交叉配血知识PPT课件

. 1，2020/6/11，交叉配血知识讲座，2，2020/6/11，RBC表面唾液酸丰富，在中性环境中带负电荷，相互分离。 通过缩短细胞间距离和桥接致敏细胞上的抗体之间，可以使RBC凝集。 凝集一般是抗体吸附在RBC抗原上而变成致敏状态的致敏RBC凝集成块状，1、2、3、4、4、2020/6/11、标本的采集和要求，5、2020/6/11、1 .标本在新鲜：年前的3个月内采集输血或妊娠：配血试验标本，通过回忆反应最近的输血和妊娠：如果出人意料的抗体可能迅速出现，对患者输血的历史和人身历史不清楚，所用标本应在输血前48小时内提取。 血液量约为5ml。 2 .葡聚糖、pvp等的使用：治疗前采集标本，防止RBC编码凝集干扰，标本具有代表性，可代表患者现状，6，2020/6/11，3.24小时内输血12u后：可输血未交配的ABO、RH同型血液，原始交配血用血清代表患者血清4 .防止血样稀释和溶血的发生：溶血标本一般不使用。 血清中游离血红蛋白在输血前实验中抗体反应溶血5 .标本标记：唯一标记无误，使用符合输血申请书的6 .血浆标本：应排除纤维蛋白原干扰7 .输血后标本保存：2-8，至少1周。7，2020/6/11、血型、1 .红细胞悬浮液的制备2 .离心力的基准3 .离心后的结果观察4 .盐水试验5 .正反定型结果的不一致原因和处理8，2020/6/11 .红细胞悬浮液的制备洗涤目的：rbc表面物质的少量血浆蛋白溶解红细胞的基质(具有抗体竞争的作用) 的抗凝剂(具有补充抗体的作用)需要至少一次用大量生理盐水洗涤浓度：一般用于抗体效价测定的5% :一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验等多种血型血清学试验的10% :一般用于测定抗体的亲和力的试验2020/6/11，2 .离心力标准为不同规格的离心机，转矩不同，离心转速统一，但离心力不统一。 离心转速换算式： RCF=1.11810-5(rpm)2R(cm)3.离心后的结果观察注意事项试管以30-45的角度握在手上，细胞按钮向上，轻轻按手腕，用液体拔出细胞按钮。 不要使劲摇试管。 这样凝聚粒子就会分散，弱凝聚被误判为阴性。 10，2020/6/11，11，2020/6/11，4 .盐水试验中多采用将RBC悬浊液加入血清后立即离心观察结果，12，2020/6/11，样品时加入血清加入红细胞，使其不泄漏的操作。 抗体和抗原的比例通常为2:1。 要确定血型，必须做正反定型实验。 正定型试验具有抗AB (检测弱a、弱b )反定型必须加入o细胞的条件，13，2020/6/115.正反定型结果不一致的原因：技术、检测红细胞或血清本身(1)技术与管理错误器材污染假阳试剂污染或假阳试剂与试剂错误假阳、 假阴离心过剩或假阳，假阴结果记录或判断错误假阳，假阴漏试剂假阴性反应造成溶血现象不能识别3354假阴，14，2020/6/11，(2)标准血清有效价格过低，亲和力不强。 抗a血清价格不高的话，将a亚型误认为o型，将AB型误认为b型。 (3)红细胞悬浊液过浓或过薄，抗原抗体比例不适当，反应不明显，误判定为阴性反应。 (4)血清异常华通凝胶或血清蛋白异常引起金钱形成，影响反定性结果的(5)红细胞致敏凝集在含高蛋白介质试剂中，产生假阳性的(6)最近接受异型输血，患者血液标本变成不同类型的红细胞混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。 (7)因病因素而抗原减少的白血病患者的ABO血型抗原受到抑制，难以检测。(8)红细胞多聚集现象RBC由于遗传或获得性表面异常而发生多聚集现象。15，2020/6/11，(9)获得性b级由于G-杆菌的作用，RBC由“b级”活性(10 )异常血浆蛋白患者血浆中异常白蛋白、球蛋白的比例异常和高浓度的FIB等形成编码状，假凝集现象(11 )最近进行大量血浆置换治疗，影响抗体的有效价格，难以逆定型(12 )产生不规则抗体的受试者血浆中含有ABO血型抗体以外的不规则抗体，如自抗I，与试剂a、b细胞上的相应抗原发生反应。 (13 )低c型球蛋白血症由于免疫球蛋白水平全面下降，血清定型时可能不凝集，也可能只出现弱凝集反应。 (14 )药物等因素的药物、葡聚糖等静脉注射可引起红细胞凝集。 (15 )新生儿、老年人等年龄因素。 16、2020/6/11、正反定型不一致的处理方法，首先再进行一次实验。 严格执行操作规程，使用质量合格的试剂，仔细观察结果，可以解决明显的问题。 初步可采取以下措施：1)重新取样，纠正污染和标本错误造成的不合格。 2 )将红细胞洗净数次，制成5%盐水细胞悬浊液，用抗a、抗b、抗A B进行实验，可以得到其他有用的信息。 条件抗h试验3 )对受试者直接进行抗人球蛋白试验，看RBC是否致敏4 )例如疑似a抗原和b抗原减弱的情况下，可以将受试红细胞和抗a和抗b血清作为吸收扩散试验。 5 )试验结果表明，红细胞排列成编码状，多混合1滴盐水，使编码现象消失。 6 )进行逆定型试验需要添加o细胞。 