风湿病实验检查要点.ppt

3,2,1,常见风湿病实验检查,风湿病病因学检查.RAHLA-DRB104050409风险高达58.2%.SLEHLA-DQB1(nRNP),DQa(SSA/SSB),DQW6(Sm)DQB1(TCR).ASHLA-B27.,3,2,2,BSHLA-B51.PMDMHLA-B8,DR3,DR1.HLA-DRB1，ancestralhaplotype祖单倍体8.1。TNF-308ASSCHLA-DR1,DR5,DRQI；P1A2/FN等位基因与肺纤维化，Scl-70的阳性呈正相关。SSHLA-DR3.DRBI0602，03（与肾小管酸中毒及SSB密切相关，DQAI0504，DQBI0202。RFHLA-DR4.OAHLA-A1,B8.,3,2,3,HLA研究进展,HLA抗原基因的多态性，决定了其所表达的HLA抗原分子的多态性，也决定了HLA系统免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA基因分型迅猛发展，使得HLA基因分型更加准确，简便和实用。HLA基因分型目前大致分为：限制性片段长度多态性方法PCR-RFLP(restrictionfragmentlengthpolymophism)。PCR-SSOP是以核酸杂交为基础的分型技术。PCR扩增特定的基因片段，与(sequencespecificoligonucleotideprobes)序列特异性寡核苷酸探针杂交，进行分析鉴定。基因芯片或微阵列技术(genechiporDNAmicroarray)：,3,2,4,该技术其原理类似于反向斑点杂交。它是指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅片等固相支持物的表面有规律地合成代表不同基因的寡核苷酸探针，或液相合成探针后，通过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针与放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或cDNA互补核酸序列相结合，通过放射自显影或荧光检测，对杂交结果进行计算机软件处理分析，获得杂交信号的强度及分布模式图，反映样品中基因表达的情况。PCR-SSCP(single-strandconformationpolymorphism)可检测DNA片段中不同位置的点突变，而不必象PCR-RFLP那样，必须选择合适的限制酶，使其识别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序列处。,3,2,5,PCR-SSP(SEQUENCESPECIFICPRIMES)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP，特异的扩增目的DNA片段，再通过凝胶电泳等手段，判断被扩增序列的存在。作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点(singlenucleotidepolymorphism)。已有MHC-SNP分型试剂盒面市。分子的超型及抗原结合肽超基序的发现，表明可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为合理，简明和实用，对于疾病相关性的研究和异体移植有重大意义。,3,2,6,AS的相关遗传因素,1：HLA是一必需的致病基因，但其遗传风险为1650%。其亚型有23个之多，从B27012723。与AS相关的是270527042701等等。2：CYP2D6LMP7和TNF308等TNF-的等位基因；bosak报道HLA-2Bw4Cw1/2DR1基因频率均高于健康人群。这提示HLA-ABCDR和DQ区域有与AS发病的易感基因存在；HLA-B60增加了AS依赖HLA-B27发病的易感性。,3,2,7,链球菌感染的检测1咽拭子培养2025%SZ(链球菌酶)检2ASO50050%3DNA酶-B21085%4ASK(抗链球菌激酶)85AH(抗透明质酸酶)1286ANDS(抗核苷酸)80%,大于4周25%OTHER:1.白细胞及中性粒细胞.2.糖蛋白及粘蛋白等.,3,2,9,CRP,IL-1IL-6TNFa,TGPF4,白细胞粘着游走,CRP,凝血纤溶系统亢进,ICAM-1VCAM-1E-SELECTIN,血小板凝集亢进,血小板释放反应,感染外伤免疫异常恶性增生物,3,2,10,CRP与炎症,CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物抑制剂-1的水平与活性、增强巨噬细胞对低密度脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管紧张素-1型受体的表达等.CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP.CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟、感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可使其降低.,3,2,11,生化检查,1.Ca,P,Fe等电解质.2.UA,磷酸钙双水化合物CPP等.3.肝,肾,血常规等功能检查.4.CPK,LDH同功酶，肌球蛋白，肌凝蛋白重链，肌钙蛋白I（TnI），等肌酶谱检查.5.蛋白及蛋白电泳检查.6.雌激素,泌乳素等激素检查.7.维生素,骨钙素,TRAP,Pyd,Dpyd等.,3,2,12,雌激素和催乳素PRL,大家都知道神经-内分泌-免疫调节网络功能失调，会影响的发生和发展。PRL（prolatin）已被证明具有免疫调节作用，对细胞和体液免疫都有促进作用，而且免疫细胞也能产生PRL样物质，发挥自分泌和旁分泌作用。大量研究表明在SLE中PRL与可的松CS比值增高反与病情进展相关。男性患者PRL水平升高而雄激素功能低下，认为PRL可抑制睾酮的生成，在病因中起作用。但也有人认为不是通过其抑制雄激素而起作用。另外用bromocriptineBRC溴隐停使PRL降低可使SLE病情改善。在RA已证明PRL是AA（adjuvantarthritis）形成的必要条件。国外报道在RA中PRL水平上升发生率为10.8%。,3,2,13,SS，PA，Reiter等风湿病都有PRL水平升高。目前认为1.可能与可诱导核细胞产生IgM，IgA，IgG，ds-DNA和ANA及IgM类RF，ANA滴度增加并且PRL水平与ANA相平行。IgG类ds-DNA与抗甲状腺微粒体抗体TMA合成增加，同时伴ESR增快，淋巴细胞减少。2.PRL基因在第6号染色体短臂上，与HLA基因复合体非常近。生殖危险因子与RA病因相互作用可能是其原因。SLE女性患者HLA-DRB10301和PRL基因之间的连锁不平衡也是原因之一。3.降低甾类物产生的允许作用。PRL水平升高在甾类激素分泌减少的情况下起重要作用。一方面糖皮质激素能拮抗PRL的刺激作用，而性激素对免疫的调节作用随性别而异。另一方面PRL可影响甾类激素的产生，也可拮抗糖皮质激素的抑制作用。,3,2,14,4.PRL与细胞因子PRL和IL-2在免疫方面起协同作用，从而促进AID的发生。同时PRL也可促进滑膜纤维母细胞的增殖，并促进IL-6，IL-8的生成。而雌激素和雌激素受体在免疫调节和对许多风湿病发病机制，自身抗体的产生，及对其病理进程的影响巨大。早已为众人所熟悉。,3,2,15,滑液正常值,PH7.3-7.437.38WBC(/L)(13180)63N0-157L0-7824单核细胞0-7148滑膜细胞0-124蛋白质(g/L)12-3018P(%)56-6360A(%)37-4440透明质酸盐(g/L)3,3,2,16,滑液分析,外观WBCPC粘蛋白滑液与血清微生物试验Glu差异(ml/ml)晶体等正常清晰，灰黄020010%良好无差异_I类(非炎性积液)清晰，稍浊50400030%良好无差异_II类(非感染偶有LE细胞轻度炎性)清晰，稍浊090001:32BDAPLANCA+,3,2,29,血管炎的抗体,1ANCA：2AECA（anti-endothelialcellantibodies，AECA）:BD40%