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1、环境工程微生物学环境工程微生物学 第三版第三版_周群英周群英 课后习题目录课后习题目录 第一篇第一篇 微生物学基础微生物学基础 .1 第一章 非细胞结构的超微生物病毒 .1 第二章 原核微生物 .3 第三章 真核微生物 .6 第四章 微生物的生理 .8 第五章 微生物的生长繁殖与生存因子 .12 第六章 微生物的遗传和变异 .16 第二篇第二篇 微生物生态微生物生态 .20 第一章 微生物生态 .20 第二章 微生物在环境物质循环中的作用 .22 第三章 水环境污染控制与治理的生态工程及微生物学原理 .26 第四章 污、废水深度处理和微污染源水预处理中的微生物学原理 .29 第五章 有机固体废
2、弃物与废气的微生物处理及其微生物群落 .31 第六章 微生物学新技术在环境工程中的应用 .34 第一篇第一篇 微生物学基础微生物学基础 第一章 非细胞结构的超微生物病毒 1 病毒是一类什么样的微生物?它有什么特点? 答:病毒没有合成蛋白质的机构核糖体,也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统,不具独立的 代谢能力,必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内,依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。其 特点是:病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物,然而,在宿主体外却呈现不具生命特征的 大分子物质,但仍保留感染宿主的潜在能力,一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征,重新感染 新宿主。 2 病毒的
3、分类依据是什么?分为哪几类病毒? 答:依据是:病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无 被膜等进行分类的。根据转性宿主分类:有动物病毒、植物病毒、细菌病毒(噬菌体) 、放线菌病毒(噬 放线菌体) 、藻类病毒(噬藻体) 、真菌病毒(噬真菌体) 。按核酸分类:有 DNA 病毒和 RNA 病毒。 3 病毒具有什么样的化学组成和结构? 答:病毒的化学组成有蛋白质和核酸。还含有脂质和多糖。整个病毒体分两部分:蛋白质衣壳和核酸内 芯,两者构成核衣壳。蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核酸内芯 有两种:核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA
4、) 。 4 叙述大肠杆菌 T 系噬菌体的繁殖过程。 答:大肠杆菌 T 系噬菌体的繁殖过程有:吸附、侵入、复制、聚集与释放。首先,大肠杆菌 T 系噬菌体 以它的尾部末端吸附到敏感细胞表面上某一特定的化学成分,或是细胞壁,或是鞭毛,或是纤毛。噬菌 体侵入宿主细胞后,立即引起宿主的代谢改变,宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传特性复制和合成蛋 白质,而由噬菌体核酸所携带的遗传信息所控制,借用宿主细胞的合成机构复制核酸,进而合成噬菌体 蛋白质,核酸和蛋白质聚集合成新的噬菌体,这个过程叫装配。大肠杆菌 T 系噬菌体的装配过程如下: 先合成含 DNA 的头部,然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾丝,并逐个加上去就装配
5、成一个完整的新的大肠 杆菌 T 系噬菌体。噬菌体粒子成熟后,噬菌体的水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞破裂,使菌体被释 放出来重新感染新的宿主细胞一个宿主细胞可释放 10 到 1000 个噬菌体粒子。 5 什么叫毒性噬菌体?什么叫温和噬菌体? 答:侵入宿主细胞后,随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体。 侵入宿主细胞后,不引起宿主细胞裂解的噬菌体称作温和噬菌体。 6 什么叫溶原细胞(菌)?什么叫原噬菌体? 答:含有温和噬菌体核酸的宿主细胞被称作溶原细胞。在溶原细胞内的温和噬菌体核酸,称为原噬菌体。 7 解释 Escherichia coli K12()中的各词的含义。 答:该词为大肠杆菌溶原
