GB 5009.120-2016 食品安全国家标准 食品中丙酸钠、丙酸钙的测定

中华人民共和国国家标准GB50091202016食品安全国家标准食品中丙酸钠、丙酸钙的测定20160831发布20160920实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB50091202016前言本标准代替GB/T50091202003食品中丙酸钠、丙酸钙的测定、GB/T233822009食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法。本标准与GB/T50091202003相比,主要变化如下标准名称修改为“食品安全国家标准食品中丙酸钠、丙酸钙的测定”增加了液相色谱法气相色谱柱由填充柱改为毛细管柱,色谱条件也相应变动。GB500912020161食品安全国家标准食品中丙酸钠、丙酸钙的测定1范围本标准规定了豆类制品、生湿面制品、面包、糕点、醋、酱油中丙酸钠、丙酸钙的测定方法。本标准适用于豆类制品、生湿面制品、面包、糕点、醋、酱油中丙酸钠、丙酸钙的测定。第一法液相色谱法2原理试样中的丙酸盐通过酸化转化为丙酸,经超声波水浴提取或水蒸汽蒸馏,收集后调PH,经高效液相色谱测定,外标法定量其中丙酸的含量。样品中的丙酸钠和丙酸钙以丙酸计,需要时可根据相应参数分别计算丙酸钠和丙酸钙的含量。3试剂与材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。31试剂311磷酸H3PO4。312磷酸氢二铵NH42HPO4。313硅油。32试剂配制321磷酸溶液1MOL/L在50ML水中加入535ML磷酸,混匀后,加水定容至1000ML。322磷酸氢二铵溶液15G/L称取磷酸氢二铵15G,加水溶解定容至1000ML。33标准品331丙酸标准品C3H6O2,CAS79094,纯度970。332丙酸标准贮备液10MG/ML精确称取2500MG丙酸标准品于25ML容量瓶中,加水至刻度,4冰箱中保存,有效期为6个月。4仪器和设备41高效液相色谱HPLC仪配有紫外检测器或二极管阵列检测器。42天平感量00001G和001G。43超声波水浴。GB50091202016244离心机转速不低于4000R/MIN。45组织捣碎机。46具塞塑料离心管50ML。47水蒸汽蒸馏装置500ML。48鼓风干燥箱。49PH计。5分析步骤51样品制备固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用面包样品需运用鼓风干燥箱,37下干燥2H3H进行风干,置于组织捣碎机中磨碎液体样品摇匀后备用。52试样处理521蒸馏法适用于豆类制品、生湿面制品、醋、酱油等样品样品均质后,准确称取25G精确至001G,置于500ML蒸馏瓶中,加入100ML水,再用50ML水冲洗容器,转移到蒸馏瓶中,加1MOL/L磷酸溶液20ML,2滴3滴硅油,进行水蒸气蒸馏,将250ML容量瓶置于冰浴中作为吸收液装置,待蒸馏至约240ML时取出,在室温下放置30MIN,用1MOL/L磷酸溶液调PH为3左右,加水定容至刻度,摇匀,经045M微孔滤膜过滤后,待液相色谱测定。522直接浸提法适用于面包、糕点准确称取5G精确至001G试样至100ML烧杯中,加水20ML,加入1MOL/L磷酸溶液05ML,混匀,经超声浸提10MIN后,用1MOL/L磷酸溶液调PH为3左右,转移试样至50ML容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。将试样全部转移至50ML具塞塑料离心管中,以不低于4000R/MIN离心10MIN,取上清液,经045M微孔滤膜过滤后,待液相色谱测定。6仪器参考条件61色谱柱C18柱,46MM250MM,5M或等效色谱柱。62流动相15G/L磷酸氢二铵溶液,用1MOL/L磷酸溶液调PH为2735使用时配制经045M微孔滤膜过滤。63流速10ML/MIN。64柱温25。65进样量20L。66波长214NM。67色谱柱清洗参考条件实验结束后,用10甲醇清洗1H,再用100甲醇清洗1H。7标准曲线绘制71蒸馏法准确吸取标准储备液05ML、10ML、25ML、50ML、75ML、100ML、125ML置于500ML蒸馏瓶中,其他操作同521样品前处理,其丙酸标准溶液的最终浓度分别为002MG/ML、004MG/ML、01MG/ML、02MG/ML、03MG/ML、04MG/ML、05MG/ML,经045M微孔滤膜过滤,浓度由低到高进样,以浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。72直接浸提法准确吸取50ML标准储备液于50ML容量瓶中,用水稀释至刻度,配制成浓度为GB50091202016310MG/ML标准工作液。