2013药物分析考试重点

1、2013药物分析考试重点（最新版） 绪论 1药品：用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证或者功能主治，用法用量的物质，是广大人民群众防病治病，保护健康必不可少的特殊商品。 2.药物分析是一门研究和发展药品全面质量控制的学科，运用物理学，化学，物理化学，生物学及微生物学的分析方法，研究化学结构明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法及中药制剂和生物制品及其制剂有代表性的质量控制方法。 3.国家药品质量标准是由国家食品药品监督管理局颁布的中华人民共和国药典和药品标准。 4.中华人民共和国药典Ch.p；美国药典（USP）；美国国家处方集（NF）；英国药典（BP）;

2、日本药局方（JP）；欧洲药典（Ph.Eur）；国际药典（Ph.Int）； 5.药品非临床研究质量管理规定（GLP）；药品生产质量管理规范（GMP）；药品经营质量管理规范（GLP）；药品临床试验质量管理规范（GCP）；分析质量管理（AQC） 第一章 1.中国药典（2005年版）分为一部、二部、三部，一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂、单味制剂等。二部分为两部分，第一部分收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品，第二部分收载药用辅料。三部收载生物制品。 2.中国药典的内容 A凡例：解释和正确使用中国药典进行质量检定的基本原则，并把与正文品种、附录及质量检定有关的共性问题加以规定，避免

3、在全书中重复说明。B正文：为所收载药品或制剂的质量标准 C附录：包括制剂通则、通用检测方法、指导原则 D索引：中文、英文 3.中国药典设计原则：使用安全、疗效可靠、工艺合理、质量可控、标准完善 4.药品检验工作的基本程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告 5.国家食品药品监督管理局领导下的国家级药品检验机构是中国药品生物制品检定所。 6.标准品与对照品均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。标准品指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位计，以国际标准品进行标定；对照品除另有规定外，均按干燥品进行计算。 第三章 1.杂质限量：药物中所含杂质的最

4、大允许量，通常用百分之几或百万分之几来表示。P41 控制方法：限量检查法（ 对照法、灵敏度法、比较法）；定量测定法 2.一般杂质检查的方法 A氯化物检查法： 原理：药物中微量氯化物在硝酸酸性条件下，与硝酸银反应，生成氯化银白色胶体微粒。 方法：对照法（目视比浊），黑色背景下，自上向下 条件：硝酸（避免弱酸银盐的干扰，也可加速氯化银沉淀的生成）酸度以50ml供试液中含硝酸10ml为宜。 供试品处理：供试品不澄明，用含有硝酸的蒸馏水洗净滤纸中氯化物后过滤；供试品有色，使用内消色法解决。 B硫酸盐检查法 原理：药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡白色浑浊。 方法：目视比浊。

5、条件：盐酸（防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀生成影响比浊），50ml供试品中含2ml稀盐酸。 C铁盐检查法 原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐与作用生成红色可溶性硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色方法：硫氰酸盐法（Chp、USP） BP采用巯基醋酸法 条件：盐酸（防止三价铁离子水解），50ml含稀盐酸4ml为宜 标准溶液：硫酸铁胺，并加入硫酸防止铁盐水解，50ml溶液中含10-50ug三价铁离子 氧化剂：过硫酸铵（氧化二价铁离子成三价铁离子，防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色） D重金属检查法 a硫代乙酰胺法，适用于溶于水，稀酸和乙醇的药物。原理是硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解，

6、产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液。 b炽灼后的硫代乙酰胺法，适用于含芳环，杂环及难溶于水，稀酸及乙醇的有机药物。 c硫化钠法，适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物。 d微孔滤膜法，适用于重金属限量低的药物。 E砷盐检查法 a古蔡氏法：原理金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑； b白田道夫法 c二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag（DDC）法） F溶液颜色检查法 G易炭化物检查法 H溶液澄清度检查法 I炽灼残渣检查法 J干燥失重测定法：常压恒温干燥法；减压干燥法语恒温减压干燥 法；干燥剂干

7、燥法；热分析法（热重分析TGA、差热分析DTA、差示扫描量热法DSC） K水分测定法:费休氏法，甲苯法； L残留溶剂测定法：气相色谱法（GC），可采用填充柱，也可采用毛 细管柱。 3.恒重：供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0.3mg以下即达到恒重，干燥至恒重的第二次及以后各次称重均在规定的条件下继续干燥1小时后进行。 4.特殊杂质的检查法 A色谱分析法 a薄层色谱法（TLC）： 杂质对照品法，适于已知杂质并能制备得到的杂质对照品的情况。 供试品溶液自身稀释对照法，适于杂质的结构不能确定，或无杂质对照品的情况，仅限于杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近的情况下使用。 杂质对照品法与供试

8、品溶液自身稀释对照法并用。 对照药物法 b高效液相色谱法：同时进行定性鉴别、杂质检查和含量测定。 内标法加校正因子测定法 外标法 峰面积归一化法 c气相色谱法 B光谱分析法：紫外、红外、原子吸收分光光度法 C化学分析法 D物理分析法 第四章 1.氧瓶燃烧法：1）指将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构部分彻底分解为二氧化碳和水，而待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物，被吸收于适当的吸收液中，在根据其性质和存在形式采用适宜的方法进行分析；2）适用于含卤素或硫、磷等元素的有机药物的鉴别、限度检查和含量测定，同时亦可用于药物中杂质硒的检查；3）含氟药物一般

