周练2专题二微生物的培养与应用课题用

1、1(15分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(2)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力_kPa，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(3)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_。把锅内水加热煮沸并将其中原

2、有冷空气彻底排出后将锅密闭。(4)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_(“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_ 冰箱中保藏。2(15分)下表是一种培养基的配方，请回答：牛肉膏0.5g蛋白胨1gNaCI0.5g琼脂2g水100mL(1)此培养基的营养要素有_类，其中蛋白胨主要提供的是_。(2)各成分含量确定的原则是_。(3)在各种成分溶化分装前，须进行的是_。(4)该培养基按物理性质划分属于_培养基，能培养的细菌同化作用类型是_。(5)如要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，需加入_，观察它的_特征。

3、(6)若酵母菌中混杂有细菌，要将酵母菌分离出来，可采用_的选择培养基。(7)从配制培养基，到培养完成的整个实验过程中所采用的防止杂菌感染的措施有哪些？_。3(15分)选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件使仅适应条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。选择条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用选择方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。 (1)本实验

4、所需培养基为_。(2)实验原理是_ 。(3)重复培养的目的是_。(4)的菌落中大部分是降解_的微生物。(5)为_组，为_ 组，设置的目的是_。(6)接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是_。4. (15分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_ _和_。除此之外，培养基还必须含有基本成分是_ _和_ _。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_ _。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_ _中培养，

5、培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_ _作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_ _。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_ _细菌，这种培养基被称为_ _。5. (15分)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。请分

6、析回答问题：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g琼脂1.5 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL(1)此培养基能否用于植物组织培养？_，理由是 。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选 ，这种培养基属于_培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和_，实验需要振荡培养，原因是 。(4)转为固体培养时，常采用 的方法接种，获得单菌落后继续筛选。(5)下列材料或用具中：培养细菌用的培养基与培养皿；玻棒、试管、锥形瓶和吸管；实验操作者的双手。需要灭菌的是： ；需要消毒的是： 。(填序号)(6)在进行分离分解尿素

7、的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_(填序号)。由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照(7)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理：_,_。6. (15分)有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。(1)写出实验步骤：将培养好的生产菌株分成两组， 。制备含有 的固体培养基。_。_。(2)预期实验结果及结论

8、：诱变组中菌落周围的透明圈比对照组_ ，说明_ 。诱变组中菌落周围的透明圈与对照组_，说明_。诱变组中菌落周围的透明圈比对照组小，说明_。(3)若获得纯净的高产菌株，需进行_ 或_ 操作。1.答案：(1)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(2)高压蒸汽灭菌锅100121 1530 min废弃(3)适量水(4)外冷却42.答案(1)五碳源、氮源、特殊的营养物质（生长因子）(2)根据所培养微生物的营养需要(3)调pH(灭菌)(4)固体异养型(5)伊红一美蓝菌落(6)加青霉素(7)对配制的培养基用高压蒸汽灭菌；接种前用酒精擦拭双手；试管加棉塞；接种前用火焰灼烧接种针(接种环)；接种在酒精灯火焰旁完成

9、。3.答案：(1)选择培养基(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经选择培养，选择出能降解对羟基苯甲酸的微生物(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例(4)对羟基苯甲酸(5)对照实验说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物(6)接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物4.答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水,(2) 高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基5.答案：(1)不能缺少多种必需的矿质元素 (2)目的菌选择(3)尿素葡萄糖为目的菌提供氧气(4)涂

10、布平板(划线)(5)和(6)(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变红6.答案：(1)一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作为对照纤维素把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上，同时接种对照组(未处理)的菌株，把它们置于相同的适宜条件下培养一段时间后，取培养基用刚果红染色，观察记录菌落周围透明圈的大小情况(2)大诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株,相同诱变育种没有使菌株发生变化诱变育种获得了低纤维素酶产量的菌株,(3)平板划线稀释涂布平板6在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。(1)下图是利用_法进行微生

11、物接种，把聚集的菌种逐步_分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：(至少答2项) _。(2)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、KCI、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_成分，并加入葡萄糖和_。(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248。乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233。丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、212和256，取平均值16

12、3。在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？_。答案(1)平板划线稀释每次划线前要灼烧；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区不重叠(2)NaNO3尿素(3)甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，数据缺乏正确性2以下是制作果醋的流程示意图。试回答下列有关问题。挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵果醋（1）醋酸菌的新陈代谢类型是_。（2）某同学设计了上题图2所示的装置。装置中充气口的作用主要是在_阶段通入无菌空气；排气口排出的主要是_（气体）。（3）在酒精发酵阶段主要发生的化学反应是_（

13、总反应式）。（4）若发现此过程中装置内温度有所上升，这是由于_的缘故。（5）醋酸菌将葡萄糖或乙醇转化成醋酸的目的是_。3腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品。下面是腐乳制作的流程示意图： 让豆腐上长出毛霉加卤汤装瓶密封腌制加盐腌制 （1）现代科学研究表明，许多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种 状真菌。（2）腐乳制作的原理是 。（3）传统的制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自 。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以 。（4）加盐的作用是 和 。（5）卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄

14、酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒的作用是 和 。4如下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：原料选择修剪、洗涤、晾晒、切分成条状或片状加盐盐水冷却泡菜盐水加入调味料、装坛发酵成品测定亚硝酸盐含量（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是_。（2）制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为_，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_。（3）泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因：_。（4）测定亚硝酸盐含量的方法是_。5某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、 灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回

15、答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和_ _。除此之外，培养基还必 须含有的基本成分是 和 。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。 一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_ 。（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_ 细菌，这种培养基（按功能分）被称为 。6.葡萄发酵可产

16、生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是。（2）该微生物通过无氧呼吸可分解，产生的终产物是和。（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是。丙同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是、。（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是。当堂检测答案1.（1）醋酸发

17、酵 （2）温度、酸碱度、溶氧 （3）酵母菌种 （4） 果酒发酵 果醋发酵（5）酵母菌 二氧化碳 剩余的空气、二氧化碳 防止杂菌侵入污染，影响发酵（6）2/3（7）不能。因为果酒发酵时缺氧能抑制醋酸菌的生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足。2.（1）异养需氧型 （2）醋酸发酵 剩余空气 和CO2 （3）C6H12O62C2H5OH2CO2 （4）微生物呼吸产生的能量中一部分以热能形式释放 （5）获得生命活动所需的物质和能量（ATP）3（1）丝 （2）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 （3）空气中的毛霉孢子 避免其他菌种的污染，保证产品的质量 （4）析出豆腐中的水分，使豆腐变硬 抑制微生物的生长，避免豆腐变质 （5）可以抑制微生物的生长 能使腐乳具有独特的香味4（1）亚硝酸盐的含量低 （2）4：1；加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保