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文档简介
血小板多的血浆的临床应用,唐多医院无shijie,0,2,目录,2,1,概念,2,2,血小板多的血浆,血小板多的血浆凝胶,platelet-rich plasma,PRP,platelet,PRP是由凝血酶等活性物质激活的果冻,具有完整的三维结构和良好的组织相容性的纤维素支架。PRP发展史,2,3,hark Eden准备第一次分离PRP,心脏手术后患者,取得好结果。从Okuda等血浆中提取的血小板较多的血浆中含有多种生长因子。Hood等提出了在PRP中添加凝血酶和钙离子而形成的凝胶形式的物质用于组织修复的PG概念。Whitman首先使用自体PRP来修复口腔颌面外科的骨组织。根据离心过程中血液成分的沉淀速度提取原理采用PRP制备方法。没有统一标准的准备方法需要两次离心。自动准备方法,手动准备方法。2,4,影响PRP血小板,抗凝剂离心时间凝胶活化剂,PRP制备方法,血液成分分离消耗品分离制备血小板血浆的自动方法。特征自动化水平,血小板纯度高的浓度,2,5,PRP准备方法,手动准备方法是两阶段方法,但离心力,离心时间略有不同。据悉,最初的200g离心力10分钟,第二次1200g离心力10分钟,PRP制造中血小板数约为6.17倍。血液离心后的第三层:下层-红细胞、血小板浓缩液层、稀薄的血小板血浆层),再分为中间层。2,6,PRP组件特征,2,7,PRP,纤维素,白细胞,高浓度血小板,其他,PRP组件特征,血小板成人:平均195*109/L,PRP血小板结构图通过生理止血-粘合反应,起到早期止血功能。组织复原-附着在血管壁上,插入内皮细胞之间,修复血管内皮,保持其完整性。调节炎症和免疫反应。-像白细胞介素作用一样,通过调节表面粘附和表面受体的表达来实现。2,8,PRP组件特征-血小板,2,9,凝血酶,血小板衍生生长因子,转化生长因子,胰岛素样生长因子,表皮生长因子,血管内皮细胞生长因子,成纤维细胞生长因子,血小板效果促进血管生成,激活巨噬细胞,刺激成纤维细胞、血管平滑肌细胞、神经胶质细胞等中胚层细胞的增殖和活性,2,10,PRP成分特征-血小板,转化生长因子-(TGF-)为成纤维细胞、骨髓干细胞、成骨祖细胞TGF免疫染色也作用:参与体内多种炎症反应和组织修复,促进细胞外基质分泌,提高纤维细胞增殖能力,刺激胶原1和纤维蛋白连接蛋白的生物合成和骨基质的沉积,抑制破骨细胞的形成和骨吸收。2,11,PRP组件特征-血小板,胰岛素样生长因子(IGF)作用:成纤维细胞趋化,刺激蛋白质合成。刺激骨细胞的增殖和分化,促进软骨和骨基质的生成。2,12,PRP成分特征-血小板,表皮生长因子(EGF)作用:新生血管重要诱导因子。可以促进伤口愈合,参与血管生成。刺激内皮细胞有丝分裂和细胞迁移。血管通透性也可以提高。2,13,PRP成分特征-血小板,血管内皮细胞生长因子(VEGF)是非常保守的同源二聚体糖蛋白。分子量分别为24kDa的两条单链由二硫化键构成二聚体。作用:直接作用于血管内皮细胞,促进血管内皮细胞增殖,增加血管通透性。诱导内皮细胞增殖和迁移,启动血管生成反应。,2,14,PRP组件特征-血小板、成纤维细胞生长因子(FGFs)作用:参与血管形成、损伤愈合和胚胎发育过程,是关节软骨细胞最重要的有丝分裂刺激源和形态源之一。2,15,PRP成分特征-白细胞,白细胞:参与身体的免疫和防御功能,帮助身体去除局部病原体,提高抗感染能力;帮助身体去除局部坏死组织,加速组织修复。血小板分泌生长因子趋化后,自身分泌生长因子,直接参与组织恢复。2,16,PRP组件特征-其他组件:纤维连接蛋白(FN)血小板反应蛋白(TSP)骨连接蛋白(ON)玻璃体连接蛋白(VN)作用:对伤口感染、促进组织愈合和增加新生血管内膜形成起重要作用。