再准确吸取标准工作液02ML、05ML、10ML、20ML、30ML、40ML、50ML至10ML容量瓶中,分别加入1MOL/L磷酸02ML,用水定容至10ML,混匀。其丙酸标准溶液的最终浓度分别为002MG/ML、005MG/ML、01MG/ML、02MG/ML、03MG/ML、04MG/ML、05MG/ML,经045M微孔滤膜过滤,浓度由低到高进样,以浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。8试样溶液的测定处理后的样液同标准系列同样进机测试。根据标准曲线计算样品中的丙酸浓度。平行测定次数不少于两次。待测样液中丙酸响应值应在标准曲线线性范围内,超出浓度线性范围则应稀释后再进样分析。9分析结果的表述样品中丙酸钠钙含量以丙酸计,按式1计算XCV1000M1000F1式中X样品中丙酸钠钙含量以丙酸计,单位为克每千克G/KGC由标准曲线得出的样液中丙酸的浓度,单位为毫克每毫升MG/MLV样液最后定容体积,单位为毫升MLM样品质量,单位为克GF稀释倍数。试样中测得的丙酸含量乘以换算系数12967,即得丙酸钠的含量试样中测得的丙酸含量乘以换算系数12569,即得丙酸钙含量。计算结果保留三位有效数字。10精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。11其他取样为25G,定容体积为250ML时,丙酸的检出限为003G/KG,定量限为010G/KG。第二法气相色谱法12原理试样中的丙酸盐通过酸化转化为丙酸,经水蒸气蒸馏收集后直接进气相色谱,用氢火焰离子化检测器检测,以保留时间定性,外标法定量其中丙酸的含量。样品中的丙酸钠和丙酸钙以丙酸计,需要时,可根据相应参数分别计算丙酸钠和丙酸钙的含量。GB50091202016413试剂和材料注除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。131试剂1311磷酸H3PO4。1312甲酸CH2O2。1313硅油。132试剂配制1321磷酸溶液1090取10ML磷酸加水至100ML。1322甲酸溶液298取1ML甲酸加水至50ML。133标准品丙酸标准品C3H6O2,CAS79094,纯度970。134标准溶液配制1341丙酸标准贮备液10MG/ML精确称取2500MG丙酸标准品于25ML容量瓶中,加水至刻度,4冰箱中保存,有效期为6个月。1342丙酸标准使用液将储备液用水稀释成10G/ML250G/ML的标准系列,临用现配。14仪器和设备141气相色谱仪带氢火焰离子化检测器。142天平感量为00001G和感量为001G。143水蒸气蒸馏装置。144鼓风干燥箱。15分析步骤151样品制备同51。152试样处理样品均质后,准确称取25G,面包样品需运用鼓风干燥箱,37下干燥2H3H进行风干,置于研钵中磨碎,置于500ML蒸馏瓶中,加入100ML水,再用50ML水冲洗容器,转移到蒸馏瓶中,加10ML磷酸溶液,2滴3滴硅油,进行水蒸气蒸馏,蒸馏速度为2滴/S3滴/S,将250ML容量瓶置于冰浴中作为吸收液装置,待蒸馏近250ML时取出,在室温下放置30MIN,加水至刻度。混匀,供气相色谱分析用。153仪器参考条件1531色谱柱聚乙二醇PEG石英毛细管柱,柱长30M,内径025MM,膜厚度05M或同等性能GB500912020165的色谱柱。1532载气氮气,纯度9999。1533载气流速1ML/MIN。1534进样口温度250。1535分流比101。1536检测器温度250。1537柱温箱温度125保持5MIN,然后以15/MIN的速率升到180,保持3MIN。1538进样量1L。154标准曲线的制作取标准系列中各种浓度的标准使用液10ML,加05ML甲酸溶液,混匀。将其分别注入气相色谱仪中,测定相应的峰面积或峰高,以标准工作液的浓度为横坐标,以响应值峰面积或峰高为纵坐标,绘制标准曲线。155试样溶液的测定吸取10ML制备的试样溶液151于试管中,加入05ML甲酸溶液,混匀,同标准系列同样进机测试。根据标准曲线计算样品中的丙酸浓度。平行测定次数不少于两次。16分析结果的表述样品中丙酸钠钙含量以丙酸计,按式2计算XCMV10002式中X样品中丙酸钠钙含量以丙酸计,单位为克每千克G/KGC由标准曲线得出的样液中丙酸的浓度,单位为微克每毫升G/MLM样品质量,单位为克GV样液最终定容体积,单位为毫升ML1000G/G换算至G/KG的系数。试样中测得的丙酸含量乘以换算系数12967,即得丙酸钠的含量试样中测得的丙酸含量乘以换算系数12569,即得丙酸钙含量。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。17精密度在重复