皮肤刺激,皮内试验ppt课件

.1、刺激试验、刺激是与免疫学机制无关的一次、多次或持续与试验材料接触引起的局部炎症反应。 2、皮肤刺激试验、评价材料在试验条件下可能发生皮肤刺激反应。 预计家兔优先，无反应，可以直接使用三家兔。 3、试验材料和器械、天平精度0.01或0.1g供试验品称量用精度0.1或1mg试剂称量用兔子固定装置、手术剪刀、推子、游标卡尺、计量瓶、吸管、移液管、绷带、医疗纱布、烧杯、压力蒸汽灭菌器。4、试剂和器具灭菌、试剂75%(V/V )乙醇、0.9%氯化钠注射液或其他规定的提取介质。 器具灭菌和供试品接触的所有器具都必须用可靠的方法灭菌。 放入压力蒸汽灭菌器中，在121恒温20分钟，或放入电热干燥机中，在160下干燥2h。5、试验动物使用清洁健康、第一年未使用的试验用(新西兰)兔子，雌雄兼用、同一品种系、同一饲养条件、体重必须在2kg以上。 6、试验用兔的抓住固定方法试验用兔比较驯服也不会被咬，但是因为脚爪尖，所以应该避免兔子的划伤。 进行刺激试验时，抓住或按住兔子即可。 抓兔子的方法是用右手轻拿双耳，抓住脖子后皮的厚度，取出兔子，用左手支撑臀部，兔子的大部分体重落在左手，抬起双耳，抓住四肢，不能抓住腰和背。7、预备试验材料用一只动物进行预备试验。 动物出现明显红斑和浮肿时，无需进行其他试验。 如果动物看不到明显的红斑和浮肿反应，必须至少选择两只动物进行实验。 动物准备试验前一天，将试验用兔子人工固定在固定装置上，用手术切掉背脊柱两侧的毛后，用推子慎重地除毛(约10cm15cm的区域)，作为试验和观察部位。 拔毛的过程要确保动物皮肤的健康。10、试验方法、试验前用75%的(V/V )乙醇擦拭背部脱毛区域，干燥后根据供试品性状不同，用不同的方法操作。11、粉剂或液体样品取0.5g或0.5mL试验材料直接涂抹在剃毛皮肤部。 粉剂在使用前用少量的水制成糊状的话，涂起来很方便。 用25mm25mm透气性好的调味汁涂敷样品的皮肤部位，用纱布包住调味汁的外层，用半封闭性绷带固定调味汁和纱布4h以上。 接触期间结束后，依次取下绷带、纱布和调味汁，标记接触部位，用温水清洗后擦拭。12、将固体样品制成粉末，试验材料用水充分润湿，能保证与皮肤的良好接触性。 用25 mm、25 mm透气性好的调味汁块的被复材料接触部位，用纱布包住调味汁的外层，用半封闭性绷带固定调味汁和纱布4h以上，依次取下绷带、纱布和调味汁，标记接触部位，用温水清洗擦拭。13、药包材：铝软管：取5根样品，1根中加入显示容量的0.9%氯化钠注射液，振荡5分钟后，配合提取液准备。 一般材料：取平均部位表面积600cm2，加入氯化钠注射液100mL，在70下放置24小时后，取出冷却备用。14、0.9%氯化钠注射液及其提取液向25mm25mm的4层纱布块(每块约0.5mL )中滴下提取液，如下图所示涂布在动物背部的两侧。 将滴入0.9%氯化钠注射液的纱布块涂抹在对照接触部。 然后，用纱布包住调味汁的外层，用半封闭性绷带将调味汁和纱布固定4h以上，依次取下绷带、纱布和调味汁，标记接触部位，用温水清洗，擦拭。 作为结果，去除应用程序后，观察了在1h、24h、48h和72h上记录各接触部位的情况。 如果有持续性损伤，需要延长观察时间来评价该损伤的可逆性或不可逆性，但延长时间不需要超过14d。