iso15189校准及校准验证在临床血液学实验室中的应用PPT参考课件.ppt

校准及校准验证在临床血液学实验室中的应用,吴先国,1,主要内容,校准品校准及校准验证凝血试验的校准及校准验证血细胞分析仪的校准及校准验证,2,检测方法的分类,分类有不同观点,大致上可分三类：确认方法（Definitivemethod）；参考方法（Referencemethod）；常规方法（Routinemethod）。,3,IFCC对方法分类的定义,确认方法：经过详尽的研究，没有发现具有已知的不准确度的方法。参考方法：经过详尽的研究，表明仅具有可以忽略不计的不准确度的方法。常规方法：具有系列书面的操作规程，说明检验人员为获得结果所必需的操作程序、材料和仪器等的方法。(1978年IFCC认可文件)。,4,标准品,基质效应：样本中的非测定物质对测定量的影响，使检测结果偏离真值。同无基质效应的标准品比较得出的有基质效应的样品检测值，将偏离于真值。是否能使用标准液取决于检测方法学，干扰极小的决定性方法或者某些已知干扰的参考方法可直接使用标准品。,5,一级标准,参考方法,常用方法,病人标本,参考值结果,常用方法结果,标化,标化,检测,检测,获得,获得,基质效应,可比性差,方案一,6,一级标准,参考方法,常用方法,参考值结果,常用方法结果,标化,标化,检测,检测,获得,获得,可比性好,病人标本,方案二,7,来源：人样品混合物如混合血清，添加某些分析物增加含量。处理过的样品，和新鲜样品有着新的基质差异。定值方法：无法由称量法和容量法确定，只能依赖于分析方法。校准值只能取决于分析方法和检测系统。,校准品,8,检测系统,完成一个检验项目检测所涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序、质量控制、保养计划等的组合，称为检测系统。若是手工操作，还必须包括具体的操作人员只有使检测系统的组合固定下来，才能使检验结果具有明确的性能。实现检验结果溯源性的重要前提，也只能在检测系统中予以体现。,9,检测系统的要素,10,一级标准,参考方法,常用方法,新鲜病人标本,参考值结果,常用方法结果,校准,标化,检测,检测,获得,获得,可比性差,校准品,检测,基质效应,方案一,11,一级标准(一级校准品),参考方法,常用方法,新鲜病人标本(二级校准品),参考值结果,常用方法结果,检测,标化,调整校准值,检测,获得,可比性好,校准品（预定值）,获得,校准,方案二,12,溯源性（Traceability）,通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。VIM：1993，定义6.10,13,校准值不是测定值，是纠正的调整值。,14,溯源性要求对实际工作的几点启示,校准品必须专用于某一检测系统同一校准品用于不同检测体系时，应该有不同的校准值不应再用单一标准液校准或标化结果不能用定值质控品校准仪器不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值质控品测定值相似或等于定值，不足以说明方法的准确度和结果绝对可靠性,15,主要内容,校准品校准及校准验证凝血试验的校准及校准验证血细胞分析仪的校准及校准验证,16,校准及校准验证过程,校准校准验证分析测量范围（AMR）验证,17,校准,CALIBRATIONisthesetofoperationsthatestablish,underspecifiedconditions,therelationshipbetweenreagentsystem/instrumentresponseandthecorrespondingconcentration/activityvaluesofananalyte.Calibrationproceduresaretypicallyspecifiedbyamethodmanufacturer,butmayalsobeestablishedbythelaboratory.校准是建立一套在规定的条件下试剂系统/仪器响应和分析物的浓度或活性值之间的对应关系的操作。校准程序通常由制造商指定的方法，但也可能是由实验室建立。,18,校准验证,CALIBRATIONVERIFICATIONdenotestheprocessofconfirmingthatthecurrentcalibrationsettingsremainvalidforamethod.Ifcalibrationverificationconfirmsthatthecurrentcalibrationsettingsarevalid,itisnotnecessarytoperformacompletecalibrationorrecalibrationofthemethod.Eachlaboratorymustdefinelimitsforacceptingorrejectingtestsofcalibrationverification.Calibrationverificationcanbeaccomplishedinseveralways.校准验证是指确认当前校准设置保持有效的过程。如果校准验证确认当前校准的设置是有效的，它不需要执行一个完整的方法校准或再校准。每个实验室必须定义校准验证的可接受或拒绝限。,19,校准验证频率,需要当一个方法首次投入服务时实验室必须校准和以后至少每六个月执行校准验证，然而，实验室可以选择重新校准方法（而不是执行校准验证）频率会更多，每六个月不止一次，如果是这样的话，就没必要进行校准验证。除了这六个月的时间间隔，若发生以下情况必需校准验证或重新校准（不论自去年执行后时间长短）：1试剂批号改变（化学或物理活性或关键成分改变时），除非可证实不同批号的使用不影响病人/客户测试结果的准确性及其所使用的参考范围；2QC失控；3大保养或维修后；4制造商推荐的时间。