药敏试验方法简介ppt课件

耐药菌的问题越来越严重。“目前，药物失去功能的速度与科学家发现新药的速度差不多。”从世界卫生组织的报告来看，抗微生物疗法面临的困难，耐药性的持久问题是细菌不断获得新的耐药机制。以前对付耐药性的策略没有产生显著的效果。首先，抗微生物药敏试验(AST)预测抗微生物治疗的效果。指导抗菌药物的临床应用；发现或提示细菌耐药机制的存在，指导合理用药，避免细菌耐药的产生或加重；监测细菌耐药性，分析耐药菌的变化，掌握耐药菌感染的流行病学，控制和预防耐药菌感染的发生和流行。(1)我国抗菌药物的选择主要遵循临床实验室标准化委员会(临床实验室系统标准研究所)。CLSI)制定了抗菌药物选择的原则A组：常规检测和报告特定菌群的药物B组：可常规检测和选择性报告的药物C组：替代或补充药物U组：仅用于尿路感染的抗菌药物。葡萄球菌抗菌药物敏感性试验推荐组、肠杆菌科抗菌药物敏感性试验推荐组。推荐的不动杆菌药敏试验组、推荐的肠球菌药敏试验组、推荐的肺炎链球菌药敏试验组和药敏试验的分界点也按照每年新公布的CLSI标准进行，分为敏感性(S)、耐药性(R)和中间体(I)。敏感：当试验药物使用推荐剂量时，分离的菌株可被感染部位通常可获得的抗菌药物的浓度抑制；分离的菌株不能被常规剂量的试验药物的有效药物浓度抑制；分离的菌株可能有一些特定的耐药机制。治疗研究表明，药物对分离菌株的临床疗效不可靠，耐药性=治疗无效；敏感度治疗效果，2。抗菌药物的类型和机制，3。药物敏感性试验方法学，纸片扩散法(K-B法)，稀释法(MIC法)，肉汤稀释法，恒定稀释法，微量稀释法，琼脂稀释法，电子检验法，1。手动测试，2。自动仪器药物敏感系统，以及.纸片扩散法原理(K-B法):抑制区的大小反映了受试细菌对受试药物的敏感性，与药物对受试细菌的最低抑菌浓度呈负相关。在本文中，作者讨论了耐药与抑制区直径的关系。MIC、d1d2和MIC与抑制区直径之间的线性关系。选择纯菌落孵育16-24小时，置于生理盐水管中，振荡混合均匀，校正浓度至0.5麦克斯韦标准；将无菌棉签浸入菌液中，旋转并挤出试管内壁上多余的菌液，然后均匀涂抹并接种MH琼脂表面3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周。将平板在室温下干燥3-5分钟，用无菌镊子或商用纸片分配器将含药纸片粘附在琼脂表面；嘿。35孵育16 24小时，测量抑制区的直径；根据抑菌环的直径和CLSI标准，该报告具有敏感性、中间性和耐药性。2020/6/4，2020/6/4，23，CLSI标准的K-B法规定了纸张的药物含量、细菌接种浓度、培养基、平板厚度、培养时间、环境、测定标准、质量控制方法等。抗生素常规检测和报告。不同的药物测定标准是不同的；确定细菌的不同标准也是不同的。一、扩散法药物敏感因子，培养基酸碱度7.2-7.4营养水平(肠球菌能生长)厚度抗生素拮抗剂含量(由29212监测)钙镁离子含量，锌离子含量(由27853氨基糖苷类和亚胺类匹配结果监测)细菌悬液浓度高抑菌环收缩(假耐药性)浓度低会膨胀(假敏感性)，细菌纯度气体环境中常见细菌CO2因碳酸的影响而释放，其药物活性受到影响，形成假敏感性或假耐药性苛求细菌并在普通环境中引起生长不良，从而2020/6/4，稀释法用一定浓度的抗菌药物和含有被测细菌的培养基进行一系列不同的多次稀释(通常是二次稀释)，培养16-24小时后，通过观察细菌生长现象测定药物对被测细菌的最小抑制浓度(MIC)。