贝克曼库尔特流式细胞仪临床应用课件

学习1、膜表面抗原和细胞内蛋白分析2、DNA含量和细胞周期分析3、定量分析4、细胞功能分析5、凋亡研究6、细胞间相互左右7、细胞筛选、1、交流PPT，1 .检测淋巴细胞亚群，检测细胞免疫状态2 .白血病/淋巴瘤免疫分型3.HLA组织相容性和HLA与某些疾病的关系TCR多态性检测； 肿瘤癌基因和抑癌基因蛋白产物的检测； 细胞内酶； 抗药性蛋白质的分析等。 2、学习交流PPT，临床应用疾病诊断：为疾病诊断直接或支持诊断所依据的免疫调节：细胞因子/受体的相互作用刺激分子受体/配体的相互作用的发病机制：肿瘤的发病和机体免疫力降低，以及有关信号转导障碍的药物/疫苗效果评价：肿瘤生物治疗时机选择、效果监测、免疫状态评价：移植、化疗等3，学习沟通PPT，细胞周期分析：在细胞周期(G0、G1、s、G2、m )的各个时期，DNA含量随时间周期变化。 用核酸染料标记DNA，用流式细胞仪分析，可以得到细胞各时期的分布状态，计算出G0/G1%、S%和G2/M%。 知道细胞的周期分布和细胞的增殖活性。 利用细胞周期蛋白(CYCLIN )、Ki67、核增殖抗原(PCNA )等，也可以正确地对细胞周期进行分类： G0、G1、s、G2、m .DNA含量和细胞周期分析、4、通信PPT、G2，m，G0，G1，s 1000，G2，m，G0，G1，s，0，200，400，s，dna分析，dna内容，计数，正常cellcycle，5，通信PPT，1 .肿瘤的早期诊断。 2 .肿瘤的良恶性判定。 3 .观察细胞增殖状态和周期分布。 4 .学习疗效监测、6、交流PPT、细胞功能分析.1.吞噬功能试验2 .氧爆炸试验3 .根据t淋巴细胞分泌细胞因子的差异将CD4或CD8分为经细胞免疫的I型细胞和经体液免疫的II型细胞.4.药物泵的功能检查5.NK细胞的学习凝聚功能检测、7 .交流PPT的树突状细胞分析(DendriticCells，DC )，DC是主要的抗原转导细胞，同时是重要的先天性免疫细胞，也是具有免疫调控功能的细胞群，没有发现特异性抗原标记DC的研究主要内容包括直接分析计数、体外诱导检测， 一般来说2组-DC、MDC的现在DC检查的方法：1)Lin-，CD11c CD123是使用CD80、CD86、CD83、DR等2 ) bdca 1、2、3、4分析外周血和其他组织3)CD14 16/CD85/CD33，CD t细胞分析，相对计数淋巴细胞亚群数目检测项目和意义，9，学习交流PPT CD4细胞的绝对计数，对AIDS患者的诊断、疗效和预后有重要指导意义，截止值为200/ul .绝对计数加浓度已知的标准微球和标本一起测定， 根据流式细胞仪控制软件设置后自动计算浓度，对任何细胞群都可以进行绝对计数，10、学习交流PPT、Th1Th2细胞因子分泌细胞测定而产生的细胞因子的类型和生物学功能，人的CD4 T细胞分为Th1、Th2Th1细胞产生IFN、TNF等细胞因子，主要参与细胞介导的免疫反应、迟发性过敏反应，在去除病毒等细胞内病原因子方面发挥重要作用的Th2细胞分泌IL4、IL5、IL6、IL10、IL13等细胞因子主要是体液免疫反应随着中和细胞外病原体，CD8 T细胞也分为Tc1和Tc2，介由Th1细胞：细胞免疫、细胞毒性t细胞的生长和活性化、巨噬细胞的活性化、延迟型过敏反应。 其功能亢进可引起炎症的慢性迁延、器官特异性自身免疫病、急性排斥反应和接触性皮炎等的发病和免疫病理损伤。