药物安全性评价-局部给药毒性试验谭ppt课件

.名称：谭震源电话Q:539967694，广西医科大学药物安全评价中心，在药物安全评价中局部用药毒性试验，停止反应夺走手臂的孩子，“停止反应”事件的两个手性结构体，-50年代德国。“海豹畸形儿”，“海豹畸形儿”，“海豹畸形儿”。龙潭泻肝丸事件- 90年代中国，马兜铃酸，肾病，肾衰竭，毒尿症。事例，青春痘是年轻男女脸部、胸部等皮脂分泌旺盛区域经常发生的毛囊皮脂炎症。持续时间长，容易复发。克林霉素-过氧苯甲酰凝胶是由克林霉素磷酸酯和过氧苯甲酰制成的化合物制剂，临床用于治疗痤疮。要求观察对皮肤的刺激和过敏反应。在药物安全性评价中，进行局部剂量毒性试验，局部剂量毒性试验概念：是指使用局部药物后发生的毒性反应。最常用的制剂：包括皮肤药剂(涂料、擦剂、软膏、硬皮吸收剂等)、滴眼液、滴鼻剂和喷雾、肌内注射、直肠和阴道药剂等。第一节皮肤药物的毒性评价，I .皮肤组织结构皮肤用表皮、真皮、皮下组织复盖整个身体。ii .化学物质对皮肤的毒性影响类型，根据性质，药物对皮肤的损伤包括原发性磁极炎症反应和致敏反应，有时还会引起皮肤癌。第三，皮肤给药毒性评价包括：1，急性毒性试验2，长期毒性试验3，皮肤刺激试验4，过敏试验5，感光试验等。(a)皮肤病的急性毒性试验，1 .定义：动物完成或破损的皮肤一次性接触试验品后短期内出现的毒性反应实验。2.受试者：使用不符合剂量要求的临床制剂，如临床制剂浓度，受试者溶解粉末型的适当气质，如凡士林、羊毛脂等，均匀搅拌。3 .每个实验动物和实验条件组的动物数：通常是白兔，4-6只小型猪，10只老鼠或豚鼠，雌雄半株；动物重量：兔子2-3公斤，豚鼠200-300g，老鼠200-250g，小型猪30-40k g。食物，水摄取：自由食物，水摄取。动物室温度和湿度：兔子、豚鼠和小型猪在18-26 控制。老鼠在20-25 控制，相对湿度为40%-70%。换气次数为10-20次/分钟；12h明暗交替照明。4 .剂量设计应至少放置3个剂量组，另一个对照组，必要时放置空白对照组。如果受试者在临床给药时有可能与破损的皮肤接触，应另外设置破损的皮肤组。5 .实验性给药前，24h应在给药区(一般等)脱毛处理，给药时将动物脱毛区、液体制剂均匀涂抹在动物脱毛部位，将被实验品涂在敷料上，然后贴在脱毛或破损的皮肤部位，用半密封外罩固定敷料。24小时涂层后，去除敷料，用温水或适当的溶剂去除残留的试验品和成型剂。观测周期：14d连续观测，1-2次/日观测。根据毒性反应出现的情况，也可以适当延长。观察指标：在药物周期前后，测量7d、14d的体重，注射毛皮、眼睛、粘膜、呼吸、行动、自主活动、肌肉张力等动物后，进行颤抖、颤抖、痉挛、唾液、腹泻、少动、精神不振、昏迷等毒性如果有动物死亡，应立即进行尸检，如果有异常，应进一步进行组织病理学检查。6.观察指标，7 .结果评价对观察到的阳性症状进行大体解剖或与病理组织学结果综合分析，与对照组相比，明确判定动物的毒性反应和死亡原因。病理组、对照组、(b)皮肤给药长期毒性试验，1 .正义动物完成或受损皮肤的长期反复试验后出现的毒性反应及可逆性测试。2.受试者基本上等于“皮肤给药急性毒性试验”。3.实验动物及条件与“皮肤给药急性毒性试验”一致。4 .剂量设计必须至少有3个剂量组。