稀释法(MIC法)，MIC法：分为常量法和微量法，常量法：肉汤稀释法，琼脂稀释法，微量法：微量肉汤稀释法，简化双浓度断点法，ATB药敏简化常规浓度分布MIC法BD，德勤药敏动力学计算MIC法VITEK32，VITEK2药敏，肉汤稀释法，无生长=抗生素抑制细菌生长=抗生素不能抑制细菌生长MIC(最低抑制浓度)=抗生素能抑制细菌生长的最低浓度。恒定稀释法，药物敏感性试验的参考方法：将标准接种物加入到含有稀释抗生素的MH肉汤试管中。一夜之间培养。最低抑菌浓度(MIC)是由含有抑制细菌生长的最低浓度抗生素的试管指示的浓度值(琼脂稀释法是将稀释的抗生素在50下融化后加入MHA，然后倒入平板中。接种物是一定大小的斑点。浓度也是104立方英尺/毫升)。解释标准(SorR)基于体内可达到的抗生素浓度水平。35气体环境：所有细菌(包括苛求细菌)都置于大气环境中；厌氧菌被置于厌氧环境中。微需氧细菌置于微需氧环境中；淋病琼脂用CO2稀释的孵育时间为18小时，2020/6/4。药敏结果可按CLSI标准用最小抑菌浓度(g/ml)或硫、磷、碘报告。对于稀释法的批量试验，有时需要报告MIC50和MIC90。稀释法药物敏感因子，培养基pH 7.2-7.4营养抗生素拮抗剂含量钙镁离子含量(钙10-25；镁10-12.5微克/毫升)细菌悬液(5104菌落总数/毫升)接种效果浓度高MIC升高浓度低MIC降低，细菌纯度气体环境所有需氧细菌放入普通大气环境。如果释放CO2，由于碳酸的影响，药物活性将受到影响。形成假敏感或假耐药真菌需要48小时，形成诺卡氏菌需要5天。在2020/6/4中，E-test方法结合稀释法和扩散法的原理来直接测量药物对被测细菌的最低抑菌浓度。MIC值标记在测试条的光滑表面上，Etest测试条和粗糙表面粘贴在MHA上。Etest操作程序是按照扩散法的标准操作进行应用和接种，粘贴测试条并培养15-18小时，读取抑菌浓度并按照标准、2020/6/4、细菌生长区、E测试条、细菌生长抑制区、2561280.16、解释MIC、肺炎链球菌青霉素MIC=3g/ml，结果读数，BDPhoenixTM-100 Phoenix全自动细菌鉴定/药物敏感性检测系统，最大样品量：同时鉴定100个样品并进行药物敏感性测试！鉴定部分：51孔鉴定实验改进了经典实验显色荧光检测不需要额外的实验和试剂，药物敏感性部分：85孔药物敏感性实验比浊氧化还原(专利)测得的多重稀释MIC值药物类型和浓度梯度最大耐药机制检测同时进行，封闭设计，安全无泄漏，先进的鉴定/药物敏感性复合板设计，PhoenixTM100 Ide检测板每20分钟检测一次，凤凰工作流程，在夜晚纯培养后从新鲜培养皿中挑选菌落，凤凰工作流程，制备标准浊度(0.5-0.6微克单位)的细菌悬浮液，在AST肉汤中添加一滴AST指示剂，Phoenix工作流程，准确地从ID肉汤试管中吸取25L菌悬液，加入到AST肉汤中，Phoenix workflow，测试板已准备好在计算机上进行测试。凤凰工作流程、巧妙的重力采样技术、面板扫描、数据输入、凤凰工作流程、将检测板放入仪器(任意位置)、凤凰工作流程等。各种面板只能通过区分革兰氏染色来选择：识别板、药敏板和药敏复合板可以同时提供独立密封的识别液和药敏液，无需用户准备。试剂储存在室温下，匹配试剂，强大的软件支持：BDXpert微生物学专家系统有助于解释和监控测试结果。