9、选用茜素氟蓝比色法检查氟含量，燃烧产物为单一氟化氢，可选用水作吸收液，应用石英制燃烧瓶；4）银量法测定含氯药物中氯的含量或进行氯的鉴别时，燃烧产物为单一的氯化氢，但氯化氢在水中溶解度较低，需用水-氢氧化钠液作为吸收液；5）银量法测定含溴药物时，分解产生的溴化氢可被氧气氧化成单质溴，故其燃烧产物为单质溴和溴化氢的混合物，可在水-氢氧化钠溶液构成的吸收液中加入还原剂二氧化硫饱和液，将单质溴还原为溴负离子。2.容量分析法（滴定法）：原料药含量测定的首选方法。P88 3.紫外可见分光光度法：p92 4.色谱系统使用性试验通常包括理论板数（n）、分离度（R）、重复性、拖尾因子。 5.药品分析方法的验证

10、A准确度：用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率表示。 B精密度：在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样所得结果之间接近的程度。 C专属性：在其他成分可能存在下采用的方法能准确测定出被测物的特性。 D检测限（LOD） E定量限（LOQ） F线性 G范围 H耐用性 6.生物样品分析方法中常用的样品种类：体液（血液、尿液、唾液）和组织。 7.蛋白质的去除方法：加入与水混溶的有机溶剂如甲醇、丙酮、四氢呋喃；加入中性盐如饱和硫酸铵、硫酸钠、镁盐、磷酸盐、枸橼酸盐；加入强酸如百分之十的三氯醋酸、65%高氯酸、5%偏磷酸；加入含锌盐及铜盐的沉淀剂如CuSO4-Na2WO4；酶

11、解法 第五章 1.巴比妥类药物的基本结构：母核巴比妥酸的环状丙二酰脲，决定巴比妥类药物的共性；取代基部分是此类药物的区别。P112 2.巴比妥类药物的主要性质 A弱酸性： B水解反应：1）巴比妥类药物的水解与碱液共沸即水解，释放出氨气，使红色石蕊试纸变蓝；2）巴比妥类药物的钠盐水解，在吸湿情况下发生水解，一般情况下在室温和PH10以下水解较慢，PH11以上随碱度的增加水解速度加快。 C与重金属离子的反应：1）与银盐的反应：结构中含有酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸盐溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀，用于本类药物的鉴别和含量

12、测定。2）与铜盐反应：巴比妥类要去在吡啶溶液中与铜吡啶试液反应，形成稳定的配位化合物，产生紫色或紫色沉淀；含硫巴比妥类药物则呈现绿色。3）与钴盐反应：药物在碱性溶液中无水条件下与钴盐生成紫堇色，常用溶剂有无水甲醇或乙醇，碱为异丙胺。4）与汞盐反应：与硝酸汞或氯化汞溶液反应得到白色汞盐沉淀，次沉淀在氨液中溶解。 D与香草醛反应：在浓硫酸存在条件下与香草醛发生缩合，生成棕红色产物。 E紫外吸收光谱特征：酸性溶液中无明显吸收；PH10碱性溶液中240nm处有最大吸收；PH13在255nm处最大吸收，但1,5,5-三取代巴比妥药物仍在240nm处有吸收，硫代巴比妥药物在酸性碱性液中均有吸收。 F薄层色

13、谱行为特征： G显微结晶 3.巴比妥类药物的鉴别实验： A丙二酰脲类的鉴别试验：银盐反应、铜盐反应 B测定熔点：巴比妥类的钠盐加酸得到游离巴比妥类药物沉淀，过滤，洗涤，干燥后测定。 C利用特殊取代基或元素的鉴别试验： a利用不饱和取代基的鉴别试验：司可巴比妥纳 与碘液的反应（药物加入碘液后显示棕黄色5分钟内消失）； 与高锰酸钾的反应（在碱性溶液中与高锰酸钾反应，将紫堇色的高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰）。 b利用芳环取代基的鉴别试验：苯巴比妥 硝化反应：与硝酸钾及硫酸共热，生成黄色硝基化合物 与硫酸-亚硝酸钠的反应：生成橙黄色产物并随即变为橙红色。 与甲醛-硫酸的反应：生成玫瑰红色产物。 c硫元

14、素反应：硫代巴比妥类化合物在氢氧化钠溶液中与铅离子反应生成白色沉淀，加热后，沉淀转变为黑色硫化铅。 D红外分光光度法 4.巴比妥类药物的含量测定： A银量法：Chp测定苯巴比妥及其钠盐，异戊巴比妥及其钠盐。反应摩尔比为1:1，溶剂系统为甲醇+3%的无水碳酸钠，终点指示使用电位指示（银-玻璃电极系统）自身指示法；操作简单，专属性强，但受到温度的影响较大，近终点反应慢，难以准确观察浑浊的出现。 B溴量法：凡在5位取代基中含有不饱和双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量的发生加成反应，ChP用于测定司可巴比妥原料药及其胶囊的测定。操作中需要注意防止溴和碘的逸失，并且要平行条件进行空白试验可以减少溴

15、和碘的逸失带来的误差。 C酸碱滴定度法：a在水-乙醇混合溶剂中的滴定：滴定时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行，以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。b在胶束水溶液中进行的滴定：是在有机表面活性剂的胶束水溶液中进行的滴定，用指示剂或电位法指示终点。常用的有机表面活性剂有溴化十六烷基三甲基苄胺（CTMC）、氯化四癸基二甲基苄胺（TDBA）c非水溶液滴定法：常用溶剂有二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷、无水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯、乙醇-三氯甲烷。常用滴定液有甲醇钠的甲醇或乙醇液、氢氧化四丁基胺的氯苯溶液。常用指示剂为麝香草酚蓝，也可用玻璃-甘汞电极以电位法指示终点。D紫外分光光度法：a直接测定的

