻切片，下列说法错误的是 A.取新鲜组织块迅速冷冻（70） B.切成510um薄片C.抗原的保存量不如石蜡切片多D.制片方法简单E.低温冰箱保存备用 6.关于活体组织标本，错误的是 A.取材于病变组织 B.取病变组织与正常组织交界处C.要求大小适中 D.应减少对组织标本的损伤与挤压E.应取正常组织7.关于酶免疫组化技术的说法，不正确的是 A.敏感性较荧光标记技术高 B.可用普通光学显微镜观察C.便于对组织细胞微细结构的分辨 D.染色标本不能长期保存E.可用电子显微镜观察结果8.关于PAP的说法错误的是 A.结构稳定 B.不存在游离的免疫球蛋白C.染色冲洗过程中酶分子不易脱落 D.特异性、敏感性和重复性好E.敏感性比直接法、间接法高，但比酶桥法低9.下列哪项不是激光器的特征 A.单色性强B.波长范围较宽C.亮度高D.相干性好E.方向性强10.免疫组化技术标本的来源，错误的是 A.活体组织B.各种体液C.穿刺液D.培养细胞E.粪便（三）B型题（配伍型）问题12A.1941年B.20世纪60年代C. 20世纪70年代D. 20世纪80年代E. 20世纪90年代1.Nakane建立酶标记抗体的技术是在什么时间2. Coons等首次用荧光素标记肺炎双球菌多粘多糖抗体是在什么时间问题37A.蛋白质B.免疫球蛋白C.酶D.激素E.类脂质3.用丙酮做固定剂的抗原是 4.用1%聚甲醛做固定剂的抗原是 5.用10%甲醛做固定剂的抗原是 6.用95%乙醇做固定剂的抗原是 7.用四氯化磺做固定剂的抗原是 问题812A.白磷B.维生素CC.乙醇-超声波D.枸橼酸三钠E.硼酸钠8.金颗粒直径为512nm的还原剂是 9.金颗粒直径为610nm的还原剂是 10.金颗粒直径为25nm的还原剂是 11.金颗粒直径为813nm的还原剂是 12.金颗粒直径为1695nm的还原剂是 问题1314A.5.05.5B. 6.06.5C. 7.07.5D. 8.0左右E.10.0左右13.亲和素的等电点为 14.链霉素亲和素的等电点为 问题1517A.敏感性B.特异性C.敏感性和特异性D.重复性E.准确性15.免疫荧光组化技术直接法最具 16.免疫荧光组化技术间接法什么性强 17.免疫荧光组化技术双标记法具 问题1820A.5nm以下B.520nmC.20nm以上D. 530nmE.5nm以下和20nm以上18.胶体金颗粒的直径为多少时适用于液相免疫检测 19.胶体金颗粒的直径为多少时能用于免疫沉淀试验 20.胶体金颗粒的直径为多少时适用于标记抗原或组织化学检测 标准答案一、选择题（一）A1型题（标准型）1.C 2.B 3.A 4.C 5.A 6.B 7.D 8.B 9.C 10.D 11.B 12.B 13.B 14.A 15.D 16.B 17.C 18.B 19. C 20.C 21.D 22.B 23.D（二）A1型题（否定型）1.E 2.D 3.D 4.E5.C 6.E 7.D 8. E 9. B 10.E（三）B型题（配伍型）1.B 2.C 3.B 4. D 5.E 6.A 7.C 8.A 9.C 10.E 11.B 12.D 13.E 14.B 15.B 16.A 17. C 18.B 19.C 20.A二、填空题1、免疫组织化学中最常用的标记物是_、_ 、_、_。原位杂交组织化学中常用的标记物有_和_两大类。2、 常用的粘附剂有_、_ 、_等。3、抗原决定簇是指_分子表面的、具有活性的_。4、一般组织化学是利用化学或物理反应，在组织标本上加入一定的_，使其发生反应，形成_，能在显微镜下观察。常用于检测_、_ 、_等。5、酶组织化学是利用酶对其_的催化作用 ，生成_，再与某种_反应，形成_沉淀，检测_分布及活性的方法。常用的方法有_ 、_、_、_和_。6、最常用于显示细胞、组织内的多糖和蛋白多糖的方法是_。7.、免疫染色对特殊标本的进一步处理常用 _和_法。8、免疫组化中最常用的制片方法是_和_。9、免疫组化染色后，阳性细胞的染色分布有三种类型，分别是_、_和_。10、酶免疫组化技术中最常用的酶有_、_及_。11、免疫电镜标本的制备主要有_、_和_三种。 12、组织块包埋前需先经_，常用的包埋剂是_、_和_。13、光学显微镜下观察的固定标本除组织切片外，还有_、_和_。14、免疫细胞化学术中常用的标记物有_、_、_和_。标准答案：填空 1、荧光素、酶、生物素和亲和素、铁蛋白和胶体金。放射性同位素、非同位素标记物（非放射性同位素）。2、蛋白甘油、甲醛明胶、多聚赖氨酸。3、抗原、特异性化学集团。4、化学试剂，有色沉淀物，糖类、脂类、核酸、酶。5、底物，初反应产物，捕捉剂，有色终反应物沉淀，酶。金属沉淀法、偶氮偶联法、四唑盐法、靛蓝法、DAB法（联苯胺法）。6、PAS反应（过碘酸希夫反应）。