妇产科学专业优秀论文 子痫前期胎盘组织相关蛋白的研究

妇产科学专业优秀论文子痫前期胎盘组织相关蛋白的研究关键词子痫前期妊娠高血压血清蛋白质组学抗体蛋白免疫耐受双向凝胶电泳早期诊断摘要子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。正文内容子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通过比较重度子痫前期患者和正常妊娠胎盘组织的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，同时寻找子痫前期血清中的标志蛋白，为实现子痫前期的早期诊断提供依据。目的探讨重度子痫前期和正常妊娠的胎盘组织差异蛋白，筛选出子痫前期胎盘相关蛋白。此外，在血清中寻找与子痫前期胎盘抗原相关的抗体蛋白，进一步检测子痫前期母体外周血中抗体蛋白浓度的变化，为发现特异性标记物提供线索。方法1收集子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织标本，提取胎盘总蛋白，双向凝胶电泳的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胎盘组织总蛋白质成份，然后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过PDQUEST74双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，并通过统计学分析方法评价双向凝胶电泳结果。2通过比较子痫前期患者、正常孕妇胎盘组织的双向电泳图谱，筛选出有差异的蛋白质点进行胶内胰蛋白酶解，经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）分析肽质量指纹图谱，数据库搜索鉴定蛋白质。应用生物信息学技术对差异蛋白进行结构和生物学功能分析和预测。3将双向电泳提取的子痫前期胎盘组织总蛋白转移至PVDF膜上，分别以患者的血清和正常孕妇的血清进行免疫印迹杂交，找出差异反应蛋白质点，筛选出可能引起子痫前期孕妇机体抗原抗体反应的胎盘抗原，经过质谱鉴定出蛋白名称，在大样本的子痫前期患者和正常孕妇的血清标本中应用ELISA方法进行抗体蛋白表达水平的检测。结果1获得了图像清晰、重复性好的双向电泳图凝胶。2与正常妊娠相比，子痫前期患者胎盘组织丰度差异表达相差2倍以上并经STUDENT39STTEST检验差异有统计学意义的蛋白质点有18个（PLT005），其中12个点在子痫前期组表达上调，另6个点表达下调。3质谱鉴定出14个差异蛋白质点，在子痫前期胎盘中上调的蛋白包括纤维蛋白原链、维生素D结合蛋白、肾小管间质性肾炎抗原样前体蛋白、纤维蛋白原链前体、1抗胰蛋白酶前体、膜联蛋白A1、烯醇酶、型细胞骨架蛋白9、型细胞骨架蛋白1。下调的蛋白包括真核翻译起始因子5A1、铁蛋白轻链、突变子2、ATP合酶亚单位、雌二醇17脱氢酶1。4免疫印迹技术证实子痫前期患者体内存在抗原抗体反应，对应双向电泳凝胶图找到了胎盘相关抗原位置。5通过胶内酶解消化，质谱分析获得了各个蛋白点的肽谱图和肽段氨基酸序列，经过数据库检索分析后，鉴定出3个胎盘抗原蛋白。子痫前期患者血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9抗体。6子痫前期患者和正常孕妇的血清中纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体蛋白表达水平增加，与蛋白质组学结果基本一致。结论1子痫前期胎盘组织与正常妊娠胎盘组织存在蛋白表达差异，差异蛋白分别涉及炎症、血栓形成、参与糖酵解的酶类、分子伴侣、信号转导蛋白、细胞骨架蛋白、细胞存活和增殖、凋亡调控蛋白，以及参与细胞内物质转运和能量代谢的酶等。2子痫前期发生发展过程中，血清中存在纤维蛋白原蛋白链抗体、热休克蛋白70抗体、线粒体核糖体蛋白的可溶性结构蛋白或抗角蛋白9的抗体。3血清中纤维蛋白原链抗体、热休克蛋白70抗体可能在子痫前期病理过程中起重要作用，有望成为子痫前期标记物候选指标。子痫前期（PREECLAMPSIA）是妊娠期特有的疾病，为妊娠期高血压疾病的最常见类型，也是导致孕产妇死亡和婴儿病率及死亡率的重要原因之一。目前仍然没有理想的标志物早期诊断子痫前期，且具体的发病机制仍未阐明。蛋白质组学是近年来发展的新技术，主要包含蛋白质分离、蛋白质鉴定和生物信息学三大部分，具有高通量和高灵敏度等优点。胎盘是子痫前期发生的关键环节，直接与子宫蜕膜接触，参与母胎免疫耐受形成及维持妊娠。为进一步阐明子痫前期的发病机制和寻找该病的蛋白标志物，本实验利用蛋白质组学技术，通