16、紫外分光光度法，ChP用于测定注射用硫喷妥纳的含量。b提取分离后的紫外分光光度法 E高效液相色谱法 F电泳法 G气相色谱-质谱法 第六章芳酸及其酯类药物分析 1.苯甲酸类：苯甲酸性质：溶解性（均为固体，有一定熔点，除钠盐溶于水，其余不溶）；UV和IR光谱特性（分子结构中具有苯环）；酸性（羧基直接与苯环相连）；具有酚羟基的特性（苯甲酸及其钠盐的中性溶液与三氯化铁试剂反应，生成赫色沉淀；含硫的丙磺舒受热可分解生成亚硫酸盐）； 2.水杨酸类（水杨酸、阿司匹林、对氨基水杨酸钠）具有酸性；溶解性；UV和IR光谱特性；芳伯氨基和酚羟基特性；水解特性 3.其他芳酸：水中不溶，有机溶剂中溶，氯贝丁酯为液体，布

17、洛芬为固体，有一定的熔点。 4.鉴别试验 A与铁盐反应：a直接反应：水杨酸在中性或弱酸性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物；苯甲酸与三氯化铁反应得到褐色沉淀。b水解或分解后于三氯化铁反应：阿司匹林水解后与其反应呈紫堇色；丙磺舒加入氢氧化钠使生成钠盐溶解后，与其反应得到米黄色铁盐沉淀；布洛芬加入高氯酸羟胺的无水乙醇溶液及N，N-双环乙基羧二亚胺（DDC）的无水乙醇液，混合显紫色。 B重氮化偶合反应：凡在分子结构中含有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基均可反应；如贝诺酯具潜在的芳伯氨基，加酸水解后产生游离的芳伯氨基，在酸性结构中与亚硝酸钠试液进行重氮化偶合反应，生成重氮盐，再与碱性-萘酚偶合

18、生成橙红色沉淀。 C氧化反应：甲酚酸钠的硫酸溶液，加热后显黄色并有绿色荧光；加入重铬酸钾试液呈深蓝色，随即变为棕绿色。 D水解反应：a阿司匹林与碳酸钠试液加热水解得到水杨酸钠及醋酸钠，加过量的稀硫酸酸化后，生成白色水杨酸沉淀，有醋酸臭气，熔点为156-161摄氏度；b双水杨酯为水杨酰水杨酸酯，与氢氧化钠煮沸，水解生成水杨酸盐，加稀酸酸化，析出白色水杨酸沉淀。 E分解产物的反应：a苯甲酸盐分解成苯甲酸升华物，用于鉴别。b含硫药物如丙磺舒高温加热，发生二氧化硫的特臭，与氢氧化钠共熔融，可分解为亚硫酸钠，经硝酸氧化成硫酸盐，显硫酸盐反应。 F紫外分光光度法 G红外 H薄层色谱法 I高效液相色谱法：鉴

19、别阿司匹林肠溶胶囊与泡腾片（ChP） 5.特殊杂质的检查 A阿司匹林中特殊杂质的检查：a溶液的澄清度：检查碳酸钠试液中不容物，包括苯酚，醋酸苯酯，水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯。b水杨酸，原理是利用水杨酸可在弱酸性溶液中与高铁盐反应呈紫堇色，用比色法检查。c易炭化物，检查易被硫酸炭化呈色的低分子有机杂质。采用与标准溶液比色的方法。 B对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查：主要检查成品药物中可能残留的间氨基氛，由于其易氧化呈色，且有毒性，故需要严格控制。测定方法有a双相滴定法，原理是利用间氨基酚易溶于乙醚，而对氨基水杨酸不溶于乙醚的特性，用乙醚提取分离杂质后，乙醚提取液中加入适量水和指示剂后，用盐酸滴定液

20、滴定，以消耗一定量盐酸滴定液来控制其限量；b高效液相色谱法，采用内标法，以磺胺作内标。 C二氟尼柳中有关物质的检查：产品中可能存在多种苯或联苯类合成中间体及副产物，他们的结构与性质相差较大，故而采用正相TLC和反相HPLC色谱法，以自身对照法检查有关物质A和B。 D甲芬那酸中特殊杂质的检查：a“铜”检查法，用原子吸收分光光度法测定，铜含量限度为0.001%；b有关物质2000版药典采用TLC法，05版药典采用高效液相色谱法。 E氯贝丁酯中特殊杂质检查：成品中常有微量对氯酚存在，所以采用气相色谱法检查； 6.含量测定： A酸碱滴定法1）直接滴定法，含羧基药物测定通法，在中性乙醇中，以酚酞为指示剂

21、，摩尔比为1:1，可用于阿司匹林、苯甲酸、丙磺舒、水杨酸、二氟尼柳、双水杨酯、布洛芬的含量测定；注意二氟尼柳在甲醇中溶解度较大，故以甲醇-水为溶剂，酚红为指示剂，用氢氧化钠直接滴定，并将滴定结果用空白试验校正；甲酚那酸的测定采用温热无水中性乙醇为溶剂，以酚黄肽为指示剂；2）水解后剩余滴定法，原理是利用阿司匹林酯结构在碱性溶液中易于水解的特性，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯键水解，剩余的氢氧化钠滴定液用硫酸滴定液回滴定P147。3）两步滴定法，a阿司匹林片含量测定，中和（供试品中共存的各种酸，以消除杂质酸的干扰），水解与滴定，含量计算。B氯贝丁酯含量测定， B亚硝酸钠滴定法：对氨基水杨酸

