肿瘤标志物的实验诊断及其进展.ppt

肿瘤标志物的实验诊断和进展，肿瘤现状：根据世界卫生组织的数据，恶性肿瘤是世界上仅次于心脑血管疾病的第二大死亡原因，占总死亡人数的22%，且逐年增加。十种常见肿瘤：胃癌、肝癌、食道癌、结肠直肠癌、肛门癌、白血病、宫颈癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。肿瘤标志物(tm)，由Herberman在1978年国家癌症研究所人类肿瘤免疫诊断会议上提出。肿瘤组织和细胞产生的与肿瘤形成和发生有关的物质，存在于肿瘤细胞的细胞核、细胞质、细胞膜或体液中；它不存在于正常成人组织中，但存在于胚胎组织中，或其在肿瘤组织中的含量超过正常含量。它存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，可通过免疫学、生物学和化学方法检测。理想的TM:特异性高，区分肿瘤与非肿瘤的准确率可达100%。灵敏度高，肿瘤的存在可以在非常早期的阶段被发现，而不会错过诊断。体液中的浓度应与肿瘤大小和临床分期密切相关，并据此判断预后。半衰期短，并且可以根据水平的上升和下降来监测治疗效果和肿瘤是否复发或转移。该检测方法灵敏可靠，操作简便，价格低廉。肿瘤标记物的测定：肿瘤细胞特异性或相关抗原的测定，肿瘤相关酶含量活性的测定，肿瘤相关激素水平及其受体数量的测定，细胞刺激因子的测定，癌胚基因产物、癌基因和癌基因蛋白、抗癌基因等的测定。肿瘤标记物：的应用、肿瘤的筛选、肿瘤的早期诊断、肿瘤治疗后的随访、疗效的监测、肿瘤复发的监测和预后判断通过使用肿瘤细胞表面标记物选择性地进行单克隆抗体治疗。一种肿瘤标志物的分类，TM分布广泛，分类和命名不统一，一般可根据蛋白质、酶、糖脂和糖蛋白、多胺、激素、基因等进行分类。1、肿瘤相关抗原和蛋白：甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、碳水化合物抗原(CA50、CA199、CA125、CA242、CA153、CA724)、血清铁蛋白(SF)、组织多肽抗原(TPA)、血清2微球蛋白(2-MG)、前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(F-PSA)、尿Bens-Jones蛋白(B-J)、P53蛋白、Bcl-2蛋白、CYFRA21-1、CD242种酶：神经特异性烯醇化酶(NSE)、肌酸激酶同工酶(CK-BB)、乳酸脱氢酶(LDH)、-谷氨酸转肽酶(-GT)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ALP)、谷胱甘肽-硫转移酶(GSTs)、1-抗胰蛋白酶(1-AT)、1-岩藻糖苷酶(AFU)、半乳糖苷酶(GsI-T)、水杨基转移酶(ST)等。3种激素：绒毛膜促性腺激素(HCG)、降钙素(CT)、肾上腺皮质激素(ACTH)、4种细胞刺激因子：转化生长因子(TGF)、表皮生长因子(表皮生长因子)、骨肉瘤生长因子(OGDF)、5种受体：激素受体：细胞膜受体如雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)、上皮生长因子受体(EGFR)和雌激素受体(erB2)、6种癌基因：C-ALB基因、Neu基因、myc基因家族、Ras基因家族、C-SIS和C-GSP等。7个抑癌基因：RB基因、P53基因、P16基因、DDC基因等。8其他：超氧化物歧化酶、脱氧核糖核酸聚合酶、血清唾液酸、胃泌素、尿中假尿苷和血清促肾上腺皮质激素前氨基末端肽(POMC)等。放射性同位素125I用于标记抗原或抗体，主要包括放射免疫分析和免疫放射分析。非放射性标记免疫技术：酶、化学发光物质、荧光素、鲁米诺或镧系稀土元素作为标记。主要有酶免疫分析、化学发光免疫分析、荧光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析和金属离子免疫分析。