(如有必要，可放置对照组，空白对照组。)大容量：原则上，动物应该出现明显的毒性反应，甚至个别动物的死亡。低容量：原则上应高于动物药效学实验的等效容量，对动物没有毒性反应。中等容量：动物会有轻微的毒性反应。5 .给药时间，6 .注射频率也要3个月，原则上每天服用；注射时间3个月，每周至少要注射6d；根据临床给药频率，也可以给药。7 .恢复期剂给药后，保留部分动物，继续观察可能发生的延迟毒性反应，了解毒性反应的可逆性程度。恢复期的长度取决于受试者的药动学特性、目标器官或目标组织的毒性反应和实际恢复情况。8 .实验工作第一次给药前24h给药区等脱毛处理。每天服用一次，每次至少6小时。确保受试者与给药部位接触良好，避免动物的药物摄入。可以用纱布等不刺激的辅料包裹，也可以给动物穿特殊通透性好的外套。9 .除了增加被处方部位的皮肤及其周围组织，甚至全身皮肤变化和皮肤病理检查外，其他指标与长期毒性实验要求相同。10 .结果评价全身毒性反应的结果评价与酱缸实验要求一样，应根据各检查指标及病理组织学检查结果进行综合分析。此外，还需要评估注射的局部及周围组织的毒性反应。(3)皮肤刺激实验，1 .定义：皮肤刺激：是指皮肤给药后发生在皮肤上的可逆炎症性病变。(给药部位发生不可逆的组织损伤称为腐蚀性。)皮肤刺激实验：观察动物的皮肤接触试物是否会引起红瘤、充血、渗出物等局部反应。2 .受试者应使用符合临床用制剂、符合临床用质量标准的受试者进行实验，注明其名称、来源、批号、内容(或规格)、发泡剂、保存条件及制造方法等，其中成型剂及杂质等名称和数量应尽可能清楚，并附有开发单位的自检报告。使用的成型剂必须标明批号、规格和生产企业，并满足实验要求。3 .实验动物可以在多种哺乳动物中选择，一般来说，白兔最喜欢每组4-8只，雌性，雄性。可以选择其他种类的动物(如小猪等)，如果选择兔子或小猪以外的动物，就要明确表明合理性。4 .实验操作设定成型剂对照组，使用机身左右自我比较法。试验24小时前给药地区的脱毛处理。去除毛发的范围为3cm3cm。给药前，要确认去除毛发没有损伤皮肤，受损皮肤不适合实验。)在对受损皮肤进行刺激性研究时，在投药部位用砂纸“井”字，挤出或划出“井”字，使其充血。4 .试验用药物一般为固体或半固体0.5克，液体0.5毫升，一侧去除毛的皮肤直接涂层，然后复盖纱布2层(2.5cm2.5cm)和玻璃纸或类似物，用无刺激的胶带和绷带固定。另一面涂上河豚作为对照组。粘贴时间至少为4h。紧贴结束后，去除受试物，用温水或无刺激性的溶剂清洁给药部位。注：多次注射的皮肤刺激实验，应持续在同一部位注射，每次注射相同的时间，一般附着时间不超过4周。5 .观察指标在自然光或全光谱光下观察皮肤反应。根据表中提出的分数标准，对皮肤红斑和水肿进行评分。6 .结果评价单剂量实验：计算各观察点组受试者和形成剂皮肤反应分数的平均分数，按表评价刺激强度。多次给药实验：首先计算各观察点组的积分平均值，然后计算观察期间各动物的积分平均值，按表评估刺激强度。(4)皮肤过敏实验，1，概念：皮肤过敏检查：观察动物皮肤早期接触后，对受试物进行接触，观察全身或局部过敏反应是否出现。，2，常用于过敏的测试方法，Buehler测试：0，6-8，13-15日封闭片剂局部给药诱导，27-28日肋骨腹部没有6h局部刺激。