鸡新城疫的诊断

技术训练8新城疫诊断。新城疫的临床诊断和实验室诊断方法、训练目标、纽卡斯尔瓶疑死鸡和剪刀，镊子，病理尸检表，工作服，橡胶雨靴，围裙，橡胶手套，莱书亚等。9 11天的SPF鸡胚、孵化器、鸡蛋盘、接种盒、注射器(1 5毫升)、注射针、针、镊子、剪刀、眼剪和镊子、毛细管吸管、橡皮奶嘴、灭菌盘型、消毒盘型、器具材料，方法步骤，(a) ND的临床诊断，(b) ND的实验室诊断，(a) ND的临床诊断，1 .按照家禽尸体尸检程序，首先检查鸡的身体表面组织，然后检查皮下组织，最后打开体腔，暴露整个胸部和腹部器官，检查内部组织器官。新城疫主要检查消化道病变。单面检查填写在病理尸检记录表格上。根据验尸记录，初步诊断的诱导分析。(b) ND的检查室诊断，1 .病毒分离培养2。病毒鉴定，1 .病毒的分离培养，(1)病菌提取和处理分离病毒的材料，在早期的病鸡中使用灭菌处理，混合脾、脑、肺、肝、肾和其他器官组织，制成1: 5至1: 10的乳剂，分别添加青霉素10000单位和链霉素10毫克，可能被污染的细菌与此同时，接种材料要做灭菌检查，如果细菌生长，可以将原材料重新用作除菌，或者用细菌过滤器过滤细菌。(2)鸡胚预防接种9 11日的SPF鸡胚(如果没有SPF鸡胚，也可以使用非免疫鸡胚)，将上述物质接种到尿囊中0.10.2ml。接种后用融化的石蜡封闭蛋壳的预防孔，继续放入热气。每天下午拍一次鸡蛋，连续观察5d，24小时内接种死鸡胚胎，不使用，24小时后丢弃死鸡胚胎，4冰箱4小时以上(气室向上)取出冷冻室。然后用灭菌操作吸出尿液，进行无菌检查，尿液混浊必须丢弃。将灭菌状态的尿液存放在低温冰箱中，进行进一步确认。同时，将鸡胚倒在盘子里，可以仔细观察病变。因新城疫病毒死亡的鸡胚胎、胚胎的全身充血、胚胎头部、胸部、背部、翅膀、脚趾上的小出血点，特别是鳍、脚趾明显，这对诊断有参考价值。2 .病毒的识别，(1)微血凝试验(HA)(2)微血凝抑制试验(HI)，(1)微血凝试验(HA)，确认分离病毒是否具有血凝性，同时确定HI试验中使用的抗原的HA滴。利用微量吸管，在反应板的每个孔中分别添加生理盐水50l。在第一个孔中加入生理盐水，按3 5次吸管选择病毒，将50l移至第二个孔，然后将0l混合成3孔。稀释到第11洞，将液体混合到第11洞后，去除50l。第12个孔作为对照组，没有添加病毒抗原。吸1%红细胞悬浮液，在1 12个孔中分别加入50l。样品采集完毕后，将反应板放在微振荡器中振动1分钟。在室温(18 20)下工作30 40分钟左右，或在37 的恒温培养基中工作15 30分钟左右，观察并确定结果。结果测定和记录“”表明红细胞完全聚集。红细胞聚集后，在上层液体中没有悬浮红细胞的粒状、不均匀或锯齿状的边缘，完全沉入反应孔的底部。“-”表示红细胞没有聚集。反应孔底部的红细胞没有凝固，全部沉淀为小点，位于小孔底部，边缘水平。表示部分凝聚。红细胞沉降在“”和“-”之间。新城疫病毒溶液可以凝集鸡的红细胞，但随着病毒溶液稀释，凝集红细胞的作用越来越弱。当稀释到一定的倍数时，不能让红细胞产生明显的凝集，从而产生怀疑或负面的结果。血凝试验(ha)，ha视频，用上述分离病毒制造4单位病毒，然后用标准阳性血清进行HI检查。用微吸管在孔1 12中分别加入50l生理盐水。将1号吸入头标准阳性血清50l放入1号孔，挤3 5次，将50l放入2号孔，稀释10次后去除50l。第11个孔是病毒对照组，第12个孔是盐水对照组。用微量吸管吸出稀释的4个血凝酶的病毒抗原，在1 11孔中各添加50l。然后振动1分钟，反应板在室温下以1min的方式工作，或在37恒温培养基中工作5 10分钟左右。取出血凝板，用微量吸管在每个孔中添加1%红细胞悬浮液50l，然后将反应板放入微振荡器中，摇晃15 30s，均匀搅拌。将反应板放入37温度箱中，作用15 30分钟后，观察并记录结果。(2)微血凝抑制试验(HI)，结果判断和记录“-”表示红细胞凝集抑制。新城疫抗体起到抑制新城疫病毒鸡红细胞凝集的作用，反应孔的红细胞在反应孔底部以点状沉淀，没有血细胞凝集现象。“”表示红细胞完全聚集。血清稀释后，对病毒血凝的抑制减弱，反应孔内的病毒逐渐显示出血性凝血，最终红细胞完全凝集，沉淀在反应孔的底部，边缘不干净或呈锯齿状。“”表示未完全抑制。红细胞