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文档简介
第七章细菌和病毒病原学检查、诊断方法:形态学检查、分离、培养和鉴定、抗原检查、基因序列检查、抗体标本采集和运送:无菌操作现场时间:抗生素前两个血清样本:急性期和恢复期尽快检查:冷藏运输、标记、第一节细菌感染的微生物学检查,1。细菌学诊断形态学检查。普通光学显微镜:2。活细菌、螺旋体及其动力学的检查。荧光显微镜检查:病原菌的分离和培养,生化试验,血清学鉴定,玻片凝集试验,动物试验:毒力和致病性试验:LD50和ID50,毒素药物敏感性试验:纸片扩散法,(2)病原体成分检测抗原检测:凝集试验、对流免疫电泳、酶免疫分析和免疫荧光核酸检测:1)核酸杂交技术:核酸印迹杂交、北方印迹杂交和原位杂交2)聚合酶链反应技术3)基因芯片4.16rRNA基因序列分析:编码rRNA、保守区、可变区,第三,抗体检测(血清学诊断)凝集试验:直接、间接、协同、浓缩和沉淀试验:循环、絮凝、二维和对流电泳补体结合试验:酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验):取双血清第二节病毒感染的微生物检验1。形态检查1。电子显微镜检查直接显微镜检查:107颗粒/毫升,病毒颗粒形态和结构的电子显微镜观察免疫电子显微镜(IEM):标本特异性抗体病毒颗粒聚集电子显微镜观察轮状病毒粪便,HAV,HBV血清,疱疹病毒疱疹液,早期诊断。2.痘病毒光学显微镜检查,包涵体观察,CPE,2。病毒分离和培养方法1。常用动物的动物接种:小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等。接种途径:皮下、皮内、脑内、腹膜内、静脉内等。观察:动物有感染的症状。取病理组织做进一步检查,2.鸡胚培养:孵化9 14天的鸡胚接种途径为:绒毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔和卵黄囊。鉴定:血凝及血凝抑制试验、尿囊腔接种、羊膜腔接种。卵黄囊接种,绒毛尿囊膜接种。组织培养器官培养、组织培养、细胞培养细胞培养:单层细胞培养、悬浮细胞培养;原代细胞培养:由新鲜组织制备的二倍体细胞:二倍体性质,传代40-50代,人胚肺成纤维细胞传代细胞系:由突变二倍体细胞或肿瘤细胞建立的HeLa细胞,3。培养细胞中病毒增殖鉴定指标细胞的变化:CPE红细胞吸附(HAd):红细胞凝集:病毒干扰:风疹病毒、echovirus、Vero细胞。中和试验(NT):是一种试验斑块形成试验,其中病毒被体内或细胞培养物中的特定抗体中和,并失去传染性:斑块形成单位(PFU)。传染性病毒的滴度以PFU/毫升表示。四.病毒成分的检测病毒抗原的检测:检测艾滋病毒和HBV抗原病毒核酸,ABCA:未感染的成纤维细胞。单纯疱疹病毒感染后使细胞变圆。细胞融合发生在呼吸道合胞病毒感染后。病毒抗体检测:中和试验:阳性:以前可能有潜伏感染,用于流行病学调查。补体结合试验:已知病毒的可溶性抗原用于检测患者血清中相应抗体的存在与否,作为近期感染的指标。血凝抑制试验病毒红细胞血凝病毒抗体红细胞血凝消失,用于流感病毒和副流感病毒的诊断、流行病学调查和病毒类型及亚型的鉴定。酶联免疫吸附法:单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒
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