分子生物学的研究方法-基因定点诱变_第1页
分子生物学的研究方法-基因定点诱变_第2页
分子生物学的研究方法-基因定点诱变_第3页
分子生物学的研究方法-基因定点诱变_第4页
分子生物学的研究方法-基因定点诱变_第5页
已阅读5页，还剩3页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

.,第四节基因定点诱变,2.4.1盒式诱变,利用一段人工合成的具有突变序列的寡核苷酸片段取代野生型基因中的相应序列.,返回目录,返回第二章,.,2.4.2寡核苷酸引物诱变使用化学合成的含有突变碱基的寡核苷酸片段作引物,启动单链DNA分子进行复制，随后这段寡核苷酸引物便成为了新合成DNA子链的一个组成部分。,.,寡核苷酸引物诱变过程,正链DNA合成突变引物合成异源双链DNA分子制备闭环异源双链DNA分子富集转化突变体筛选,寡核苷酸引物诱变法的局限性,异源双链DNA分子并非真正异源突变体子代中突变碱基被错配修复体系修复,.,提高寡核苷酸引物诱变突变效率的方法,Kunkel定点诱变法:1985年由T.A.Kunkel发明ung:尿嘧啶脱糖苷酶,.,硫代磷酸诱变法:已知有些限制酶不能切割硫代磷酸DNA分子在异源双链DNA分子制备时，加入硫代核苷酸，使之掺入突变链中然后用前述酶切割，并用外切酶局部消化后，进行聚合反应，从而产生具有定点突变的异源双链DNA,.,2.4.诱变,(1)重组PCR定点诱变:克服寡核苷酸引物诱变能力仅限于5端.特点:经3轮PCR反应,一对互补的带有突变碱基的内侧引物和2个外侧引物,.,(2)大引物诱变:核心是第一轮PCR产
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论