丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定方法操作规程

1、包头文治医院- 1 - 丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程 【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法） 【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。 【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。 L-丙氨酸+-酮戊二酸 ALT 丙酮酸+ L-谷氨酸 丙酮酸+NADH+H+ LDH L-乳酸+NAD+H2O 【主要组成成份】 R1： Tris缓冲液 150

2、mmol/L L-丙氨酸 750 mmol/L 乳酸脱氢酶（LDH） ?1200U/L NADH 0.4mmol/L R2： -酮戊二酸 90mmol/L NADH 0.9mmol/L * 不同批号试剂盒各组分请勿混用。 【储存条件与有效期】 未开启的试剂盒在 28保存有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存，在28可稳定28天。试剂不可冰冻。 【适用仪器】 迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。

3、若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。 【样本要求】 新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。 【检验方法】 试剂准备 R1：即用液体试剂 R2：即用液体试剂 测定条件 波长 340nm 温度 37 分析类型 动力学法 反应方向 下降反应 操作步骤 空白/校准/样本 10ul R1 200ul 混匀，37孵育5min； R2 50ul 混匀，37孵育1min后，连续测定3min内的吸光度，计算吸光度变化率（A/min）。 * A/min=A/min 样本管 A/min 空白管 * 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求

4、按比例适当增减。 校准 校准品类型 包头文治医院- 2 - S1：生理盐水 S2：迈瑞配套校准品 推荐进行2点线性校准 校准周期和要求（包括但不限于以下情况） 更换试剂批号时 仪器关键零部件更换时 室内质控失效时 质控 每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。 质控品测定值应该在规定的范围内。若超出规定范围，有必要采取相应的措施或联系生产厂家。 【参考范围】 女性：31U/L 男性：41U/L （注：各实验室应有自己的参考范围。） 【临床意义】：增高：急慢性肝炎，药物性肝损伤，脂肪肝，肝硬化，心梗，胆道疾病等 【检验结果的解释】 样本中酶活力超出线性范围，请用生理盐水

5、稀释后测定，结果乘以稀释倍数。反应曲线异常时应进行重复测试确认。 【检验方法的局限性】 30mg/dl以下浓度的抗坏血酸对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 500mg/dl以下浓度的血红蛋白对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 40 mg/dl以下浓度的胆红素对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 500mg/dl以下浓度的内源性酯对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 【产品性能指标】 线性范围：本试剂盒线性范围为 41000U/L。 精密度：重复性：变异系数3.5 批间差：相对偏差5.0 分析灵敏度：浓度为30U/L时，吸光度变化率0.005A/min。 试剂空白：试剂以水为空白在3

6、71，340nm波长条件下，吸光度0.5A，吸光度变化率0.0010A/min。 注意事项】 1、本产品仅用于体外诊断测试。 2、使用前请认真阅读提供的说明书，按照说明书的使用方法正确使用。 3、使用试剂时应采取必要的预防措施，切勿吞服，避免与皮肤及黏膜接触。 4、请在产品有效期内使用，不同批号的试剂请勿混用。建议用户使用后及时盖上瓶盖。 5、按照国家和地方相关法律规定处理所有已测定的样本和废液。 包头文治医院- 3 - 天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定方法操作程序 【产品名称】通用名称：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒（IFCC法） 【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量

7、测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活力。 【检验原理】在AST催化下，从天门冬氨酸转移氨基到-酮戊二酸，生成产物L-谷氨酸和草酰乙酸。草酰乙酸通过苹果酸脱氢酶催化下生成苹果酸，在340nm波长条件下测定到NADH吸光度的变化率，与AST的活力成比例。 L天门冬氨酸+-酮戊二酸 AST 草酰乙酸+ L-谷氨酸 草酰乙酸+NADH+H+ MDH L-苹果酸+NAD+H2O 【主要组成成份】 R1： Tris缓冲液 100mmol/L L-天门冬氨酸 300 mmol/L 苹果酸脱氢酶（MDH） ?600U/L 乳酸脱氢酶 ?900U/L NADH 0.4mmol/L R2： -酮戊二酸

8、60mmol/L NADH 0.9mmol/L * 不同批号试剂盒各组分请勿混用。 【储存条件与有效期】 未开启的试剂盒在 28保存有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存，在28可稳定28天。试剂不可冰冻。 【适用仪器】 迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。 【样本要求】 新鲜血清，采集后及

