单克隆抗体药物的临床前研发PPT课件

.,1,单克隆抗体药物的临床前研发,.,2,背景知识,大分子药物生物制药,始于1982年用重组DNA技术进行生物合成的人胰岛素(rHI),51ppt模板网搜集整理,举例激素(胰岛素，胰高血糖素，生长激素)造血生长因子(Erythropoietin,colonystimulatingfactors)干扰素(Interferons-,-,-)白介素(Interleukin-2)疫苗(HepatitisBsurfaceantigen)肿瘤坏死因子治疗用酶单克隆抗体,来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞等各种表达体系,.,3,研发流程,靶点的发现与选择,单克隆抗体的制备,药效筛选,药动评价,临床试验,.,4,靶点的发现和选择,集中在细胞死亡通路、血管生成、细胞周期调控信号转导等方面例如：CD20:表达于B细胞和成熟B细胞，调节B细胞增殖、分化；在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达抗CD20单抗可用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤单抗药物工作机理：抗体依赖性细胞介导的毒作用(antibodydependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)补体依赖性细胞毒作用(complementdependentcytotoxicity,CDC)中和细胞因子,.,5,单抗药物作用机理,.,6,经典靶点,.,7,单克隆抗体的制备,抗体的人源化嵌合抗体：应用DNA重组技术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组,再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达CDR移植抗体（改型抗体）：进一步用人的编码构架区(FR)替代鼠FR,形成更为完全的人源化抗体,即除了3个CDR是鼠源的外,其余全部是人源结构完全人源化抗体：1、噬菌体抗体库技术；2、转基因小鼠技术,.,8,.,9,药效筛选,特异性与亲和力鉴定：ELISA,WB,FACS,IHC,IP等,功能鉴定：ADCC,CDC,中和细胞因子,by抗体生产部门,by药效部门,.,10,ADCCLDHrelease,药效筛选,.,11,CDC-CTG,药效筛选,.,12,cellproliferationandantibodyneutralization,药效筛选,.,13,评估ADA是否会影响药效,药动评价,Pharmacokinetics,PK,Anti-drugantibodies,ADA,NeutralizingAnti-drugantibody,NAb,cell-based,non-cell-based,主要评估血清中药物水平，不被肾脏清除，半衰期长；单抗的主要代谢结果是降解为肽段和氨基酸，无需进行生物转化研究,评估免疫原性，是否产生ADA,.,14,间接法ELISA建立流程,.,15,优化案例,使用标准品建立实验时，假设二抗工作浓度已经确定，不同抗原浓度与一抗浓度正交实验,.,16,MSD旗下明星药物，旨在利用人体自身的免疫系统抵御癌症热门靶点：免疫检查点（ImmuneCheckpoint）如PD-1、PD-L1、CTLA-4、Tim3、LAG-3、VISTA等,KeytrudaFDA批准的第一个程序性死亡受体-1（PD-1)单抗,51