人类染色体组型分析.ppt

实验一人类染色体组型分析,一、实验原理,组型(karyotype)是将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像.通常以模式图的方式表示,它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的,代表了一物种染色体组型的特征.由于染色体是遗传物质单位基因的载体,组型代表了种属的特征.所以组型分析对于探讨人类遗传病的机制等方面具有重要意义.,二、实验目的,掌握染色体组型分析的各种数据指标学习染色体组型分析方法制作人类染色体组的核型图片,三、染色体的特征,数目（2n=？）长度（绝对长度、相对长度）着丝粒位置（MSMSTT）随体与次溢痕的数目、大小和位置带型分析,四、应用意义,染色体组型分析染色体水平上的表型可确定物种的特征，确定种属亲缘关系分析生物物种的变异和进化过程识别单条染色体、基因定位临床应用（染色体疾病、产前诊断）,五、人类染色体及其制备方法1、人类染色体的特征和类型染色体的形态、结构特征在细胞周期中，以细胞分裂中期最为典型，称为中期染色体。,每一个中期染色体均由两条染色单体构成，每一条染色单体由一个DNA分子螺旋而成。两条染色单体互称为姐妹染色单体。两条染色单体通过一个着丝粒彼此连接。着丝粒将染色体分为两臂，长臂（q）和短臂（p）。如何获得中期染色体?,染色体形态测量数据,染色体的类型,2、人类染色体形态,中央着丝粒染色体,亚中着丝粒染色体,近端着丝粒染色体,3、人类的正常核型,核型（Karyotype）将一个体细胞中全套染色体按一定方式排列起来，构成图像。根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN），依据染色体的形态、大小和着丝粒的位置，将染色体分为七组：,核型（Karyotype）分析,组别染色体编号大小着丝粒位置A13最大中、亚中B4、5大亚中C612+X中亚中D1315中近端E1618较小中、亚中F19、20小中G21、22+Y，最小近端,4、人类染色体的带型,G-Banding,Q-Banding(Quinacrine),R-Banding,人类23对染色体,5、细胞培养与染色体制备,正常人外周血或细胞RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml370C，培养68hr加秋水仙素，培养24hr（抑制细胞分裂）收集细胞离心，去上清液（1000rpm/10min）低渗处理，0.075MKCI，370C，25min预固定，甲醇：冰醋酸=3：1离心，去上清液（1000rpm/10min）重复固定三次制片，染色，观察，照相，组型。,人体染色体显微照片,正常男性46,XY,正常女性46,XX,四、实验器材,人染色体显微照片,剪刀,镊子,胶水.,五、本实验的步骤,1.同源染色体配对编号:按图片上的染色体大小,形态,着丝粒位置,随体有无,进行同源染色体配对,将染色体分为22对常染色体和一对性染色体.编号为1-22号,性染色体编号为23号.2.分组:将大小,形态,着丝粒位置相近的染色体归为一组,一般分为A-G的7个组，每组3对染色体。3.粘贴:在实验报告纸上划8条横线,用剪刀按编号将图片上的染色体分别剪下,分组排列粘贴在横线上.如A组排列1-3对染色体,C组排列6-12对染色体等.性染色体单独排列在一条线上.,各组染色体主要特征:,Trisomy21(47,XY,+21)DownSyndrome,Trisomy18(47,XY,+18)EdwardSyndrome,Trisomy13(47,XY,+13)PatauSyndrome,KlinefelterSyndrome,单色FISH,染色体着丝粒荧光,染色体端