9、时测定，应避免污染和溶血。样本3天内的活性损失：（28保存）8%；（1525保存）150KU/L 胆固醇氧化酶（CHO） 100KU/L 过氧化物酶（POD） 5KU/L 校准品：胆固醇溶液。 * 不同批号试剂盒各组分请勿混用。 【储存条件与有效期】 未开启的试剂盒在 28保存有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存，在28可稳定28天。试剂不可冰冻。校准品避光保存于28保存有效期为一年。 【适用仪器】 迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析

10、仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。 【样本要求】 新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。 【检验方法】 试剂准备 R：即用液体试剂 测定条件 波长 500nm 温度 37 分析类型 终点法 反应方向 上升反应 操作步骤 空白/校准/样本 3ul R 300ul 混匀，37孵育5min；测定吸光度A。 包头文治医院- 18 - * A=A校准品或 样本管 A空白管 * 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。 校准 校准品类型 S1：生理盐水 S2：迈瑞配

11、套校准品 推荐进行2点线性校准 校准周期和要求（包括但不限于以下情况） 更换试剂批号时 仪器关键零部件更换时 室内质控失效时 质控 每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。 质控品测定值应该在规定的范围内。若超出规定范围，有必要采取相应的措施或联系生产厂家。 【参考范围】 合适范围： 5.6mmol/L 高度危险临界值： 5.66.6 mmol/L 高度危险范围： 6.6 mmol/L （注：各实验室应有自己的参考范围。） 【临床意义】：脂肪肝，高脂蛋白血症及异常脂蛋白血症的诊断及分类；心、脑血管病危险因素的判断。 增高：动脉粥样硬化、糖尿病、甲状腺功能低下、阻塞性黄

12、疸及肾病性综合症等。 降低：甲状腺机能亢进、严重贫血、急性感染及消耗性疾病； 【检验结果的解释】 样本中酶活力超出线性范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。反应曲线异常时应进行重复测试确认。 【检验方法的局限性】 500mg/dl以下浓度的血红蛋白对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 500mg/dl以下浓度的内源性酯对试剂检测结果的偏差影响在10%以内； 【产品性能指标】 线性范围：本试剂盒线性范围为 0.120.0 mmol/L。 精密度：重复性：变异系数3.0 批间差：相对偏差4.0 分析灵敏度：浓度为5.5 mmol/L时，吸光度变化率0.4A/min。 试剂空白：试剂以水

13、为空白在371，500nm波长条件下，吸光度0.3A。 【注意事项】 1、本产品仅用于体外诊断测试。 2、使用前请认真阅读提供的说明书，按照说明书的使用方法正确使用。 3、使用试剂时应采取必要的预防措施，切勿吞服，避免与皮肤及黏膜接触。 4、请在产品有效期内使用，不同批号的试剂请勿混用。建议用户使用后及时盖上瓶盖。 5、按照国家和地方相关法律规定处理所有已测定的样本和废液。 包头文治医院- 19 - 甘油三酯（TG）测定方法操作规程 【产品名称】通用名称：甘油三酯（TC）测定试剂盒（氧化酶法）使用说明书 【预期用途】该试剂盒采用氧化酶法，用于体外定量测定人血清中甘油三酯的含量。 【检验原理】在

14、脂蛋白酯酶(Lipase)、甘油激酶（GK）和甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）等一系列酶的作用下，甘油三酯被催化产生过氧化氢。过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与4-氨基安替比林（4-APP）和酚类缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得甘油三酯的含量。 甘油三酯+3H2O Lipases 甘油+脂肪酸 甘油+ATP GK 甘油-3-磷酸+ADP 甘油-3-磷酸+O2 GPO 二羟丙酮磷酸+H2O2 H2O2+4-氨基安替比林+4-氯酚 POD 醌亚胺+HCL+2H2O 【主要组成成份】 R： 磷酸盐缓冲液 50 mmol/L 4-氯酚 5 mmol/L ATP 2 mmol/L 镁离子 4.5 mmol/L 4-氨基安替比林（4-AAP） 0.25 mmol/L 甘油激酶（GK） ?0.4 U/mL 过氧化物酶（POD） ?0.5 U/mL 脂蛋白酯酶(Lipase) ?1.3 U/mL 甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）?1.5 U/mL 校准品：甘油三酯溶液。 * 不同批号试剂盒各组分请勿混用。 【储存条件与有效期】 未开启的试剂盒在 28保存有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存，在28可稳21天。试剂不可冻存。校准品避光保存于28，有效期为一年。