测试结果可分别传送到LIS系统或b中心数据管理系统或打印机，并可进行各种统计分析。强大的软件系统。鉴定能力：革兰氏阳性菌鉴定180种革兰氏阳性球菌，革兰氏阳性杆菌，革兰氏阴性杆菌鉴定200种革兰氏阴性发酵罐，革兰氏阴性非发酵罐，无需额外实验，准确率为95-96%。识别时间：最小1:26小时最大12336025小时平均：24小时中值2336026小时95 thc336026小时，优异的识别性能，检测反应孔中微生物生长的浊度(传统方法):微生物生长形成小颗粒并聚集成块的氧化还原作用(BD专利技术):通过药物敏感性试验指示剂的颜色变化检测微生物的代谢浊度和氧化还原变化，每20分钟通过红、蓝、绿光检测一次，药物敏感性药敏类型和时间葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、肠杆菌属等革兰阴性杆菌GN-90%in5HrsGP-80%in6Hrs药敏特性真实MIC检测双稀释药物浓度延迟耐药检测急诊报告快速完成功能，耐药检测无需额外板条自动检测18种耐药机制：广谱内酰胺酶产生检测(ESBL)、耐甲氧西林葡萄球菌检测(MRS)、耐链霉素高菌株检测(HLSR)、耐庆大霉素高菌株检测(HLGR)、耐万古霉素肠球菌仪器自动记录每次解释的每个反应井的结果。将反应结果与先前的解释结果进行比较。当两个结果没有差异时，反应结束。内置算法：颜色比率数据库随时间变化：2、3、4、6、12小时，根据每个测试周期的解释结果生成“百分比图”，如果获得足够的信息，给出识别结果。细菌的标准量，可信度 90%，给出结果。微生物专家系统，鉴定实验，微生物专家系统-NCCLS-DIN-SFM-BDRules，报告-id-mi-ruleset sir-BDxperters-特殊信息，药物敏感性实验，微生物专家系统旨在解释和纠正药物敏感性结果，以确保药物敏感性实验结果准确可靠。因此，指导正确的临床抗感染治疗的专家规则来自：已建立标准的药物研发单位的文件(NCCLS、DIN、SFM)已被广泛接受，且经验不断更新。BDXpert微生物学专家系统规则的应用和对SIR结果的解释来自于专家系统规则NCCLS、DIN、SFM、自定义药物分类规则自然耐药性和自然敏感规则耐药性标签规则肠杆菌科：ESBL葡萄球菌属：MRS、-内酰胺酶(GPBL)肠球菌属：VRE、HLGR、HLSR、例如：先生解释。该规则规定肠杆菌科细菌氨苄青霉素断点： S8 (I=16) R 32参考文献：表2A (NCCLSM 100-S12，2002)。Phoenix表明，如果待测细菌为肠杆菌科细菌，且药物为氨苄青霉素，MIC=2，则结果为“S”。应用BDXpert微生物学专家系统规则，如自然耐药性，规则规定弗氏梭菌对氨苄青霉素和阿莫西林具有体内自然耐药性参：棕色.et，al .1989 .j .抗菌剂。化学疗法。Phoenix表明，如果待测细菌是弗氏梭菌和阿米西氏菌“s”或“I”或阿米西氏菌“s”或“I”，则AMorAMX结果变为“r”，并且报告表明待测细菌对抗生素具有天然抗性。检查鉴定结果和待测细菌是否为纯细菌，应用BDXpert微生物学专家系统规则，结果显示，鉴定结果(用户可修改)的MIC值来自BDXpert专家系统(用户可修改)的SIR结果最终结果的标准解释，鉴定和药敏结果显示，中文报告系统、TCP/IP以太网、震中工作站、Phoenix id/ast、bactec9000血培养、bactecmgit 960、li