22、钠具有芳伯氨基，能在盐酸存在下与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，使用永停滴定指示终点。 C双相滴定法：指在水相和有机相中的滴定，如苯甲酸钠的含量测定，生成的苯甲酸不溶于水，终点PH突跃不明显，不易观察，苯甲酸在乙醚中易溶，在水相中加入乙醚将滴定中产生的苯甲酸萃取入醚层，因此采用双相滴定可使反应完全终点明显。D紫外：a直接紫外分光光度法，丙磺舒片的测定，中国药典（2000版）采用此法，在盐酸溶液中，采用百分吸收系数法。b离子交换-紫外分光光度法。c柱分配色谱-紫外分光光度法 E高效液相色谱法，中国药典（2005版）采用此法测定阿司匹林肠溶胶囊、栓剂、泡腾片，布洛芬缓释胶囊、口服溶液、滴剂

23、、糖浆剂等的含量。 第七章芳香胺类药物 1.对氨基甲酸甲酯类：如盐酸普鲁卡因，具有芳伯氨基特性（显重氮化偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱反应；易氧化变色；盐酸丁卡因无此特性）。水解特性（受热、光、碱性条件影响）。弱碱性（与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应）。其他 2.酰胺类药物：如对乙酰氨基酚，具有水解后显芳伯氨基的特性。水解产物易酯化（对乙酰氨基酚和醋氨苯砜，水解后产生醋酸，可在硫酸介质中与乙醇反应，发出醋酸乙酯的香味）。酚羟基特性。弱碱性。与重金属离子发生沉淀反应。3酰胺类药物.鉴别试验： A重氮化偶合反应：直接发生反应的有苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、盐酸铺路卡因胺。水解后发生反

24、应的有对乙酰氨基酚、醋氨苯砜。盐酸丁卡因无此反应，但分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀。中国药典采用此法作为醋氨苯砜的定性鉴别方法之一。 B与三氯化铁反应：显蓝紫色 C与重金属离子反应：a盐酸利多卡因：在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，可以溶入三氯甲烷中显黄色（ChP2005）；在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀；水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞试液煮沸，显黄色（对氨基苯甲酸酯类药物加硝酸汞试液后显红色或橙黄色）。B盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法：结构中含芳酰胺基，被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸

25、铁。中国药典（2005版）。 D水解产物反应（ChP）：a盐酸普鲁卡因加氢氧化钠得到白色沉淀，加热，的油状物，继续加热的蒸汽使红色石蕊变蓝，热至油状物消失放冷加盐酸，得白色沉淀，可溶于过量盐酸。b苯佐卡因加氢氧化钠煮沸，加碘液加热得黄色沉淀，有碘仿的臭气。 E制备衍生物测定熔点；F紫外；G红外 4. 酰胺类药物含量测定： A亚硝酸钠滴定法：1）用于直接滴定的有苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺；用于水解后滴定的有醋氨苯砜。2）基本原理是芳伯氨基药物酸性溶液中与亚硝酸钠定量重氮化反应，得到重氮盐，永停滴定法指示终点。3）测定的主要条件：a加入适量溴化钾加快反应速度，原理是溴化钾与盐酸作用产生

26、溴化氢，溴化氢与亚硝酸作用生成NOBr，可以加快反应进程；b加入过量盐酸加速反应，这样有利于重氮化反应速度加快，有利于重氮盐在酸性溶液中稳定，可以防止生成偶氮氨基化合物影响测定结果。一般芳胺类药物与酸的摩尔比为1:2.5-6；c反应温度为10-30摄氏度；d滴定速度，先快后慢。4）指示终点的方法：电位法、永停滴定法（ChP）、外指示剂法、内指示剂法、B非水溶液滴定法：ChP采用此法测定盐酸丁卡因、盐酸利多卡因、盐酸妥卡尼、盐酸布比卡因的含量；1）将供试品溶于冰醋酸中，滴定前加入醋酸汞，生成氯化高汞以消除氢卤酸的干扰，用高氯酸滴定；2）前三者使用结晶紫为指示剂，盐酸布比卡因以萘酚苯甲醇为指示剂；

27、3）滴定盐酸丁卡因时，需要加入适量醋酐，以增强丁卡因的碱性，使滴定突跃敏锐；4）滴定颜色依次为蓝、绿、蓝绿、绿色。 C分光光度法：对乙酰氨基酚采用百分吸收系数法测定其原料，片剂，咀嚼片，注射液，栓剂，胶囊剂。（ChP） D高效液相色谱法 5.苯乙胺药物 A基本结构：具有苯乙胺，如肾上腺素 B主要性质：弱碱性；酚羟基特性（可与重金属离子配位呈色，露至空气中或遇光，热易氧化，色泽变深。）；具有光学活性或旋光性。 C特殊杂质检查：1）酮体检查：采用UV法检查，酮体310nm有吸收，药品无。2）有关物质检查：盐酸氨溴索采用高效液相色谱法，盐酸苯已双胍用纸色谱法，其他采用薄层色谱。D含量测定：1）非水溶