按照下表规定的分类系统，记述各接触部位的皮肤红斑和浮肿的反应状况，进行评价，记录结果并发行试验报告书。 记录和报告17、注：皮肤部位的其他异常。 表14中观察损伤情况和评价标准，评价表18、表15的皮肤刺激试验结果，评价结果，按以下规定确定原发性刺激指数(PII )。 每一只动物每隔一定时间加上试验材料得到的红斑和浮肿的原发性刺激得分，除以观察总数(总数为6:2得分类型和3个观察期)。 用0.9%氯化钠注射液进行对照，计算对照原发性刺激得分，从试验材料的原发性刺激得分中减去该得分，就能得到动物的原发性刺激得分。 使用24h、48h、72h的观察数据进行了计算。 试验前或72h后的恢复观察数据不用于计算。 把各动物的得分加起来除以动物总数就是原发性刺激指数。 简述皮肤内注射提取液对皮肤内刺激试验、评价材料的刺激反应的潜在性。 应该排除的试验材料是能刺激皮肤、眼睛、粘膜组织的材料和产品，例如腐蚀性强酸或强碱材料(pH2或11.5 )不应该进行该试验。21、试验材料和器械、天秤精度0.01或0.1g供试验品称量用精度0.1或1mg试剂称量用精度50g试验用兔子固定装置、手术剪刀、推子、计量瓶、吸管、注射器(2mL )、注射针(5#、8# )、烧杯、压力蒸汽灭菌器。22、试剂75%(V/V )乙醇、0.9%氯化钠注射液、植物油或其他规定溶剂。 器具灭菌和供试品接触的所有器具都必须用可靠的方法灭菌。 放入压力蒸汽灭菌器中在121恒温20分钟，或放入电热干燥机中在160下干燥2h。 供试品的调制根据产品标准的规定调制供试品。23、试验动物使用清洁健康、初年未使用的试验用(新西兰)兔子，雌雄兼用，同一品种系，在同一饲养条件下体重在2kg以上。 初步试验材料最初采用了至少两只动物。 最初的试验反应可疑或不明确时，必须考虑重新进行试验。24、试验程序、试验前一天，将试验用兔子人工固定在固定装置上，用手术剪下背部脊柱两侧的毛后，用压子仔细去除毛(约10cm20cm的区域)，作为试验和观察部位。 拔毛的过程要确保动物皮肤的健康。 试验前用75 % (v/v )乙醇擦拭背部脱毛区域，干燥后注射。 在兔脊柱左侧上5点(参见下图)注射器皮肤注射0.2 ml0.9%氯化钠注射液，用调制的浸液提供试液。 在兔脊柱左侧下5点(参见下图)注射器皮肤注射0.2 ml0.9%氯化钠注射液对照液。 向兔1只脊柱右侧上5点(参照图2 )提供用注射器注射植物油0.2mL调制的浸泡液，右侧下5点用注射器注射植物油对照液0.2mL。 根据试验材料的粘性，有时也选择不同规格的注射针进行皮肤内注射。 不要妨碍注射，尽量选小针。 观察记录了各注射部位的状况.27、28、29、30、31、32、24小时观察、33、结果观察、注射后和24h、48h、72h后。 用下表所示的分类系统，评价每个观察期间各注射部位的红斑(ER )和浮肿(ED )的组织反应，并记录了试验结果。 油系液体皮内注射多引起炎症反应。 在72h观察时，静脉注射适当的生物染料，显示刺激区域有助于反应评价。34、结果评价，通过以下方法确定刺激指数。 每隔一定时间把每个动物的渗出液出现的红斑和浮肿的刺激得分相加，除以观察总数作为样品刺激得分。 对试剂对照注射部位也进行同样的评价。 从试验材料刺激得分减去试剂对照的得分，计算动物刺激得分，计算刺激指数。记录和报告注：注射部位的其他异常情况，35、记录和报告注：注射部位