早期气道接触细菌抗原对th1-th2平衡的影响

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/7早期气道接触细菌抗原对TH1/TH2平衡的影响作者冯艳青刘泉作者单位066001河北省秦皇岛市第三医院呼吸科【摘要】目的了解早期气道接触细菌抗原对辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2TH1/TH2平衡的影响，从而更深入地认识哮喘的发病机制。方法将新生SD大鼠随机分为107、106、105细菌抗原接触组A、B、C组、哮喘组D组及对照组E组，每组8例。细菌抗原接触组大鼠分别于出生后第1、3、5、7天鼻咽部给予107、106、105灭活肺炎链球菌及流感嗜血杆菌混合液10L，D组及E组大鼠则给予磷酸盐缓冲液PBS10L。大鼠饲养至成年后造模，观察5组大鼠血清中白介素4INTERLEUKIN4，IL4、干扰素INTERFERON，IFN的含量。结果A、B组大鼠血清中IFN水平较哮喘组明显下降P【关键词】大鼠哮喘细菌抗原气道炎症卵蛋白【ABSTRACT】OBJECTIVETOINVESTIGATETHEEFFECTOFEARLYEXPOSURETOBACTERIALANTIGENINAIRWAYONTHEBALANCEOFTHELPER1CELLS/THELPER2CELLSTH1/TH2INORDERTOUNDERSTANDTHEPATHOGENESISOFASTHMAMORETHENEWBORNRATSWERERANDOMLYDIVIDEDINTO107,106,105BACTERIAL精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/7ANTIGENEXPOSUREGROUPS，ASTHMAGROUPANDCONTROLGROUP，WITH8RATSINEACHRATSINBACTERIALANTIGENEXPOSUREGROUPSWEREGIVEN10LBACTERIALMIXTURES107,106,105CONCENTRATIONSRESPECTIVELYOFINACTIVATEDSTREPTOCOCCUSPNEUMONIAEANDHEMOPHILUSINFLUENZAEVIANOSERESPECTIVELYONDAY1ST,3RD,5TD,7TDAFTERBIRTH，HOWEVER，THERATSINASTHMAGROUPANDCONTROLGROUPWEREGIVEN10LPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPBSTHERATSGREWINTOADULTS，THEYWEREMADEINTOASTHMATICMODELS，ANDTHESERUMLEVELSOFINTERLEUKIN4IL4ANDINTERFERONIFNWEREDETECTEDFORALLTHETHESERUMLEVELSOFIFNINGROUPAANDGROUPBWERESIGNIFICANTLYLOWERTHANTHOSEINGROUPDP【KEYWORDS】RATSASTHMABACTERIALANTIGENAIRWAYINFLAMMATIONOVALBUMIN支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，发病过程涉及淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞等多种炎性细胞以及多种细胞因子，发病率呈逐年上升趋势。但其发病机制尚不完全清楚，有研究发现，CD4T细胞TH两种亚型TH1、TH2功能失衡在哮喘发病过程中占据重要地位1。为探讨哮喘的免疫学发病机制，本实验设计在大鼠出生早期精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/7于鼻咽部给予不同浓度的灭活肺炎链球菌及流感嗜血杆菌混合液，大鼠饲养至成年后造模，检测动物血清中白介素4IL4、干扰素IFN的水平。