28、液滴定法：以冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液以消除氢卤酸干扰，用高氯酸滴定液滴定，以结晶紫指示终点；盐酸甲氧明以萘酚甲醇指示终点；硫酸特布他临和盐酸苯乙双胍以电位法指示终点。2）溴量法：用于测定盐酸去氧肾上腺素和重酒石酸间羟胺原料药；测定原理是分子中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量发生溴代反应，再以碘量法测定剩余溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算供试品的含量；3）提取酸碱滴定法；4）紫外；5）高效液相色谱法 第八章杂环类药物 1.吡啶类药物： A基本结构：含有氮杂原子不饱和六元单环 B典型药物：异烟肼、尼可刹米 C化学性质：1）吡啶环的特性：结构中含有或为被

29、羧基衍生物取代的吡啶环，可发生开环反应。2）弱碱性：Pka为8.8；3）还原性：与某些羰基化合物发生缩合反应。 D鉴别试验：1）吡啶环的开环反应，适于尼可刹米，异烟肼：a戊烯二醛反应，ChP只用于尼可刹米的鉴别，溴化氰与芳伯胺作用于吡啶环，使环上氮原子由3价变成价，吡啶环发生水解反应生成戊烯二醛，再与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物。b二硝基氯苯反应：在无水条件下，将吡啶及其某些衍生物与2,4-二硝基氯苯混合共热或使其热至熔融，冷却后，加醇制氢氧化钠钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。ChP用于烟酸的鉴别。2）酰肼基检查：a还原反应：异烟肼与氨制硝酸银试液反应，生成金属银黑色浑浊和气泡，并在玻

30、璃试管壁上产生银镜，异烟肼被氧化为异烟酸铵；异烟肼与亚硒酸作，可将其还原成红色硒的沉淀。b缩合反应：异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定熔点。（ChP）；3）二氢吡啶的解离反应：二氢吡啶类药物的丙酮或甲醇溶液与碱作用，二氢吡啶环1.4-位氢均可发生解离，形成p-共轭发生颜色变化。ChP用于硝苯地平和尼群地平的鉴别。4）沉淀反应：尼可刹米与硫酸铜及硫氰酸铵作用生成草绿色配位化合物；5）分解产物的反应：ChP采用此法鉴别尼可刹米，与氢氧化钠试液加热，有二乙胺臭味逸出，使湿润的红色石蕊试纸变蓝。6）紫外与红外； 2.喹啉类药物 A基本结构：含吡啶与苯稠合而成喹啉杂环，如硫酸奎宁； B化学性质：碱

31、性；旋光性；荧光特性； C鉴别试验;1)绿奎宁反应：基本机制是6-位含氧喹啉，经氯水氧化氯化，再以氨水处理缩合，生成绿色的二醌基亚胺。ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和奎尼丁；2）光谱特征：a紫外吸收光谱特征：ChP采用本法鉴别盐酸环丙沙星；b荧光光谱特征：硫酸奎宁和硫酸奎宁丁杂烯硫酸中显蓝色荧光，盐酸环丙沙星无荧光的特性；c红外吸收光谱特征：ChP对于硫酸奎宁和盐酸环丙沙星均采用此法。3）无机酸盐：硫酸奎宁与硫酸奎尼丁中的硫酸根，在酸性条件下与氯化钡反应生成白色沉淀；盐酸环丙沙星具盐酸根，在酸性条件下与硝酸银反应生成白色沉淀。 3.托烷类药物 A基本结构：莨菪烷衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的

32、生物碱。如硫酸阿托品 B鉴别试验：1）托烷生物碱类的鉴别试验（Vitaili反应）：结构中的酯键水解后生成的莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾醇溶液和固体氢氧化钾作用，转成有色的醌型产物，开始呈深紫色。2）氧化反应：药物水解后，生成的莨菪酸，与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下发生氧化反应，生成苯甲酸，逸出类似苦杏仁的臭味。3）沉淀反应：可与生物碱沉淀剂生成沉淀。如阿托品与氯化汞醇试液反应生成黄色沉淀；东莨菪碱与氯化汞醇试液反应，生成白色复盐沉淀。4）硫酸盐和溴化物的反应：硫酸阿托品的水溶液加氯化钡试液，即生成白色沉淀，在盐酸或硝酸中均不溶解；硫酸阿托品的水溶液加醋酸铅试液

33、，生成白色沉淀，在盐酸或硝酸中均溶解。氢溴酸东莨菪碱加硝酸银生成淡黄色凝乳沉淀，沉淀在氨试液中微溶，在硝酸中不溶，滴加氯试液，溴即游离，加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色。 4.吩噻嗪类药物 结构中含有硫氮杂蒽母核；理化性质有紫外和红外吸收光谱特征（紫外205nm，254nm，300nm；2位被卤素取代，红移5-10nm，250-265nm区段峰强度增大）。氧化呈色（二价硫易被氧化，母核被硫酸，硝酸氧化成亚砜，砜等）。与金属离子配合呈色（二价硫与钯离子产生有色配位化合物，氧化产物亚砜，砜等无此反应）。 5.含量测定 1）非水溶液滴定法： A非水溶剂：酸性溶剂（冰醋酸），碱性溶剂（二甲基甲

34、酰胺），两性溶剂（甲醇），惰性溶剂（甲苯、三氯甲烷、丙酮） B基本原理：尼可刹米、地西泮、氯氮zuo为游离碱，与高氯酸直接反应；盐酸环丙沙星、氢溴酸东莨菪碱和硫酸奎宁等盐类药物的高氯酸滴定过程为置换过程，即强酸置换出与有机弱碱结合的较弱的酸。 C适用范围：用于PKa 8的有机弱碱性药物及其盐类。 PKa 为8-10的以冰醋酸为溶剂；PKa 为10-12的以冰醋酸和醋酐为溶剂；PKa 12的以醋酐为溶剂； D有机弱碱盐类药物非水溶液滴定时被置换出的酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸 E终点指示法有电位滴定（玻璃电极指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）；高氯酸

