邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁.ppt

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁,一、实验目的,1了解分光光度计的结构和正确的使用方法；2学习吸收曲线的制作方法，理解最大吸收波长的意义；3掌握朗伯比尔定律的应用。,二、实验原理,在pH约为5的HAc-NaAc缓冲溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的橙红色络合物，max510nm,1.1104L/(molcm)。在510nm处吸光度与其浓度成正比，符合朗伯-比尔定律，用标准曲线法可求得试样中微量Fe2+的测定。如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将Fe3+还原成Fe2+。,三、主要仪器与试剂,1仪器722型分光光度计、10mL吸量管，50mL容量瓶。2试剂(1)铁标准溶液（含铁100g/mL）；(2)0.1%邻菲罗啉溶液；(3)5%盐酸羟胺溶液；(4)HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。,四、实验步骤,1邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制准确吸取铁标准溶液（含铁10g/mL，用含铁100g/mL配制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mLHAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计在=440-600nm分别测定吸光度A。以所得吸光度A为纵坐标，相应波长为横坐标，在坐标纸上绘制A与的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一般选用最大吸收波长max为测定波长。,2标准曲线的绘制准确吸取铁标准溶液（含铁10g/mL）0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于六个50mL容量瓶中，依次加入5mLHAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以不加铁的试剂溶液作参比，用1cm比色皿，在max处分别测定吸光度A。以显色后的50mL溶液中的含铁量(g)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。,3试样中微量铁的测定准确吸取试样10mL于50mL容量瓶中，按照绘制标准曲线的实验步骤，配制溶液并测定吸光度Ax，从标准曲线上查出对应的铁的质量，并求原试样中铁含量的浓度（g/mL）。,五、数据记录及结果处理,1吸收曲线绘制和测量波长选择,由吸收曲线可得，max=nm。,2标准曲线的绘制和铁含量的测定,若由标准曲线上查出对应的铁含量为cx，,则原试样中铁含量的浓度cFe计算：,六、思考题,1参比溶液的作用是什么？,2溶液酸度对测定有何影响？,3制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？,七、注意事项,1为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。2比色皿使用注意事项：1）每台仪器与比色皿配套，不能与其它仪器上的比色皿调换；2）拿取比色皿时，手指不能接触其透光面；3）装溶液时，先用该溶液润洗比色皿内壁23次，被测溶液以装至比色皿的3/4高度为宜，并用滤纸轻轻吸去比色皿外部的液体，再用擦镜纸小心擦拭透光面，直到洁净透明；4）测定系列溶液时，通常按由稀到浓的顺序测定；5）实验完毕，及时把比色皿洗净、晾干，放回比色皿盒中。,附722型分光光度计简要操作方法：,预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min。预热仪器和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，防止光电管疲劳；选定波长。转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。调节“T0”点。打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），使读数模式调至T上，在调节0%T旋钮，使数字显示为“00.0”；调节T=100。轻轻盖上吸收池盖（将参比溶液置于光路），调节透光率100%T旋钮，使数学显示为“100.0”；测定。使读数模式调至A，轻轻拉动比色皿