GPC色谱分析工作原理PPT课件

在20世纪中期，使用了大量的经典分离方法：沉淀、蒸馏和萃取。在现代分析中，使用了大量的色谱和电泳分离方法。到目前为止，色谱法是最有效的分离方法！它的应用涉及到各个科学领域。20世纪50年代，色谱发展最快(一些新色谱技术的发展；复杂成分分析发展的要求。从1937年到1972年，在与色谱研究相关的15年中有12次诺贝尔奖！第1节色谱分析方法简介第1节色谱分析方法简介色谱分离的基本原理：含有样品的流动相(气体、液体或超临界流体)通过固定在柱或板上的固定相表面，并利用外力与流动相不混溶。样本中的每个成分在两个阶段都有不同程度的作用。与固定相强相互作用的组分随流动相缓慢流出，而与固定相弱相互作用的组分随流动相快速流出。由于流出速度不同，混合组分最终形成每个单一组分的“带”或“带”。可以对依次流出的每种单组分物质分别进行定性和定量分析。第1节色谱分析方法简介色谱分类方法：1 .根据固定相的形状，分为柱色谱(填充柱和空心柱)、平板色谱(薄层色谱和纸色谱)。2.根据组分在固定相上的分离机理；吸附色谱法；不同组分在固定相上的吸附是不同的；分配色谱：不同组分在固定相上的溶解度不同；离子交换色谱：不同的组分在固定相(离子交换剂)上有不同的亲和力；凝胶色谱法(大小排阻色谱法)不同大小的分子在固定相上的渗透。根据两相状态，第1节色谱分析方法简介，第1节色谱分析方法简介，色谱流出曲线(色谱图)，混合组分的分离过程和检测器在不同阶段对各组分的响应，第1节色谱分析方法简介，色谱术语：1)基线：在实验条件下，只有纯流动相进入色谱柱后面的检测器时的流出曲线称为基线，大信噪比和稳定基线为水平直线。2)峰高：色谱峰与基线之间的距离。3)保留值(r) a .死时间(t0):对于不与固定相相互作用的物质，从注射到最大峰值的时间，它与色谱柱的空隙体积成比例。由于物质不与固定相相互作用，其流速与流动相的流速相似。第1节色谱分析方法介绍b保留时间tr:从样品引入到最大峰值的时间。它包括组分通过流动相柱的时间t0和组分保持在固定相的时间。调整保留时间：扣除死时间后的组分保留时间，即组分在固定相的保留时间。这是因为时间是色谱定性的基础。然而，同一组分的保留时间与流速有关，因此有时需要用保留体积来表示保留值。d .死体积V0:色谱柱管中固定相颗粒之间的间隙、色谱管道和连接器之间的间隙以及检测器间隙的总和。不要忽略后两项：Fco是色谱柱出口处的载气流速(毫升/分钟)，其值为F0检测器出口流速；室温；Tc-色谱柱温度；P0-大气压力；Pw-室温下的水蒸气压力。第1节色谱分析介绍e保留体积Vr是指从进样到待测物质的浓度在色谱柱后达到最大值的流动相体积。调整保留体积：扣除死体积后的组分体积。g相对保留值r2，1:组分2的调整保留值与组分2的调整保留值之比第1节色谱分析方法介绍描述了分配过程的参数。k只与固定相和温度有关，与两相的体积、柱管的特性和所用的仪器无关。第一节色谱分析方法介绍2)选择因素：组分A和组分B的色谱柱选择因素定义如下：A为先流出的组分，B为后流出的组分。注：K反映了某一组分在两相之间的分布。它反映了两个组件之间的分离！当两个分量k相同且=1时，两个分量不能分离。当两个分量K之间的差较大时，差越大，分离越好。换句话说，两相之间两种组分的分配系数是不同的，这是色谱分离的先决条件。和k是计算色谱柱分离效率的重要参数！第一节介绍凝胶色谱是一种新型的液相色谱(GPC)别名：体积大小排除色谱(SEC)凝胶过滤色谱(GFC)等。从分离机理来看，体积排阻色谱法更准确。1964年，摩尔第一个成功地进行了研究。sci。parta3360 polym。化学。1964，2 (2) :835-843)在总结以往经验的基础上，结合制备大网络结构离子交换树脂的经验，采用高交联聚苯乙烯凝胶作为柱填料，并配备连续高灵敏差示折光仪，制成快速自动的聚合物分子量和分子量分布测量仪，从而开创了液相色谱凝胶渗透色谱技术。引言的第一部分主要特点是操作简单快捷，进样量小，数据可靠可重复，自动化程度高。应用包括聚合物的分子量和分布、聚合物的支化度、共聚物和共混物的组成、聚合物的分类和结构分析、聚合物中痕量添加剂的分析等。如果配备了在线绝对分子量检测器(例如，LALLS、多角度、双角度等)。)，凝胶渗透色谱可以测定聚合物的绝对分子量。在第二部分机理中，当待分析的样品与浸出溶剂一起引入色谱柱时，溶质分子扩散到填料的内部孔隙中。小分子可以进入更小的孔，也可以进入更大的孔。较大的分子只能进入较大的孔隙。而大于最大孔隙的分子只能保留在填料颗粒之间的空隙中。因此，随着溶剂的洗脱，不同大小的分子被分离，较大的分子首先被洗脱，较小的分子随后被洗脱。第二段机理，vt=V0 vi vgvt:柱总体积V0:载体颗粒间体积Vi:载体内部空隙体积Vg:载体骨架体积，溶剂分子：V0溶剂称为流动相；Vi中的溶剂称为固定相聚合物：1)体积大于孔径，浸出体积为V0；2)体积远小于所有孔的体积，浸出体积为V0Vi；3)中等体积，浸出