,20,校准验证材料,校准验证材料必须具有与临床标本相当的基质效应，可包括但不限于：1用于校准分析系统的校准品2供应商出于校准验证目的提供的材料3先前测试的未发生改变的病人/客户标本4有类似基质和靶值的原级或次级标准或参考物质，5第三方通用的参考材料，可以适用于试剂批号改变时的校准验证6PT材料和有类似基质和靶值的PT验证品在一般情况下，常规质控材料不适合于校准验证，除非是由制造商指定可用于方法验证的情况下。,21,AMRVALIDATIONistheprocessofconfirmingthattheassaysystemwillcorrectlyrecovertheconcentrationoractivityoftheanalyteovertheAMR.Thematerialsusedforvalidationmustbeknowntohavematrixcharacteristicsappropriateforthemethod.Thematrixofthesample(i.e.theenvironmentinwhichthesampleissuspendedordissolved)mayinfluencethemeasurementoftheanalyte.Inmanycases,themethodmanufacturerwillrecommendsuitablematerials.Ataminimum,threetestspecimensmusthaveanalytevalues,whicharenearthelow,midpoint,andhighvaluesoftheAMR.Specimentargetvaluescanbeestablishedbycomparisonwithpeergroupvaluesforreferencematerials,byassignmentofreferenceorcomparativemethodvalues,andbydilutionoradmixtureratiosofoneormorespecimenswithknownvalues.EachlaboratorymustdefinelimitsforacceptingorrejectingvalidationtestsoftheAMR.AMR验证是确认检测系统将正确还原被分析物在AMR的浓度或活性的过程。用于验证的材料必须有适当的基质特征的。样品的基质（即样品悬浮或溶解的环境）可能会影响分析物的测量。在许多情况下，制造商将推荐合适的材料。至少，三个测试样必须有分析值，其接近AMR的低，中间，和高值。样本目标值可通过同行间比对参考物质，或由比较方法或参考方法赋值，并通过稀释或混合一个或一个以上的已知值样品。每个实验室必须定义AMR验证可接受限或拒绝限。,分析测量范围（AMR）验证,22,AMR验证材料,AMR验证频率:同校准验证AMR验证材料:必须具有基质效应。可以包括但不限于：1适当基质效应的线性品（如CAP或其他合适的线性验证品）2PT能力调查材料或PT能力调查验证物3先前测试的未发生改变的病人/客户标本4有类似基质和靶值的原级或次级标准或参考物质，5先前测试的病人/客户标本，可以与已知量的分析物混合、稀释改变其测定值6原级或次级标准物质或有适当基质且以适当方法赋值的参考物7.不同批号的用于检测系统校准的校准品8.覆盖AMR且以适当方法定值的质控品,23,主要内容,校准品校准及校准验证凝血试验的校准及校准验证血细胞分析仪的校准及校准验证,24,凝血试验的校准及校准验证,基于凝固法并以凝固时间作为指标的项目(包括PT、APTT、TT)基于免疫学或其他方法直接测量分析物浓度/活性的项目(包括Fbg、D二聚体、AT3),25,基于凝固法试验的校准及校准验证,校准：根据CLIA88条款（InterpretiveGuidelines493.1255(a)：Proceduresinvolvinganinstrumentinwhichcalibrationisnotpractical,e.g.,prothrombinprocedures.），PT、APTT、TT的校准仅涉及仪器硬件部分的校准。校准验证：验证参考区间。,26,INR的校准及校准验证,27,基于免疫学或其他方法直接测量分析物浓度/活性试验的校准及校准验证,同临床化学试验,28,主要内容,校准品校准及校准验证凝血试验的校准及校准验证血细胞分析仪的校准及校准验证,29,参考文件,D5439493.1255(b)Standard:Calibrationandcalibrationverificationprocedures.APPENDIXC:SurveyProceduresandInterpretiveGuidelinesforLaboratoriesandLaboratoryServices,InterpretiveGuidelinesforLaboratories.Ws/T347-2011血细胞分析的校准指南2012-04-01实施,30,全血细胞计数校准频率,常规情况下每半年一次；在下列情况启用本程序：血液分析仪使用前(新安装或旧仪器重新启用)；更换部件进行维修后，可能对检测结果的准确性有影响时；仪器搬动后，需要确认检测结果的可靠性时；室内质控显示系统的检测结果有漂移时（排除仪器故障和试剂的影响因素后）；比对结果超出允许范围；实验室认为需进行校准的其他情况。,31,全血细胞计数校准（重新校准）,检查仪器保养：仪器外周环境确认、试剂察看、保养校准：校准前准备背景计数携带污染率精密度校准结果评判：,32,全血细胞计数校准验证,频率：以下情况需校准验证更换试剂时（如同一试剂供应商试剂类型改变或更换试剂供应商