删除闭合片24和48h读取结果。GMPT测试：皮内注射诱导，5-8天后再诱导，20-22天注射发生容量24h，去除发生容量24和48h读取结果。(1)光过敏实验(光过敏反应)，(2)光毒性实验(光子极性)，3，皮肤光过敏实验，2小强度给药的毒性实验，1，下降道给药的急性毒性试验1。定义通过动物的强度(包括眼睛、耳朵、鼻腔、直肠、阴道)与主体接触一次后短期内出现的毒性反应实验。2 .受试者应使用临床制剂，包括临床制剂浓度不能满足毒性实验的容量要求等，并根据临床准备标准使用高浓度庆典剂。对于滴鼻剂或吸收剂，受试者大部分是液体或粉末。使用适当的气质混合，例如直肠、阴道药、栓剂、液体、药膏、凡士林、羊毛脂等。3 .实验动物及实验条件滴或吸入剂急性毒性实验一般选择老鼠、豚鼠、兔子；工作、阴道药必须选择老鼠或兔子。在这里老鼠必须选择SPF级动物。要选择其他动物，必须充分说明原因。每组动物：4-6只兔子，10只老鼠或豚鼠，雌雄半株。动物重量：兔子2-3公斤，老鼠，豚鼠250-300克。4 .实验阶段：(1)剂量设计(2)实验手术(3)观察指标(4)结果评价，根据经直肠、阴道给药的检查对象、其疗效特点及临床治疗方法，采用兔、鼠或比格犬进行长期毒性试验，给药途径尽量模拟临床给药途径，每次给药后保留时间应与可能的临床一致，确保药物和局部接触时间。剂量、剂量持续时间、恢复时间及观察指标可参考长期毒性常规要求。要特别注意给药可能局部和疲劳的周围组织的反应和病理变化。第二，室给药的长期毒性试验，3节刺激实验，1 .刺激定义：非口服给药后给药部位发生的可逆炎症反应，如果给药部位有不可逆的组织损伤，则称为腐蚀性。刺激性实验：观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等接触试物后，是否会发生红瘤、充血、渗出、退变或坏死等局部反应。分类：眼睛刺激实验、血管刺激实验、肌肉刺激实验、直肠刺激实验、阴道刺激实验、鼻液滴和吸入剂刺激实验、口腔药物及耳液滴刺激实验等。2 .眼刺激性毒性试验实例：氯霉素滴眼液是氯霉素的广谱抗生素，是目前眼制剂中最常用的抗生素。水溶液稳定性差，典型的反应是水解反应，氧化还原反应也发生。氯霉素滴眼液的高温加速破坏，以HLPC法检测降解产物为主为二醇物质；强光照射，分解产物主要是对硝基苯甲醛。因此，要调查分解产物对眼睛的刺激效果。1 .实验动物选择根据将采用的实验模型和观察指标选择实验动物。一般每个实验选择一个动物进行评价。2.应根据临床应用写作的情况确定给药的频率和期间制给药的频率和持续时间。重复使用的制剂一般每天服用一次，传递期最多不超过4周。一次性使用制剂可以用一次性使用法进行实验。3.可逆性观察明确了毒性反应的性质，建议静药后恢复期观察。局部毒性反应的可逆性评价应包括局部及相关部分的反应。摘要：注意问题，4 .受试者应与临床应用一致。对照组以溶剂和yes/or成型剂为阴性对照，必要时以上市制剂为对照。6.剂量设计主要要考虑受试者的浓度和总剂量。一般使用与临床制剂相同的浓度，并建立剂量组，改变剂量频率，进行容量调整，必要时应进行不同浓度的刺激性实验。在皮肤刺激实验中，不能满足增加剂量的目的，因为给药面积不变，增加厚度。注意事项，7 .药物传递