2,17,PRP,2,18,优点1,优点2,丰富的来源,方便的材料,简单的操作,低廉的价格,自体来源,没有免疫排斥反应,没有同种移植介导的疾病风险,PRP,2,19,在避免同种及人工合成组织致畸危险的同时,多种因素表现良好,避免诱导肿瘤形成的可能性。PRP临床应用和研究,2,21,骨缺损修复软骨损伤修复骨感染预防,急性伤口慢性不愈合伤口皮肤脂肪组织液化,急性运动损伤慢性运动损伤,下巴相关疾病牙周疾病上颌窦手术,烧伤创面脂肪移植皮肤组织再生,骨科,运动损伤,常规手术,口腔颌面外科人类生病的牙齿是用1毫米厚的根精制而成的。PRP的二次离心制备;观察了不同浓度PRP(A组10%,b组15%,c组20%,d组30%,无对照组PRP)的人牙周膜成纤维细胞脱钙病变根表面附着和胶原形成情况。研究1,研究1,2,24,结论:PRP可促进病变根表面牙周细胞附着,其中20%为最佳浓度。PRP能促进牙周细胞外基质胶原的形成。口腔颌面外科相关研究,2,25,225,Whitman在治疗骨缺损的过程中结合PRP使用骨移植取得了成功。Suba等在犬腭骨缺损治疗中使用磷酸三钙复合PRP,发现PRP能明显促进骨再生。Lekovic研究表明,PRP可以促进牙槽骨再生。张丽等研究表明,PRP和骨移植术对牙周印面骨缺损的治疗效果优于单纯骨移植术。Philippart等将PRP混合物填充上颌窦,通过6个月的组织学观察,显示出活跃的骨生成活动。rodrinez等表明,将PRP和种植牙移植到上颌窦部位等移植成功率达92.9%,PRP可以加快骨再生,提高骨再生质量。与颌骨相关的研究,牙周疾病,上颌窦手术,2,26,2,27,研究2,方法:40名需要股骨头骨不连,骨缺损术后7d和1,2,3,6,12个月定期x线摄影参照Lane-Sandhu的x线评分标准分数,比较两组痂灰阶、愈合和愈合速度。2,28,研究2,结果:在表1(基于x射线分数)分数等伤口愈合天数和伤口诱导流速方面,实验组明显低于对照组。表2,3显示术后实验组的成骨速度,明显高于对照组。这表明PRP对促进骨缺损治疗有很好的作用。骨科相关研究,2,29,Marx等发现,复合PRP的移植骨修复速度比单纯移植骨修复快1.62-2.16倍。Bielecki等用不愈合的PRP经皮注射取得了良好的效果。Drengk等研究表明,将PRG用作细胞支架,软骨细胞能遇到间充质干细胞,增殖,明显促进向软骨细胞的分化。牛等认为,PRP可以作为治疗关节软骨缺损的软骨细胞载体。Bielecki研究表明,血小板-白细胞凝胶可以体外抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的生长,并且可以将PRP用作“生物抗菌制剂”。修复骨缺损,修复软骨损伤,预防骨感染,2,30,运动医学,2,31,研究3,方法:11名跟腱患者炎症19例,各患者自体PRP2ml排及周围注射。通过每周接受一次、五次治疗,患者将停止所有药物和其他药物辅助治疗。患者随访3,8个月,平均6个月,观察治疗效果。结果:跟腱发炎的地方为19处,治疗后5处,玄效为13处,治疗效果为94.74%。结论:PRP是干盐中效果可靠、安全有效的方法。运动损伤相关研究,2,32,运动损伤相关研究,2,33,2,34,常规手术,2,35,研究4,方法:静脉采血,氯化钙,凝血酶混合在患者伤口上应用PRP凝胶,凡士林纱布填塞每7天换1次,每3次换1次。评估治疗后伤口的变化。2,36,研究4,结果:使用PRP三次后,29例患者伤口明显减少,大部分坏死组织切除,组织颜色红润,血液供应良好,没有明显的渗出液和脓液。3起效果不明显。治疗3个月:10例伤口完全愈合,形成疤痕组织。伤口覆盖率75%,9例50%-75%,2例50%;治愈率31.2%,低效率93.8%。结论:PRP治疗慢性难以愈合的伤口是有效而实用的治疗方法。一般外科相关研究,2,37,BHA nots的研究表明,PRP可以加快表皮化生长,缓解创伤后局部水肿和疼痛,减少术后伤口渗出。