Th2细胞：通过体液免疫，促进b细胞的生长、活化和分化，是IgG1和IgE系抗体的转换因子，其功能亢进引起特异性过敏反应，与高IgE综合征和嗜酸性粒细胞增多症有关。 11、学习交流PPT，在Th1Th2中检测Tips，检测t细胞是否激活，细胞转运阻滞是否成功，细胞膜穿孔是否有效，12、学习交流PPT，用细胞浆内同型对照(特别是FITC标记)，分别将弱表达的细胞因子13、交流PPT、TETRAMER、抗原呈递细胞(APC )具有的抗原片段通过与TCR复合体结合，在APC和t细胞的MHC相容性和其他共刺激分子的相互作用下激活t细胞，产生细胞免疫效果。 MHC-四聚体染色技术用于抗原特异性t细胞分析的原理是在体外模仿上述抗原传递过程实现特异性t细胞的鉴定，用流式细胞仪等高通量分析仪分析标本中这些细胞的四聚体技术的优点在于， 用能定量特异性免疫细胞的流式细胞仪测定，可以快速测定大量细胞，同时进行其他表面染色，不需要培养就可以用外周血直接测定的四聚体染色不杀伤细胞，所以被染色的细胞可以进行筛选和其他功能分析的四聚体全部特异不同厂家的MHC四聚体产品差异很大：贝克曼库尔特公司创造性地构建和表达了MHC分子3链的区域突变蛋白(iTAg )，降低了与非特异性t细胞的结合，大幅度提高了特异性。 将MHC四聚体直接标记在荧光上，负载常用的抗原多肽后全面商品化，有时单独销售MHC分子(iTAg )，研究者，14，交流PPT，15，交流PPPT，CD4CD25Treg，控制性t细胞的主要功能是抑制机体免疫功能， 太强免疫耐受非常方便太弱自身免疫反应控制性t细胞对抗原的抗原呈递细胞的呈递控制性t细胞的表现型是CD4 CD25bright，逐渐发现很多其他分子有可能被更正确地限定(eg.FOX-1 )。 ) CD25也是免疫细胞晚期活化的标志，但表达的平均荧光强度不够强，16，学习交流PPT，非特异性先天性免疫细胞T细胞：占外周血t细胞的10%以下，非抗原依赖型免疫细胞传染病、肿瘤患者的外周血数增加，CD3量比普通t细胞多表达NK细胞NK细胞可以根据NKR的差异进行分类，c型肝炎的发生和预后与NK细胞的表型相关的DC :分布和淋巴组织和外周血、非成熟状态，遇到相应的抗原后主要分泌IFN-alpha发挥左右作用，17、学习交流PPT，其他重要分子流程分析的意义，黏附分子：种干细胞HOMING，肿瘤的发生可能有重要关系，如CD11C/CD18-CD54与DC成熟和迁移有关的CD209-CD102和抗原转导相关的CD26:移植后造血干细胞的表达可能不利于该细胞的HOMING， 有证据显示造血干细胞移植成功，18、学习交流PPT，在流式细胞术移植中的应用，检测移植合身性和集体反应性抗体的荧光示踪标记的移植细胞： CFSE是确定的荧光标志物，对开发其他稳定的荧光素更有帮助学习流式细胞仪筛选，为了达到最高的筛选效率，实用上首先用磁珠筛选系统进行活细胞筛选是非常有用的，20、学习交流PPT，流式细胞术是生物医学研究的新方向，细胞多态性分析：受体、抗原折含CCR5的DC-sign (与AIDS敏感性有关)、NKR (中国科学技术研究的领先项目)信号转导(实际上主要是细胞内磷酸化和脱磷酸化蛋白质的检测)新型荧光特异性探针：细胞内病原体的检测、转录因子的检测， 细胞器和细胞生命活动指标的新荧光素的应用利用筛选出的细胞进行体内和体外的功能研究和其他定位性的荧光器件(如MPE CONFOC