35、滴定（指示剂为结晶紫，橙黄，萘酚苯甲醇，孔雀绿） F应用于：游离弱碱性药物的测定（尼可刹米与冰醋酸在结晶紫中显示蓝绿色；地西泮与冰醋酸加入醋酐在结晶紫中显示绿色；氯氮zuo与冰醋酸在结晶紫中显示蓝色）；卤素盐类药物的测定（药品加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，在用高氯酸滴定）；硫酸盐类药物测定（注意反应化学计量摩尔比：硫酸阿托品与高氯酸的比为1：1。硫酸奎宁与高氯酸的比为1：3.硫酸奎宁片与高氯酸的比为1：4）；硝酸盐的测定（使用电位滴定指示终点）；磷酸盐与有机酸盐使用常规法测定。 2）氧化还原滴定法： A铈量法a二氢吡啶类药物：ChP采用此法测定硝苯地平、尼群地平的含量，硝苯地平与硫酸铈反应摩尔比

36、为1：2，用邻二氮菲指示液指示终点，终点时，微过量的四价铈离子将指示液中的二价铁离子氧化成三价铁离子，使橙红色配合物离子转化为淡蓝色或无色的配合物离子，以指示终点的到达。b吩噻嗪类药物，使用硫酸铈滴定时，先失去一个电子形成一种红色的自由基离子，达到化学计量点，溶液中的吩噻嗪类药物均失去两个电子，而红色消退，以用药物自身颜色变化指示终点。 B溴酸钾法：ChP和BP中有此法进行异烟肼及其制剂的含量测定。异烟肼与溴酸钾反应的摩尔比为3：2，用甲基橙为指示液指示终点，终点时微过量的溴酸钾氧化甲基橙使其在酸性溶液中的粉红色消失，以指示终点的到达。 3）酸性染料比色法： A基本原理：在适当PH的水溶液中，

37、碱性药物B可与氢离子结合成阳离子，而一些酸性染料如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝可解离成阴离子，两只离子定量地结合，即生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，可以定量地被有机溶剂萃取，而在特征波长处测定有机相中有色离子对的吸光度，即可以进行碱性药物的含测。 B影响因素：a水相的PH（PH过低，抑制了酸性染料的解离，过高，有机碱药物呈游离状态，使离子对浓度过低）；b酸性染料及其浓度（选择的应该能够与有机碱性药物定量的结合，而且生成的离子对在有机相中的溶解度大，同时要求生成的离子对在其最大吸收波长处有较高的吸光度）；c有机溶剂的选择（选择对有机碱药物与酸性染料形成的离子对萃取效率高、能与离

38、子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂）；d水分的影响（水分的混入可能使有机相浑浊，影响比色测定准确性）；e酸性染料中的有色杂质（可将缓冲液与酸性染料的混合液先用所选用的有机溶剂萃取弃去） 4）分光光度法： A直接分光光度法：适用于纯度较高，无杂质或辅料干扰的原料及制剂的含量测定。盐酸氯丙嗪片需要在254nm处测定吸光度；而盐酸氯丙嗪注射液因为含有作为抗氧剂的维生素C防止氯丙嗪红色自由基氧化产物的生成，而有干扰，故选择在306nm处维生素无吸收的地方测定吸光度。5）高效液相色谱法：为解决拖尾问题，通常在流动相中加入含氮碱性竞争试剂-扫尾剂-抑制碱性药物与硅醇基作用造成的色谱峰拖尾。目前常用

39、的碱性试剂有醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈等。 第九章 1.维生素A： A鉴别试验：1）三氯化锑反应（Carr-Price反应）：维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中即显蓝色，渐变成紫红色。机制为维生素A与氯化锑中存在的亲电试剂氯化高锑作用形成不稳定的蓝色碳正离子。2）紫外：维生素A的无水乙醇溶液在326nm处有最大吸收峰，水浴后在348，367，389处有吸收，原因是维生素A含有5个共轭双键，其无水乙醇液在326nm波长处有最大吸收峰，在盐酸催化下加热，脱水为脱水维生素A，比原来的维生素A多一个共轭双键，最大吸收峰向长波长红移。3）薄层色谱法 B含量测定：1）紫外分光光度法（三点校正

40、法）：在三个波长处测得吸光度后，规定条件下以校正公式校正吸光度后，在计算。a原理：杂质无关吸收在310-340nm内呈一条直线，且随波长增大，吸光度下降；物质对光的吸收呈加和性，即某一样品的吸收曲线上，各波长处的吸光度是维生素A与杂质A的代数和。b波长的选择：一点选择在维生素A最大吸收波长处，另外两点选择在最大吸收波长的两侧。c测定方法：直接测定法，又称为等波长差法，适用于维生素A醋酸酯。皂化法，又称为等吸收比法，适用于维生素A醇。当第一法无法消除杂质干扰时用第二法。 2.维生素B1（盐酸硫胺）。 A鉴别试验：1）硫色素反应（ChP）：维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化成硫色素，硫色素溶

