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文档简介
第48次基因工程的应用,蛋白质工程的兴起,Bt毒蛋白质基因,蛋白质组学抑制基因,淀粉样蛋白抑制基因,病毒外壳蛋白基因,病毒复制酶基因,渗透压调节基因,冷冻蛋白质基因,蛋白质,外来生长激素基因的表达产物、体外基因治疗、某细胞、转移基因、腺苷脱氨酶基因不足而患先天性体液免疫缺陷症的美国少女。 首先把患者的白血球取出体外培养,用某种病毒把正常的腺苷淀粉酶基因转移到人工培养的白血球中,这些转基因白血球回到患者体内,经过多次治疗,患者的免疫功能正常了。 (1)基因工程技术应用于治疗该病,在本例中,载体是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _作为目标基因的受体细胞。 将一种病毒、腺苷脱氨酶基因、白血球、(2)转基因白血球多次输血到患者体内后,免疫能力变得正常的是人的腺苷脱氨酶基因与胰岛素基因相比,主要的差异是与大肠杆菌基因相比,其主要特征是: (4)该病的治疗方法是在基因工程的运用中,该治疗方法的原理是: 腺苷脱氨酶(或抗体)、转录、翻译、脱氧核苷酸序列顺序不同(或遗传信息不同或碱基数量和序列顺序不同),编码区有间隔,不连续(或编码区有外显子和内含子),基因治疗, 将健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞实现治疗目的【分析】主题主要考察了遗传和基因工程知识,了解真核细胞和原核细胞的基因结构特征,掌握基因工程的基本内容,特别是基因工程操作的基本程序。 本题是基因工程技术在医学临床上的应用基因治疗。 其基本过程是用基因工程的方法,将健康的外来基因导入有基因缺陷的患者细胞中,使其正常表达,从而达到治疗相关疾病的目的。 试验点二蛋白质工程【回扣教材】1 .概念:以与蛋白质分子的关系为基础,改造或改造蛋白质分子, _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 蛋白质结构,氨基酸序列,脱氧核苷酸序列,【典型的精析】【例2】蛋白质工程学中需要直接操作的对象是() a .氨基酸结构b .蛋白质空间结构c .肽链结构d .基因结构【调查类型】。 蛋白质工程学是根据蛋白质的分子结构规律和生物功能的关系,通过基因修饰和基因合成,改造现有的蛋白质,制造新的蛋白质,满足人的生产和生活需求。 因此,最终,必须改造基因。 【方法的总结】正确把握蛋白质工程学的概念是解决本问题的关键。 d,试验点三DNA的粗提取和鉴定【回扣教材】1.DNA的粗提取原理DNA的粗提取,利用DNA和RNA,蛋白质和脂质等物理化学性质的差异,提取_,去除其他成分。DNA、(1)基于DNA的溶解性粗提取DNA的原理: DNA和蛋白质等其他成分在浓度不同的NaCl溶液中,其浓度不同,但通常用2mol/LNaCl溶液溶解细胞中的_ _ _ _ _ _,杂质容易沉淀; 0.14摩尔/lnacl溶液的DNA溶解度会变得 酒精是常用的有机溶剂,DNA虽然不溶于酒精(特别是95%的冷却醇),但是利用细胞中有几个_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _,可以将DNA与蛋白质进一步分离出来。 利用溶解度、DNA、最小、DNA析出、蛋白质、(2)酶、高温、DNA对洗涤剂的耐受性原理粗提取DNA。 由于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 用6080的高温处理材料可以达到粗提取DNA的目的,虽然细胞膜能崩溃,但对DNA没有影响,所以使用该试剂可以使细胞破裂,更好地提取DNA。 如上所述,不同浓度的物质可以用于提取DNA .在6080下的物质。 蛋白质酶、蛋白质改性、洗涤剂、NaCl溶液、醇、蛋白质酶、高温、洗涤剂、2.DNA判定的原理是:利用不同浓度的NaCl溶液溶解或析出DNA,从细胞中利用可以纯化的酒精进一步分离DNA和蛋白质,鉴定达到纯化目的最后用二苯胺试剂提取的物质是否是DNA。 沸水浴、蓝、二苯胺、3 .实验设计(1)实验材料的选择:不同生物组织的DNA含量不同。 选择材料时,要遵循材料容易获取和提取的原则。 (2)破碎细胞,得到含有DNA的滤液:将鸡血作为材料,在鸡血球液中加入一定量的洋葱,用玻璃棒搅拌,过滤后能够收集滤液的洋葱作为材料时, 请将洋葱切成细丝,加入一定量的洗涤剂和食盐(洗涤剂要充分搅拌和研磨,使食盐溶解,然后过滤收集研磨液)。 DNA含量高,蒸馏水使血球大量吸水而破裂,破坏细胞膜、DNA,破坏细胞壁,使DNA大量溶解于NaCl溶液中,(3)除去滤液中的杂质,最初得到的DNA滤液中含有蛋白质、脂质等杂质,需要进一步纯化DNA 具体方法为提案1 :滤液NaCl(2mol/L)过滤除去杂质加入蒸馏水使NaCl溶液浓度为0.14mol/l使DNA析出加入过滤物得到的2mol/LNaCl溶液DNA-NaCl溶解液提案2 :滤液若肉粉(馅饼1015分钟静置过滤DNA滤液而得到的方案3 :滤液6075处理过滤DNA滤液而得到的方案1的原理是方案2的原理是方案3的原理在DNA浓度不同的NaCl溶液中的溶解度不同,蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA,蛋白质和DNA的变性温度不同,(4)鉴定为DNA的析出。 滤液与均匀混合,静置23分钟,析出的白色丝状物为。 