7、蛋白酶消化法，非特异吸附法8、冰冻切片，石蜡切片9、胞质型 细胞核型，细胞膜表面型10辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶 葡萄糖氧化酶11、非包埋法免疫染色，包埋前免疫染色，包埋后免疫染色三、判断题1.免疫胶体金标记蛋白质是化学结合，但并不影响蛋白质的生物活性和免疫活性。 2.免疫组化技术中，为确定结果可靠性，实验中必须设立对照，通常是针对第一抗体设立对照。 四、名词解释题名词解释1.HE染色法2.银染法3.冷冻切片4.组织化学和细胞化学术5.免疫细胞化学术6.原位杂交7.胶体金8.简述石蜡切片的制备过程。3.冷冻切片是新鲜组织或固定组织在低温下快速冷冻后制备组织切片的方法。一般是将组织块置入干冰或液氮内使其快速冻结，然后在恒冷箱切片机内制冷冻切片。这种方法制片快速，常用于外科手术切除标本的快速病理诊断。由于这种制片方法可免去组织块包埋等程序，细胞和组织内的一些成分如糖原、酶等保存较好，故较适用于组织化学和细胞化学染色研究。4.组织化学和细胞化学术是应用化学或物理反应原理显示组织切片或细胞内某种化学成分，进行定位、定量及其与功能相关研究的方法。方法种类甚多，显色反应的原理也各不相同，分别用于显示组织或细胞内的多糖类、脂类、各种酶及核酸等成分。一些经典的染色方法如PAS反应显示组织内的多糖和蛋白多糖等，Feulgen反应显示细胞核内的DNA，用Sudan等染料显示脂肪细胞，以及显示细胞内酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、ATP酶、琥珀酸脱氢酶、过氧化物酶等的方法。5.免疫细胞化学术是应用免疫学原理，通过特异性标记抗体与抗原（某种蛋白质、多肽等）的结合来显示细胞内某种抗原，并进行定位和定量的研究方法。这种方法特异性强，敏感性高，进展迅速，应用广泛，已成为当今生命科学诸多学科及临床医学检验普遍应用的重要手段。机体组织内的蛋白质种类繁多，多种蛋白质和多肽已被提纯并制成其抗体，目前有多种标记二抗（酶标记、荧光素标记、胶体金标记等）商品供应，使免疫细胞化学的操作更简便，应用更普遍。6.原位杂交术是在免疫细胞化学的基础上发展起来的一种核酸分子杂交技术，用来检测细胞内某种蛋白质的基因（DNA片段或mRNA片段）表达和定位与定量研究，目前已成为细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。其基本原理是应用已知的并被标记的核酸片段（同位素或荧光素、酶等标记的探针）与细胞内待测核酸（RNA或DNA片段）进行杂交，在光镜和电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位。7.胶体金8.石蜡切片制备程序：取材与固定；脱水、透明与包埋；切片与染色；封固。 五、简答题1.免疫组织化学的全过程包括哪些步骤？2.免疫组化标本固定时，好的固定剂应满足哪些要求？3.简述荧光免疫组化技术直接法的原理。4.何谓免疫电镜技术？5.简述免疫胶体金标记的原理。六、论述题1.试述酶免疫组化技术的原理及其应用。2.试述免疫标记电镜技术的原理。 三、判断题1. 2. 四、名词解释题 1.免疫组化技术是指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，借助可见的标记物，对相应抗原或抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检验方法。2.胶体金是氯金酸在还原剂如白磷、维生素C枸橼酸纳和鞣酸等作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，故称为胶体金。五、简答题1.答： 1）抗原的提取与纯化2）免疫动物或细胞融合，制备特异性抗体及纯化3）标记物与抗体结合形成标记抗体4）标本的处理5）抗原抗体反应和呈色反应6）显微镜下观察结果2.答：1）能快速固定抗原2）防止抗原物质扩散3）固定后的抗原能被抗体识别，不影响抗原抗体反应。3.答：将荧光素标记的已知抗体（或抗原）与切片（印片）中相应抗原（或抗体）直接发生反应，以检测组织与细胞标本中的靶抗原（或抗体）。4.免疫电镜技术是将抗原抗体反应的特异性与电子显微镜的高分辨力相结合的在亚细胞和超微结构水平上对抗原进行定位分析的一种高度精确、灵敏的技术。5.答：胶体金颗粒标记蛋白质的原理是金颗粒表面负电荷与蛋白质正电荷之间非共价键的静电引力互相吸引，当达到范登华引力半径范围之内时，蛋白质与金颗粒表面形成牢固结合。六、论述题1.答：酶免疫组化技术的原理：酶免疫组化技术是利用酶标记已知抗体（或抗原）