41、于正丁醇，显蓝色荧光。加酸荧光消失，加碱荧光重现。2）沉淀反应：与碘化汞钾生成淡黄色沉淀；与碘生成红色沉淀；与硅钨酸生成白色沉淀；与苦酮酸生成扇形白色结晶。3）氯化物反应。4）硝酸铅反应：与氢氧化钠共热，分解产生硫化钠，与硝酸铅生成黑色沉淀。 B含量测定：1）非水溶液滴定发：分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季胺基团，在非水溶液中醋酸汞存在的条件下与高氯酸（1：2）作用，以冰醋酸为溶剂，喹哪啶红-亚甲蓝为指示液，高氯酸滴定至30s内不褪的天蓝色。2）紫外： 3.维生素C A性质：还原性（含有烯二醇基，易被氧化为二酮基成为去氢抗坏血酸，加氢即可还原为抗坏血酸，在碱或强酸液中进一步水解为二酮古洛糖

42、酸而失活，反应不可逆。） B鉴别试验：1）与硝酸银反应（ChP）：含有烯二醇基，被硝酸银氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色金属银沉淀。2)与2，6-二氯靛酚反应：原理是2，6-二氯靛酚为染料，氧化型在酸性介质中为玫瑰红色，碱性介质中为蓝色，与维生素C作用后生成还原型无色的酚亚胺。 C含量测定：碘量法（ChP）：原理是维生素C在醋酸酸性条件下，可被碘定量氧化；方法为取药品，加新沸的冷水与稀醋酸溶解，加淀粉指示液，用碘滴定，至溶液显蓝色30s内不褪。注意事项有操作中加入稀醋酸使滴定在酸性溶液中进行，因在酸性介质中维生素C受空气中氧的氧化速度减慢，但样品溶于稀醋酸后仍需立即进行滴定；加新沸过的冷水可以

43、减少水中溶解的氧对测定的影响；chp采用此法测定维生素C原料、片剂、泡腾片、颗粒剂和注射剂，为消除制剂中辅料对测定的干扰，滴定前要进行必要的处理。 4.维生素E（生育酚） A性质：氧化性：在无氧条件下对热稳定，加热200摄氏度也不破坏，对氧十分敏感，遇光、空气可被氧化，氧化产物为-生育酚和-生育酚二聚体。 B含量测定：ChP、USP、BP采用气相色谱法 第十章 甾体激素类药物 1.基本结构：具有环戊环并多氢菲。 2.分类：肾上腺皮质激素（氢化可的松、醋酸地塞米松）； 性激素：a雄性激素及蛋白同化激素：如甲睾酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙 b孕激素：如黄体酮 c雌性激素：如雌二醇 3.鉴别： 1）物理

44、常数鉴别 A熔点：醋酸地塞米松223-233摄氏度；黄体酮128-131摄氏度B比旋度：中国药典规定使用钠光D线测定旋光度，氢化可的松+162度-+169度；丙酸睾酮为+84度-+90度； C吸收系数：氢化可的松242nm处吸收系数为422-448；醋酸地塞米松420nm处吸收系数为343-371； 2）化学鉴别法 A与强酸呈色反应：ChP中氢化可的松的鉴别为加如硫酸5分钟，显示棕黄色至红色，有绿色荧光，倒入水中，变成黄色至橙黄色，微带绿色荧光，生成少量絮状沉淀。又如炔雌醇加入硫酸后显橙红色，在反射光线下出现黄绿色荧光，倒入水中生成玫瑰红色絮状沉淀。 B官能团的反应 C-17-醇酮基呈色：C-

45、17-醇酮基具有还原性，能与碱性酒石酸酮试液（婓林试液）、氨制硝酸银试液（多伦试液）以及四氮唑试液反应呈色。ChP用于醋酸泼尼松的鉴别。 酮基的呈色：C3-酮基和C20-酮基可以和某些羰基试剂，如2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼等反应，形成黄色的腙。如黄体酮的鉴别。甲酮基的呈色：结构中含有甲酮基以及活泼亚甲基时，能与亚硝基铁氰化钠、间二硝基酚、芳香醛类反应呈色。ChP用于鉴别黄体酮。 酚羟基的呈色：雌激素C3上有酚羟基，与重氮苯磺酸反应得到红色偶氮染料。 炔基的沉淀反应：具有炔基的药物如炔雌醇、炔诺酮、炔诺孕酮。遇硝酸银试液，生成白色的炔银沉淀。 卤素的反应：在C6、C9或其他位置上有氟或

46、氯取代，鉴别时需要对取代的卤原子进行确认，但卤原子与药物以共价键连接，需要先采用氧平燃烧法或回流水解法将有机结合的卤原子转为无机离子。 4.含量测定： 1）高效液相色谱法：用于黄体酮、黄体酮注射液、地塞米松磷酸钠的含量测定。 2）紫外：ChP用于测定氢化可的松片的含量，在242nm处有吸收，具有苯环的在280nm处有吸收。 3）比色法： A四氮唑比色法：四氮唑盐的种类：a氯化三苯四氮唑（TTC）：还原产物为不溶于水的深红色三苯甲zan，最大吸收波长在480-480nm。b蓝四氮唑（BT），还原产物为暗蓝色的双甲zan，最大吸收波长在525nm左右。反应原理：皮质激素类的C-17-醇酮基具有还原

47、性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量的还原为有色甲zan，生成的颜色随所用试剂和条件的不同而不同。测定方法：ChP中氢化可的松乳膏采用此法，使用对照品法，于对照品和供试品中分别加入无水乙醇和氯化三苯四氮唑试液，在加入氢氧化四甲基铵试液，在485nm处测定吸光度，计算。影响因素：a基团的影响：一般认为C11-酮基取代的甾体反应速度快于C11-羟基取代的甾体；C21-羟基酯化后其反应速度减慢，当酯化的基团为三甲基醋酸酯、磷酸酯或琥珀酸酯时，反应速度更慢。b溶剂和水分的影响：当水量大时会使呈色速度减慢，但含水量不超过5%时，对结果几乎无影响，一般采用无水乙醇作为溶剂，醛具有一定的还原性，会使吸收度增高