DNA的鉴定:试管为2根,编号甲、乙各2mol/L的_5mL在甲中加入少量的白色丝状物使之溶解各4ml加入_中,均匀混合_ _ _ _ _ 5min观察颜色的变化。、等体积的冷却酒精、DNA、NaCl溶液、二苯胺、沸水浴、【典型的精析】【例3】(2013江苏)有同学用洋葱进行了DNA粗提取和鉴定实验,操作错误是() a .放入洗涤剂后,用力迅速, 充分地将用蛋白酶过滤过的研磨液中的DNAC .醇加入后,用玻璃棒轻轻搅拌,混合d .二苯胺试剂后,用沸水浴加热【解析】加入洗涤剂和食盐后,如果不减轻研磨动作,使其变软,就容易产生大量的泡沫,不利于后续工序的操作蛋白质用蛋白酶水解可以纯化研磨液中的DNA。 加入酒精后,用玻璃棒轻轻搅拌防止DNA切断。 加入二苯胺试剂,用沸水浴加热,鉴定DNA的存在。a、核、红、DNA、(2)实验前老师制作的血球液不是鸡的全血,而是作为实验材料提供给学生们。 主要原因是:主要原因是: (3)在牧区采集牛、羊、马的血很方便,使用此材料按照实验要求完成实验步骤后,结果显示,使用动物的肝脏制作实验材料,实验就能顺利进行。 (1)鸡血红蛋白细胞中含有核,鸡是鸟类,新陈代谢旺盛,红血球需要供给O2,因此红血球的数量多,丰富的DNA,其中DNA的相对含量高,难以提取DNA,其中没有核,成熟的红血球,肝脏细胞中有核(2)鸡的全血中含有血浆和血球,血浆中没有DNA,是从血液中除去血浆后浓缩的血球液,提高了DNA的相对含量。 (3)牛、羊、马是与人相同的哺乳动物,但哺乳动物成熟的红血球中没有核,只有血液中的其他血球和淋巴细胞中的少量DNA,实验中难以提取白色丝状物(DNA ),肝脏细胞中含有核,如果操作正确,就可以提取DNA。 【方法总结】本问题有一定的困难,需要基本的生物学常识,可以结合本实验的原理正确地分析。 上课48一、练习选修课1 .土壤农杆菌将自己的Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA中,使植物形成肿瘤。 T-DNA中含有植物生长素合成酶基因(s )和细胞因子合成酶基因(r ),它们的表达影响相应植物激素的含量,控制肿瘤组织的生长和分化。 图分析显示,下文描述的符合() b,2 .基因工程概念的是() A.B淋巴细胞和肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有b淋巴细胞中的抗体基因b。 人的干扰素基因重组质粒后,导入大肠杆菌,得到产生人干扰素的菌株c。 用紫外线照射蓝霉素,改变其DNA,使青霉素高产菌株d .自然界中天然存在的噬菌体感染细菌后,通过筛选该DNA与细菌DNA的集成,基因工程是根据人们的希望,进行严格的设计, 通过体外DNA重组和基因重组等技术,给生物赋予新的遗传特性,并创造出符合人们需求的新的生物类型和生物产品。 b细胞与肿瘤细胞融合,用属于细胞工程的紫外线照射蓝霉素,改变其DNA,筛选青霉素高产株的是人工诱变的自然界中天然存在的噬菌体感染细菌后,该DNA被合并到细菌DNA中,没有人为加工,属于基因工程3、在使用基因工程技术构建抗除草剂转基因烟草的过程中,以下操作错误的是() a .用限制核酸内切酶筛选烟草花叶病毒的核酸b .切断的抗除草剂基因和载体c .重组DNA分子用烟草原生质体d .含有除草剂的培养基筛选基因重组烟草细胞【解析】烟草花叶病毒是使烟草生病的病原微生物,r a,4 .在以下技术中,根据DNA分子杂交的原理,用DNA分子探针诊断疾病B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交快速灵敏地检测饮用水中病毒含量目的基因和载体结合, 形成重组DNA分子ab .c .d .基因诊断和基因检测原理相同,都利用特定的DNA片段与被检测样品进行分子杂交,达到了一定的目的,正确的b淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交是动物细胞的融合,目的基因和载体a,5 .以下基因工程和蛋白质工程的描述准确地说() a .基因工程在分子水平上操作基因,蛋白质工程不操作基因b .基因工程合成天然存在的蛋白质, 蛋白质工程是天然存在的蛋白质c .基因工程在分子水平上操作,蛋白质工程在细胞水平(或性状水平)上d .基因工程与蛋白质工程完全不同“解析”蛋白质工程通过基因改变或基因合成改造现有蛋白质,制造新的蛋白质a、c、d错了。 b,6 .以下基因工程描述准确地说() a .基因工程是以细菌抗性基因为目的的基因b .重组DNA的形成和扩增是在细胞内完成的c .基因工程育种是对生物性状进行定向改造的, 迅速形成新的物种d .限制酶和DNA连接酶是构建重组DNA所需的工具酶,d【分析】基因工程的目的基因来自细菌、动物、植物等,如抗性基因、抗病虫害基因、抗盐害基因等抗性基因,动物生长激素基因、植物花青可以是a错误的重组DNA的形成和扩增在细胞外的一定条件下完成,b错误的基因工程育种能够定向改造生物性状,但是是否形成新的种子,需要看到该生物和原种是否引起生殖隔离,c错误的限制酶和DNA连接酶是重构DNA所必需的7 .增加玉米细胞中赖氨酸含量的最有效方法是() a .富含赖氨酸的蛋白质编码基因是玉米细胞b .玉米细胞中的天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因c .天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因改变的个别碱d .根瘤菌
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