实验八.中性粒细胞吞噬功能检测_第1页
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文档简介

问题7:为什么它常用于从密度为1.077土壤和0.002的分层液体中分离人类单核细胞？答：这与人体外周血中各种成分的密度有关。血小板：1.030-1.035，淋巴细胞：1.075-1.090，粒细胞：1.092，红细胞：1.093。因此，血液被叠加在1.077土壤的0.002层流体上。离心后，单核细胞将位于血浆和分离的液体之间，从而达到分离的目的。实验8:中性粒细胞吞噬试验，临床微生物学和免疫学实验室。1.目的：掌握中性粒细胞吞噬试验的原理。熟悉中性粒细胞吞噬试验的操作方法。2、实验原理，中性粒细胞有吞噬细菌和外来颗粒的能力。在体外将嗜中性粒细胞与细菌或外来颗粒一起孵育后，它们可以被嗜中性粒细胞吞咽和摄入。显微镜观察表明，细菌或异物颗粒存在于中性粒细胞中。2、根据实验原理，计算细菌或外来颗粒对中性粒细胞的吞噬作用占中性粒细胞总数的百分比，以及每个中性粒细胞对细菌或外来颗粒的平均吞噬作用数，可以反映中性粒细胞的吞噬功能。3、实验设备、标本：人抗凝血吞噬细胞：金黄色葡萄球菌培养基：肉汤培养基试剂：瑞吉染液、无菌生理盐水设备：柠檬酸钠抗凝血管、试管、载玻片、培养箱、显微镜等。吞噬细胞的制备：将金黄色葡萄球菌接种于肉汤培养基中培养12小时，然后置于4备用。2.准备待测样品：柠檬酸钠抗凝剂1毫升。四、实验步骤、实验步骤、混合培养：将3-5滴金黄色葡萄球菌悬液加入1毫升抗凝剂中，混匀，置于37水浴中，孵育30分钟，每10分钟摇匀一次。细胞玻片制备，瑞吉染色：油显微镜观察：计数200个中性粒细胞，记录吞噬细胞数和每个中性粒细胞吞噬的细菌数。结果表明，嗜中性粒细胞核深染并分裂成叶片，细胞质呈红色，细菌呈紫色，-，吞噬百分率(%)=100%吞噬指数=参考区间：吞噬率(91.5.8)%；吞噬指数大于1时，计算吞噬细菌的嗜中性粒细胞总数，计算嗜中性粒细胞总数，计算嗜中性粒细胞吞噬细菌的数量，计算嗜中性粒细胞总数，-6。注意事项，1。抗凝剂选择：肝素抗凝时白细胞颜色不佳，瑞奇染色后易出现深蓝色背景。乙二胺四乙酸影响白细胞的吞噬作用。柠檬酸钠是最合适的抗凝剂。2.细菌浓度和培养温度：3。血涂片质量：7。应用和评估。该试验可用于检测具有吞噬功能障碍的疾病，如NBT(硝基蓝四唑还原试验)，该试验可在一定程度上反映机体的免疫功能，也可用于筛选具有免疫调节活性的药物。该方法操作简便，不需要特殊设备，节省时间，成本低。然而，
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