1材料与方法实验动物健康SD孕鼠4只北京维通利华实验动物技术有限公司提供体重240270G,8周龄，动物使用许可证号SCXK京20060005，所产幼鼠供实验用。试剂与仪器卵蛋白OVA，SIGMA公司百日咳杆菌菌苗1010/ML，北京生物制品研究所肺炎链球菌23F型，昌平疾病预防控制中心CDC传染病所流感嗜血杆菌乙型，昌平CDC传染病所超声雾化器德国百瑞公司IL4试剂盒尚柏生物医学技术有限公司、IFN试剂盒尚柏生物医学技术有限公司自制雾化吸入箱30CM40CM50CM。方法细菌灭活将菌种进行传代及培养后，用VITEK比浊仪测定细菌浓度，用终浓度为1的甲醛溶液灭菌，涂碟确定无活菌后置于80冰箱保存备用。出生后细菌抗原接种幼鼠40只，不分雌雄，随机分为5组即107、106、105细菌抗原组A，B，C组、哮精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/7喘组D组、对照组E组，每组8只。细菌抗原组大鼠于出生后第1、3、5、7天分别于鼻咽部给予107、106、105灭活肺炎链球菌及流感嗜血杆菌混合液10L，哮喘组和对照组则给予PBS10L。哮喘模型制备大鼠饲养至成年约6周龄，A、B、C、D组大鼠分别于双侧鼠蹊部皮下注射卵蛋白OVAGGRADEV和氢氧化铝凝胶混悬液共1ML含OVA1MG和氢氧化铝50MG，同时腹腔注射百日咳杆菌菌苗5109/ML1ML致敏，2周后，将大鼠置于自制半透明雾化吸入箱中，用2OVAGRADE雾化吸入激发，30MIN/次，连续7D,30MIN/次。E组大鼠则于双侧鼠蹊部皮下注射氢氧化铝凝胶混悬液1ML含氢氧化铝50MG，同时腹腔注射氯化钠溶液1ML致敏，2周后，使用氯化钠溶液雾化吸入激发。最后一次激发24H内采集标本。腹主动脉取血，分离血清，80冰箱保存备用。血清IL4和IFN测定采用ELISA法，IL4、IFN的检测按试剂盒说明进行。统计学分析应用SPSS统计软件，计量资料以XS表示，采用单因素方差分析方法，组间两两比较方差齐时采用方差分析最小显著法，如方差不齐，则采用近似方差分析TAMHANEST2方法，P2结果精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/7A、B组大鼠血清中IFN水平与D、E组比较明显下降，差异有统计学意义P3讨论支气管哮喘是世界范围内的常见病，影响着全球约3亿人的健康1，发病率呈逐年上升趋势2。关于哮喘发病内在机制的研究发现，CD4T细胞TH两种亚型辅助性T淋巴细胞1TH1、辅助性T淋巴细胞2TH2功能失衡是哮喘发病的重要机制3,4。IFN和IL4分别是TH1和TH2细胞的特征性细胞因子，通过检测这两种细胞因子可以了解TH1细胞和TH2细胞的功能状态5。骆文玲等6给新生SD大鼠皮下注射OVA，大鼠成年后检测其血清中IFN和IL4，发现哮喘组大鼠血清中IL4明显高于正常对照组，而IFN则显著下降。李光等7给WISTAR大鼠腹腔注射OVA，激发后检测哮喘组动物脾单个核细胞培养上清中IL4水平明显高于正常对照组，而IFN则显著降低。本实验结果显示，D组大鼠血清而IFN下降，存在TH2优势的TH1/TH2失衡早期接触细菌抗原的大鼠，血清IFN水平明显下降，而IL4与D组接近，使TH1/TH2失衡更为明显8。【参考文献】1李明华，殷凯生，蔡映云主编哮喘病学第2版北京人民卫生出版社，精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/72BONINIHYGIENEHYPOTHESISEPIDEMIOLOGICPEDIATRGASTROENTEROLNUTR,2005,40SUPPL137383拉杰哮喘发病机理及TH1/TH2比例的关系天津医科大学学报，2002,84034064RENZH，BLUMERN，VIRNASS，ETIMMUNOLOGICALBASISOFTHEHYGIENEIMMUNOLALLERGY,2006,9130485FANGSP，TANAKAT，TAGOF，ETEFFECTSOFGYOKUHEIFUSANONIFNGAMMA/IL4TH1/TH2BALANCEINOVALBUMINOVAINDUCEDASTHMAMODELPHARMBULL,2005,288298336骆文玲，李海潮，郝洪军，等早期接触