48、，所以最好采用无醛乙醇作为溶剂。c碱的种类及加入的顺序的影响：在各种碱性试剂中，采用氢氧化四甲基铵能得到满意的结果。d空气中氧及光线的影响：反应产物对光敏感，因此必须用避光容器并置于暗处显色，同时达到最大呈色后，立即测定吸光度。e温度与时间的影响：呈色反应速度对温度的增高而加快，一般在室温或30摄氏度恒温条件下显色，结果的重现性好，ChP的反应条件是25摄氏度暗处40-45分钟。 B异烟肼比色法：C3-酮基及某些位置上的酮基能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合，形成黄色的异烟腙，在420nm处有吸收。 C柯柏反应比色法：雌激素与硫酸-乙醇的反应，在515nm有吸收。 第十一章 抗生素类药物 1.

49、-内酰胺类抗生素：包括青霉素（母核为6-氨基青霉烷酸，含有三个手性碳原子）和头孢菌素（母核为7-氨基头孢菌烷酸，含有两个手性碳原子）。 1）性质：A酸性：pKa在2.5-2.8之间。B旋光性。C溶解度：青霉素的碱金属水溶液遇酸成为白色沉淀其余的碱金属盐易溶于水，有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂。D紫外：青霉素族分子中母核部分无共轭体系，但侧链酰胺基上取代基有苯环等共轭体系。E-内酰胺环的不稳定性：四元环张力大，酰胺键易水解。干燥条件下较为稳定，室温条件下密封保存可储存3年以上，但水溶液不稳定，随PH和温度而有很大变化。 2）鉴别实验：A色谱法。B光谱法。C呈色反应：a羟肟酸铁反应：青霉素

50、及头孢菌素在碱性中与羟胺作用，-内酰胺环破裂生成羟肟酸，在稀酸中与高铁离子呈色。b类似肽键反应：取代基有-氨基酸结构，可显双缩脲和茚三酮反应。 3）含量测定：A高效液相色谱法（外标法）；B生物样品中-内酰胺类抗生素的分析； 2.氨基糖苷类抗生素：链霉素、庆大霉素 1）结构：链霉素：一分子链霉胍与一分子链霉双糖胺（链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺）。巴龙霉素：巴龙胺+巴龙二糖胺。庆大霉素：绛红糖胺+脱氧链霉胺+加洛糖胺 2）鉴别试验： A、茚三酮反应：ChP用于硫酸核糖霉素、硫酸庆大霉素、硫酸小诺霉素的鉴别，具有羟基胺类和-氨基酸性质，与茚三酮缩合成蓝紫色化合物。 B、Molisch试验：具有五碳

51、糖或六碳糖结构的氨基糖苷类经酸水解，在盐酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，遇到-萘酚或蒽酮显色。 C、N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应）：如链霉素中的N-甲基葡萄糖胺，硫酸新霉素、硫酸巴龙霉素中的D-葡萄糖胺，在碱性溶液中与乙酰丙酮缩合成吡咯衍生物，与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成樱桃红色缩合物。 D、麦芽酚（Maltol）反应：链霉素的特征反应，在碱性溶液中，链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，在消除；链霉胍生成麦芽酚，麦芽酚与高铁离子在微酸性溶液中形成紫红色配位化合物。 E、坂口（Sakaguchi）反应：为链霉素水解产物链霉胍的特有反应

52、，本品水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链霉胍，和8-羟基喹啉（或-萘酚）分别同次溴酸钠反应，其各自产物再相互作用生成橙红色化合物。F、硫酸盐的反应 G、色谱法：薄层色谱、高效液相色谱法 H、光谱法：红外、紫外 3）特殊杂质的检查： A、链霉素杂质为链霉素B（甘露糖链霉素），杂质来源于中间体，采用薄层色谱法测定。 B、庆大霉素的组分测定（HPLC法）：ChP采用蒸发光散射检测器测定。 4）含量测定：微生物检定法、高效液相色谱法 第十二章 1.片剂的检查 A常规检查法： a重量差异，指按规定称量方法测得片剂每片的重量与平均片重之间的差异程度。 b崩解时限：固体制剂在规定介质中，以规定的方法进行检查崩

53、解溶散并通过筛网所需时间的限度。 B含量均匀度检查：指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片（个）含量符合标示量的程度。 C溶出度的检查：药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。 D释放度检查：第一法用于缓释和控释制剂的测定；第二法用于肠溶制剂；第三发用于透皮贴剂。 2.注射剂的检查：注射液的装量检查、注射用无菌粉末的装量差异检查、澄明度检查、热原或细菌内毒素检查、无菌检查、不溶性微粒的检查。 3.药物制剂中常见附加剂的干扰与排除 片剂中常见赋形剂的干扰与排除： A、糖类：赋形剂中含有淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等，他们水解后均生成葡萄糖具有还原性，干扰氧化还原滴定。所以氧化还原测定药物时，在选择含糖类附加剂片剂的含量测定方法时，应避免使用氧化性强的滴定剂，同时应用阴性对照品做试验，若阴性对照品要消耗滴定剂，说明附加剂对测定有干扰。 B、硬脂酸镁：是片剂常用的润滑剂，是以硬脂酸镁和棕榈酸镁为主要成分的混合物，一方面可