三个重要肿瘤标志物的特征及其临床应用、影响因素：肿瘤标志物具有特异性和非特异性的双重特征。各种肿瘤的不同特征，如肿瘤的分期、大小、位置、组织来源和转移趋势。不同的抗体，如多克隆抗体、单克隆抗体、抗体决定簇和抗体亲和力。不同的检测系统，如不同的检测原理、标志物、实验条件、检测技术、检测仪器和检测灵敏度等。检查员的专业水平和技术经验的差异，以及实验室条件和实验的可靠性。甲胎蛋白是一种分子量为70，000的糖蛋白，由590个氨基酸组成，存在于胎儿肝脏和卵黄囊中。主要用于原发性肝癌的诊断和分类，以及非生精睾丸癌、畸胎瘤等的诊断。它是唯一一种与癌症有明确特征关系的肿瘤标志物。在孕妇和一些肝炎和肝硬化患者中略有增加。利用亲和电泳和非泳动固定技术可将甲胎蛋白分为L1型、L2型和L3型。L3型是早期肝细胞癌的特异性标志物，对检测小肝癌和区分肝细胞癌与良性肝病有重要价值。甲胎蛋白可能不是由某些病理类型的肝癌细胞(如假腺细胞)分泌的。2癌胚抗原(CEA)，一种分子量约为180万的多糖-蛋白质复合物，位于胚胎和胎儿的肠粘膜中。分泌癌胚抗原的肿瘤大多位于中空器官。首选是结肠直肠癌标志物，尤其是结肠直肠癌，其次是胃癌、肝癌、肺癌、胰腺癌和乳腺癌标志物。腺癌通常高于上皮癌。在没有患癌症的人群中，吸烟者略有增加。胰液和胆汁中的癌胚抗原含量可用于诊断胰腺癌或胆管癌，尿液中的癌胚抗原含量可作为判断膀胱癌预后的参考。血清癌胚抗原联合甲状腺钙素测定有助于甲状腺髓系疾病的诊断和复发估计。血清2微球蛋白(2-MG)，一种分子量为11500的低分子量蛋白质，由淋巴细胞和巨噬细胞分泌。临床用于诊断多发性骨髓瘤。当肾功能不良时，它也会增加。血清铁蛋白(SF)，一种分子量为430，000-450，000的大分子蛋白质，以储存铁的形式存在于肝脏、脾脏和骨髓中。临床上，它是诊断隐性贫血的敏感指标。癌细胞具有很强的合成SF的能力，这有助于肿瘤的诊断和预后估计。5、前列腺酸性磷酸酶和前列腺特异性抗原。PAP是一种分子量约为100，000的糖蛋白。巴氏是酸性磷酸酶同工酶之一，是细胞裂解物和分泌物的正常成分。它具有组织特异性，主要用于诊断前列腺癌。前列腺特异性抗原是一种由前列腺上皮细胞分泌的激肽释放酶样蛋白酶，是一种分子量为33，000的单链糖蛋白。前列腺癌的前列腺特异性抗原检出率为70% 90%，良性前列腺增生和女性乳腺癌的前列腺特异性抗原检出率也可提高。前列腺癌中结合型前列腺特异性抗原显著增加，因此结合型前列腺特异性抗原/结合型前列腺特异性抗原比值降低。6人绒毛膜促性腺激素(HCG)，一种由胎盘滋养层细胞分泌的分子量为45，000的糖蛋白激素，含有145个氨基酸，由两个独立的氨基酸肽链和亚基组成。肿瘤细胞的特征是分泌亚单位。它是绒毛膜上皮癌和恶性葡萄胎的肿瘤标志物。也可在胚胎癌发生于卵巢、睾丸等性腺器官时进行检测，可作为这些疾病的疗效监测和预后判断。少数恶性肿瘤如肺癌、子宫内膜癌、宫颈癌和白血病也可发现-HCG升高，但阳性率不高。神经特异性烯醇化酶(NSE)是烯醇化酶的一种同工酶，分子量约为87，000，是一种参与神经元和神经内分泌细胞糖酵解的酶。肿瘤组织中的糖酵解得到加强，细胞增殖周期加快，细胞中的神经元特异性烯醇化酶被释放到血液中，导致血清含量增加。小梁切除术是治疗小细胞肺癌的首选方法(敏感性70% 80%)。神经母细胞瘤中升高。脑脊液神经元特异性烯醇化酶可作为脑损伤和脑梗死的诊断指标。细胞角蛋白相关的小梁网和细胞角蛋白(CK)参与上皮细胞骨架的形成。根据氨基酸序列，CK1CK20有20种。Cyfra21-1是角蛋白19的一个片段，适用于diTM是宫颈鳞状细胞癌的首选，也用于肺、食管、口腔、颌骨和面部鳞状细胞癌。灵敏度低于Cyfra21-1。10胃蛋白酶原、(PGI、II)、PG在胃底粘膜的主要细胞、宫颈粘液细胞和主要宫颈粘液移行细胞中发现。胃底腺、幽门腺和十二指肠腺的主要细胞中存在PG。胃几乎是胃泌素的唯一来源，胃泌素的变化可以反映胃粘膜功能的变化。胃癌患者血清中前列腺素和前列腺素/比值显著降低。日