药物的体外抗菌试验

.微生物与药学的关系，1 .某些微生物能生产药物(微生物制药)2.微生物可能污染药品(药物的微生物检查)3.某些药物能抗菌或杀菌(药物的抗菌试验)、药物的体外抗菌试验、药物的体外抗菌试验、用途：抗菌药物的筛选、药物的抗菌空间抗菌：抑制微生物增殖，但不能杀死微生物，药物被除去后微生物可以生长的杀菌：即使可以杀死微生物，药物被除去后，微生物就不能增殖。 两者不是绝对的，而是在一定条件下相对的。 常用的体外抗菌试验，琼脂扩散法滤纸片法挖沟法连续稀释法，琼脂扩散法，原理：药物能自由扩散到琼脂培养基中，形成一定浓度的含药区域。 由于各种微生物对不同药物和同一药物浓度的敏感性不同，形成了一定大小的抗菌圈和抗菌距离，根据其大小，可以知道药物抗菌作用的大小和微生物对实验药物的敏感性。滤纸片法：制作出含有菌的平板后，在滤纸片上沾上药液，放在平板上，观察培养结果，通过测定抗菌环直径，判断试剂抗菌作用的强弱。 用于新药初筛和临床药敏试验。 挖沟法： 1、在琼脂平板上挖沟，在沟两侧垂直划线，接种各种试验菌，向沟中注入药液。 2 .培养后，从槽两侧生长的试验菌距槽的距离，判断药物对试验菌的抗菌作用的强弱。 适合在一个平板上试验一种药物对几种不同试验菌的抗菌作用。 琼脂扩散法具有方法简便、技术要求不高、操作容易掌握的特点。 但是，由于精度不高，一般可以用于定性地或初步地判断其作用的强弱。 液体稀释法是一种测定药物抗菌作用的定量方法，比琼脂扩散法更为精确和普及。 连续稀释法可用于测定药物最低抗菌浓度(MIC )和最低杀菌浓度(MBC )。 可以是液体培养基，也可以是固体培养基。 能抑制试验菌生长的最高药物稀释度是该药的最低抗菌浓度(Minimalinhibitoryconcentration，MIC )。 使培养后细菌不生长的最高药物稀释度为最小杀菌浓度(minimalbactericidalconcentration，MBC )。液体连续稀释法，1、在一系列试管中用液体培养基连续加倍稀释试剂，使药物浓度按试管顺序倍增。 2、各管加入同量实验菌，培养1624h后，与阴性及阳性对照管进行对照观察。 3 .取出未生长细菌的培养液，分别栽培寒天平盘。 如果培养后有了新的试验菌，表明该药只有抗菌作用。 如果无菌成长，认为这种药有杀菌作用。 在药学上，有必要对两种抗菌药物并用时的相互作用以及抗菌药物与不同PH值或不同离子溶液的相互影响进行检测。 加强药物抗菌作用是协同(synergism )，减弱药物作用是拮抗(antagonism )互相不影响是无关作用的两者之和是相加(addition )。联合抗菌试验的常用方法，一、纸片试验(paperstriptest )，在接种了试验菌的平板表面垂直放置2条浸有一种药液的滤纸条，培养后，根据抗菌区的增强、削弱或无影响，判断联合应用时的效果。 图20-2是备忘录实验的示意图。 图20-2是备忘录实验的示意图。 图中a列的两张便条中，一张包含抗菌药，另一张不包含抗菌药的b列的两张便条中包含抗菌药。二、棋盘式(checkboardtest )因在试验时两种含有不同浓度药物的试管排成棋盘式而得名，以评价两种药物同时以不同浓度进行共同试验时的抗菌活性。实验时将试管排列6列，各6列，共计36瓶为四角，分别用液体培养基稀释a和b药，a药稀释度纵向定量添加到各管，b药稀释量横向添加，两药同时用抗菌实验进行对照。 然后加入定量菌液，培养后观察结果。 抗菌试验的影响因素，1、试验菌：专用供给机构提供的标准菌株。 北京卫生部药品生物制品检定所菌种保存中心。 试验菌必须合理储藏，事先鉴定纯化和生物学特征。使用的试验菌株应该处于对数生长期，因此期微生物对外在因素的变化最敏感。 试验结果的灵敏度在一定程度上与试验菌的接种量成反比，所以应该选择合适的接种量。 抗菌试验的影响因素，2、培养基抗菌试验的培养基应根据试验菌的需要进行调制。 例如链球菌常用含血清的肉汁培养基，抗真菌药物试验需要沙氏培养基。 培养基的酸碱度、电解质、还原性物质等可能影响试验结果，实验时，要尽量排除影响实验结果的因素的混入。 无菌检查合格。抗菌试验的影响因素、3、抗菌药物的浓度、pH和含有的其他成分会影响试验结果，特别是生药制剂多含有色素、杂质、单宁等，请注意这些都有可能导致错误的结果。 抗菌试验的影响因素，4，对照试验：为了正确地判