17，2020/6/11，疑难病血型病例1 .白血病血型变异2 .血浆蛋白障碍3 .级B4.多/全凝集5 .凝集6.ABO亚型、18，2020/6/11、3，不规则抗体筛查，筛查目的筛查程序不规则抗体筛查和交叉配血结果分析，19，19 主要由输血或妊娠等免疫刺激发生。 血型抗体是对体内免疫系统产生的血型抗原有特异性反应的免疫球蛋白类。 人血清有g、m、a、d、e五种，其中IgM、g是最重要的两种抗体。 RBC血型抗体称为完全抗体：可凝集于盐水的RBC、盐水抗体。 主要分子量大的IgM不完全抗体：在RBC上与抗原结合，可以致敏RBC，但不能在盐水中凝集。 主要是分子量小的IgG，需要使用抗球蛋白。、20、2020/6/11、1 .筛查目的：发现临床上有意义的不规则抗体，确保安全有效的血液。 献血者血清也要筛选不规则抗体，如果发现不规则抗体，就要鉴定该抗体，找到可与之配合的血液，不得擅自用于输血。 不规则抗体多为IgG抗体，不能在盐水介质中凝集，只能致敏相应抗原的RBC，需要通过特殊介质(酶、抗人球蛋白、poly等)使致敏RBC发生凝集反应，这些方法的选择可以由抗体的血清学行为和试验的具体条件决定。 临床上称为“同型血”的是ABO血型和Rh血型相同，其他红细胞血型不一定相同。 如果交叉配血不好，或仅用盐水介质配血，则可能检测不出ABO血型以外的不规则抗体，该抗体与相应抗原发生免疫反应，可能引起溶血性输血反应。21、2020/6/11、2 .筛选细胞：筛选细胞试剂，通常由含有Rh类、MNSs类、p类、Lewis类、Duffy类等通常抗原的23个人中的一个o型红细胞构成。 3抗体筛查试验的局限性：不一定能检测出所有有临床意义的不规则抗体。 一些抗低频抗原的抗体有漏检。22，2020/6/11，不规则抗体筛选操作程序，被检血清抗体筛选细胞盐水介质或非盐水介质(凝集胺、抗球蛋白、酶)、患者血清、患者血清、患者血清、筛选细胞I、筛选II、筛选III、血清患者红细胞， 血清筛选细胞i PolyGram100ul，LIM600ul，血清筛选细胞II，血清筛选细胞III，Resuspending100ul，非特异性凝集如果没有凝集就重新进行，特异性凝集， 在低离子介质中促进孵化促进抗体和RBC的结合，凝聚胺含有多价阳离子中和RBC表面的负电荷，减少RBC间距离的柠檬酸钠重悬浊液用负电荷中和凝聚胺的正电荷，凝聚解散正常的RBC，1.2.3.4 .对Kell系抗体不好，阴性结果是中国人大约100%为kk型，具有k抗原的几乎为0，至今还没有发现Kell类抗体。 23，2020/6/11，抗筛阳性，交叉配血相容性自抗h抗-Lebh抗筛阳性，但献血者红细胞可能正好不含相应抗原，因此可适应配血相。 抗筛阳性，交叉配血不相容同种异体抗体存在，自身存在阴性同种异体抗体，自身阳性冷反应自身抗体难以确定阳性温度反应自身抗体难以确定阳性“钱串状”红细胞形成非真实阳性结果，抗筛阴性酶试验、 抗球蛋白交叉配血试验等不相容献血者红细胞DAT试验阳性受血者血清抗体活性弱时，抗筛选试验与阴性抗体发生低频抗原反应，抗筛选阴性，盐水直接离心交叉配血不相容献血者红细胞为ABO血型不相容，室温反应中存在的同种异体抗体献血者红细胞为多凝集红细胞， 4 .抗筛选和交叉配血结果分析，24 2020/6/11，25，2020/6/11，交叉配血试验又称配伍性试验，实际上检查不配伍性，患者、献血者血液之间没有对应抗原、抗体成分(例如患者体内有抗a抗体，献血者RBC没有a抗原)试验在37以下四、交叉配血，26，2020/6/11，27，2020/6/11，28，2020/6/11，交叉配血试验通常包括：主侧(受试者血清受试者RBC ):响应于受试者RBC的抗体的次侧(受试者RBC受试者血清):响应于受试者RBC的抗体的自对照(受试者RBC受试者血清) :自抗体、 DAT阳性、RBC编码假阳性的存在，除了盐水介质外，至少在多胺法的配血的任何阶段如果不发生溶血或献血者的血液就无法给患者输血，29，2020/6/11，实际上抗筛阴性是不可避免的，但交叉配血不符合的情况，必须根据情况进行合理说明多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、霍奇金病及其他血沉加速的病例常见。 交叉配血不相容，在存在未获得的同种抗体的室温反应中，自身抗体AGT试验中显示出自身抗体的抗筛阴性，交叉配血阳性，显示出未检定抗体离心力不适当的可能性，假阴性水浴箱的温度不正确，造成错误结果的RBC错误地清洗和浮游，AGT试验的假阴性血清中含有溶血性抗体时，相应此时，应先灭活血清再进行试验。.30，2020/6/11，31，2020/6/11，谢谢！ 32，2020/6/11，有疑难配血病例，1 .冷凝素综合征，自凝集抗体，“o”，患者3血清自抗体4 .抗人球蛋白法配血可消除此现象，输“o”洗红细胞。 2 .输血前：“A”，输血a型红细胞4u，无明显反应，Hb尿仅见少许，即刻消失，但Hb从入院时12g下降到4g，我院