补：毒理学动物实验基础

毒理学动物实验基础BasisofanimalexperimentinToxicology,第一节实验动物第二节动物实验,第一节实验动物,实验动物以科学研究为目的进行科学饲养和繁殖的动物。为什么要使用实验动物？可以较少的人力、物力和时间找出单一因素与结果的关系可提供大量有价值的可与人类生命活动现象类比的资料。,一、常用动物习性及生理特征,一、常用动物习性及生理特征,Wistar,一、常用动物习性及生理特征,日本大耳白兔,新西兰白兔,青紫兰兔,一、常用动物习性及生理特征,第一节实验动物,二、实验动物的选择基本原则对毒物敏感对毒物代谢方式尽可能和人一致或相近经济、易得容易饲养、便于进行实验处理自然寿命不宜太长毒理学最常用大、小鼠,第一节实验动物,（一）种属选择种属差异，不同实验不同毒物选不同种属动物1.气体、蒸汽的粘膜刺激：猫2.皮肤局部刺激：豚鼠、家兔3.过敏反应：首选豚鼠。不同动物致敏顺序：豚鼠家兔狗小鼠猫青蛙4.实质性脏器损害：大、小鼠5.呕吐反应：猫、狗（草食动物兔、豚鼠不呕吐）6.发热：兔、有时猫；大、小鼠不稳7.血压：狗、大鼠、家兔,第一节实验动物,（一）种属选择8.致癌：大、小鼠9.致畸：大、小鼠10.苯胺及衍生物致变性血红蛋白作用：狗猫（肉食）黄曲酶毒素急性毒性：鸭雏黄曲酶毒素致癌：鳟鱼迟发性神经毒性：母鸡,第一节实验动物,（二）动物繁育方式的选择不同的繁育方式可得到不同的实验动物：近亲繁殖近交系异系杂交杂交一代随机繁殖远交群（或封闭群）,第一节实验动物,（二）动物繁育方式的选择1.近交系（inbredstrain)亦称纯系，是连续“兄妹”及亲系交配达20代以上的品系。特点：全部动物基因相同（纯和性达98.6%以上）个体差异小，对毒物敏感，反应一致。缺点是抵抗力弱，易患病。,第一节实验动物,（二）动物繁育方式的选择2.杂交一代（F1hybrid)有目的地选择两个近交系动物进行杂交而产生的第一代。特点：个体间在遗传上一致但又不是近亲，其表现型的变异频率比亲本低，动物健康。,第一节实验动物,（二）动物繁育方式的选择3.远交群（outbredcolony)一个品系的动物尽量避免近亲交配所繁育的动物称为该品系的远交群。封闭群（closedcolony)如远交群动物中连续5年不引进外来动物，则为封闭群。,第一节实验动物,（三）微生物等级标准的选择通过微生物学的监测手段，按对动物微生物控制的净化程度，把实验动物分为四级：1.普通动物（conventionalanimal,CV,I级）动物不带有人畜共患病的病原体及体外寄生虫。2.清洁动物（cleananimal,CL,II级）在上述基础上还要求不带有动物传染病的病原体。,第一节实验动物,（三）微生物等级标准的选择3.无特定病原体动物（specificpathogenfreeanimal,SPF级,III级）在以上基础上还需不带有干扰实验的微生物。4.无菌动物（germfreeanimal,GF,IV级）不带有任何用现代方法可以检测出的微生物悉生动物（gnotobioteanimal,GN)在无菌动物中植入一种或几种已知微生物。,第一节实验动物,（四）个体选择1.年龄、体重2.性别3.生理状况4.健康状况（健康动物的标志）1)发育正常、体态丰满、外观无畸形；2)被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱；3)胸阔宽阔、脊柱不弓不弯；4)眼睛明亮5)表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）6)各天然孔干净、无分泌物；7)行动灵活、反应敏捷。,第一节实验动物三、实验动物的饲养管理重要性保证实验动物的正常生存；保证人和动物的安全；保证对实验反应的一致。内容气候因素：温、湿度、气流、气压、风向、风速等理化因素：换气、粉尘、臭气、噪音、照明等居住因素：笼具、饲料、垫料、饮水等生物因素：同种、异种动物、微生物和寄生虫等设施开放系统、半屏障系统、屏障系统、隔离系统,环境指标（GB/T14925-94）,第二节动物实验基本方法,实验前检疫，按性别分笼饲养一、实验动物的标记二、实验动物的分组三、实验动物的染毒方法染毒（administration,exposure)为研究毒物对实验动物的毒性作用，模拟人的实际接触途径将毒物经某种途径与动物接触的过程。,第二节动物实验基本方法,三、实验动物的染毒方法（一）染毒前的准备工作1.毒物一般资料的收集2.溶剂的选择3.剂型的选择取决于不同的染毒途径及具体的染毒方法。消化道：喂饲、灌胃、呼吸道：气管注入、注射：肌肉注射、静脉注射、腹腔注射经皮染毒：,第二节动物实验基本方法,三、实验动物的染毒方法（二）各种染毒途径及方法1.经口染毒1）灌胃2）喂饲3）胶囊吞服,第二节动物实验基本方法,三、实验动物的染毒方法（二）各种染毒途径及方法2.经呼吸道染毒静式吸入染毒法在一定容积的密闭容器内加入一定量的毒物，使之（挥发）充分与空气混合，均匀分布形成一定浓度的含毒空气环境，放入动物，在规定的时间内观察动物的毒性反应。）染毒装置）染毒浓度的计算,动物染毒柜的模式图A，整体暴露；B，口鼻暴露,第二节动物实验基本方法,挥发性液体Cad/L1000；aCL/1000d式中，C：染毒浓度，mg/La:加入的毒物的量，mld:毒物比重L:染毒柜的容积，L气体mg/m3ppm/22.4;ppm=22.4mg/m3/:气体分子量,第二节动物实验基本方法,3)操作步骤：略。动式吸入染毒法采用机械通风装置，联系将新鲜空气和毒物气体送入染毒柜，并排出等量的含度空气，使染毒浓度相对稳定的染毒方式。）染毒装置：染毒柜、机械通风装置、配气系统）染毒步骤：略。,静式吸入染毒和动式吸入染毒的优缺点比较,第二节动物实验基本方法,.经皮染毒）备皮）染毒方法浸尾涂皮.注射途径）i