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文档简介

，实验2，革兰染色法和孢子染色法。革兰染色法，实验目的学习革兰染色法并掌握；了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类及鉴定中的重要性。实验原理革兰染色法是丹麦病理学家HansChristianGram于1884年建立的细菌细胞的复合染色法。这种方法是细菌学中最重要的识别染色方法。第一步：最初染色：结晶紫使细菌变成蓝紫色；第二阶段：碘和结晶紫形成大分子复合物，可被细胞壁阻断在细胞内。第三阶段：酒精与：细胞壁成分结构不同，出现不同的反应G细菌：细胞不会被酒精脱色，而是保持紫色；G-细菌：酒精使细胞脱色，细胞无色。步骤4 :细致红染色，G细菌为红色，G细菌为紫色蓝色。革兰染色原理，实验仪器1)菌株：大肠杆菌和芽孢杆菌2)染色剂：结晶紫，细致红3)设备：显微镜，酒精灯，运载幻灯片，接种环，双瓶，镜纸等，革兰染色法，实验阶段，混合涂层剂，干燥，固定结晶紫1分钟，洗涤碘化物上吸出残留的水，1分钟，将玻璃片倾斜到白色背景上，将乙醇脱色至95%乙醇后流动的乙醇无色，直接将沃金蒂红重新加热2分钟，水洗干燥后进行显微镜检查。注：乙醇脱色是革兰染色工作的关键环节，脱色不足，阴均被染色成阳性菌。脱色过多，阳性菌染色阴性，革兰染色法，实验结果，阳性菌(蓝紫色)，阴性菌(红色)，学习和掌握细菌孢子染色法，实验目的孢子染色法；对芽孢杆菌形态特征的初步认识。实验原理孢子：某些细菌在特定的环境条件下，可以形成细菌休眠形式的圆形或卵形的小型身体。产生孢子的是革兰氏阳性菌。孢子染色法原理，弱碱性染料孔雀绿在加热条件下染色，使染料不仅进入细菌，还进入孢子。进入菌的染料洗后脱色，孢子着色后很难在水中洗掉，所以在对比大的材料染色后，也保持了早期染色剂的颜色，菌体被染色为着色剂的颜色，以便于区分孢子和菌体。实验设备1)菌株：芽孢杆菌2)染色剂：5%孔雀绿水溶液，0.5% annotatin水溶液3)设备：显微镜，滴管，酒灯，幻灯片，接种环等，实验阶段，1)采用改进的Schaeffer-Fulton染色法，提取细菌悬浮孔雀绿染色液(2滴)水浴加热染色15-20min 1滴，涂布机，固
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