曼德在皮瓣移植术中使用了PRP凝胶,发现血管创出血被凝胶封闭,提高了手术成功率。卡特ca等结果表明,通过用PRP修复马小腿伤口,PRP加快上皮细胞增殖,促进伤口胶原合成和血管再生。郭燕杰等人下肢慢性不愈合伤口的PRP伤口内注射治疗效果显著。对下腔内等慢性溃疡患者应用PRP凝胶治疗结果表明,PRP能更好地促进伤口中肉芽组织的形成。根据Giorgio的研究,PRP刺激细胞的增殖、分化和微血管形成,提高局部组织的自我修复能力,有助于切口愈合。刘晓涛的研究表明,使用PRP的脂肪液化切口深度患者的愈合时间明显减少,提示PRP可以减轻疼痛、术后出血,减少术后并发症。急性伤口,慢性骨不连伤口,手术切口脂肪液化,2,38,烧伤整形,2,39,研究5,方法:10只裸鼠随机一方等为PRP组(0.5mL人颗粒脂肪0.1mLPRP)的区域,一方为对照组(1移植后10,90d死亡后取出移植物,进行一般形态观察、体积测量及组织学检查。2,40,研究5,结果:术后90dPRP组移植比对照组保留显着,周围血液供应丰富,接触纹理柔软,更接近正常脂肪组织。PRP组术后10,90d显示体积大于对照组。2,41,研究5,脂肪转移植物组织结构观察(苏木定-红花染色,X100)对照组PRP组,10d,90d,结果:术后10,90dPRP组脂肪细胞保持良好形态,细胞间隙保持良好,少量对照组移植90d后组织结构更加混乱,形成了大量结缔组织和脂肪气泡,部分坏死,只有少量细胞能保持正常形态。2,42,5研究结果:每一点,PRP组正常脂肪细胞面积和微血管数均多于对照组,脂肪泡面积比对照组小,PRP显着改善了脂肪移植组织的组织学质量。2,43,2,44,其他,2,45,研究6,方法:健康的大耳白兔10双侧面神经颊切开后硅神经再生导管(自制),双侧自控,随机作为实验侧和对照组。实验侧注入PRP,对照侧注入生理盐水;相关检查和分析,评估8周后面神经恢复和再生。,2,46,研究6,2,47,结果:面神经损伤后8周兔实验侧和对照组能诱导明确稳定的面神经复合动作电位,面神经损伤兔实验侧动作电位潜伏期明显短于对照组,振幅高于另一侧,说明PRP能促进面神经功能恢复。研究6,2,48,研究6,结果:显微图像分析在面神经损伤后8周,实验组有轴突数,直径和面积明显高于对照组。表明面神经损伤后PRP的早期应用有助于面神经的修复和再生。2,49,研究7,方法:离心分离兔全血以获得PRP。5%PRP作用于兔角膜基质细胞,CCK-8(细胞增殖-毒性测试套件)用于促进角膜基质细胞增殖。PRP和凝血酶激活剂以933301的比例制备制造的血小板较多的凝胶,多角度观察和评价组织形态、对角膜基质细胞的作用、粘附、生物相容性等。2,50,结果:培养后测定3组细胞吸光度od值,没有对照组od值增加,随着培养时间的延长,增殖基本停滞;PRP组的增长速度比FBS组和对照组快。PRP表明,与FBS一样,有促进角膜基质细胞增殖的效果。研究了7,2,51:组织学切片HE染色制造的富血小板凝胶是典型的多孔结构,在凝胶内排列成多纤维交织的状态,形成支架,角膜基质细胞接种在富血小板的凝胶表面,然后形成复合间质细胞,长成凝胶。角膜基质细胞说明在血小板较多的凝胶内生长良好,并表明今后以血小板较多的凝胶为载体重建角膜基质层的可能性。研究7,2,52,研究8,方法:收集128例有36度症状的子宫内膜移位患者,随机分为自体PRP注射组(实验组)和微波组(对照组)。阴户镜评价宫颈糜烂部位的愈合情况,利用koby-baue抑菌圈试验评价PRP的抗菌性,使用live/dead baclight死生菌套件检测生物膜的细菌活性。带血小板血浆治疗症状的子宫内膜移位的研究,2,53,研究8,结果:62名PRP组患者中40人痊愈,20人有效,总有效率为96.8%。60名微波治疗
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