6、性噬菌体的全称。Escherichia 为大肠杆菌的属名,coli 为大肠杆菌的名种,K12 是大肠杆菌的株名,括弧内的 为溶原性噬菌体。 8 病毒(噬菌体)在固体培养基上有什么样的培养特征? 答:将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成多个菌落,当接种适度的噬菌体悬液后引起 点性感染,再感染点上进行反复的感染过程,宿主细胞菌落就一个个被裂解成一个个空斑,这些空斑就 叫噬菌斑。 9 噬菌体在液体培养基和固体培养基中各有什么样的培养特征? 答:将噬菌体的敏感细菌接种在液体培养基中,经培养后敏感细菌均匀分布在培养基中而使培养基浑浊。 然后接种噬菌体,敏感细菌被噬菌体感染后发生菌体裂解,原来
7、浑浊的细菌悬液变成透明的裂解溶液。 将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成多个菌落,当接种适度的噬菌体悬液后引起 点性感染,再感染点上进行反复的感染过程,宿主细胞菌落就一个个被裂解成一个个空斑,这些空斑就 叫噬菌斑。 10 什么叫噬菌斑?什么是 PFU? 答:将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成多个菌落,当接种适度的噬菌体悬液后引起 点性感染,再感染点上进行反复的感染过程,宿主细胞菌落就一个个被裂解成一个个空斑,这些空斑就 叫噬菌斑。PFU 就是病毒空斑单位, 空斑就是原代或传代单层细胞被病毒感染后,一个个细胞被病毒蚀 空形成的空斑。一个空斑表示一个病毒。所以,通过病毒空
8、斑单位的计数可知单位体积中含病毒数。 11 破坏病毒的物理因素有哪些?它们是如何破坏病毒的? 答:1 温度,在宿主细胞外的病毒大多数在 55 至 65范围内不到 1 小时被灭活。一般情况下,高温使病 毒的核酸和蛋白质衣壳损伤。高温对蛋白质的灭活要比对病毒核酸的灭活要快。2 光及其他辐射(1)紫 外辐射:使核酸中的嘧啶环受到影响,形成胸腺嘧啶二聚体。尿嘧啶残基的水合作用也会损伤病毒。 (2)可见光:在氧气和燃料存在的条件下,大多数肠道病毒对可见管很敏感而被杀死。燃料附着在核酸 上,催化光氧化过程,引起病毒灭活。3 干燥 在此条件下,病毒被灭活是由于病毒 RNA 释放出来而随后 裂解所致。 12
9、紫外如何破坏病毒? 答:日光中的紫外辐射和人工制造的紫外辐射均具有灭活病毒的作用。其灭活部位是病毒的核酸,使核 酸中的嘧啶环受到影响,形成胸腺嘧啶二聚体。尿嘧啶残基的水合作用也会损伤病毒。 13 灭活宿主体外病毒的化学物质有哪些?它们是如何破坏病毒的? 答:主要物质有:酚,低渗缓冲溶液,甲醛,亚硝酸,氨,醚类,十二烷基硫酸钠,氯仿,去氧胆酸钠, 溴,碘,臭氧,乙醇,强酸,强碱等其他氧化剂。 强酸强碱除本身可以灭活病毒外,还能改变 pH 值,病毒对高 pH 值敏感,碱性环境可以破坏蛋白质衣壳 和核酸,当 pH 值到达 11 时,可严重破坏病毒。氯和臭氧灭活病毒的效果极好,它们对病毒蛋白质和核 酸
10、均有作用。低渗缓冲溶液的环境能使病毒蛋白质衣壳发生细微变化,阻止病毒附着在宿主细胞上。甲 醛只破坏病毒的核酸,不改变病毒的抗原特性。含脂类被膜的病毒对醚、十二烷基硫酸钠、氯仿、去氧 胆酸钠等脂溶剂敏感而被破坏。 14 破坏病毒的蛋白质衣壳、核酸、脂类被膜化的化学物质有哪些? 答:主要物质有:酚,低渗缓冲溶液,甲醛,亚硝酸,氨,醚类,十二烷基硫酸钠,氯仿,去氧胆酸钠, 溴,碘,臭氧,乙醇,强酸,强碱等其他氧化剂。氯和臭氧灭活病毒的效果极好,它们对病毒蛋白质和 核酸均有作用。低渗缓冲溶液的环境能使病毒蛋白质衣壳发生细微变化,阻止病毒附着在宿主细胞上。 甲醛只破坏病毒的核酸,不改变病毒的抗原特性。含
11、脂类被膜的病毒对醚、十二烷基硫酸钠、氯仿、去 氧胆酸钠等脂溶剂敏感而被破坏。 15 你怎样判断病毒有、无被膜? 答:凡对醚类等脂溶剂敏感的病毒为被膜的病毒。对醚类等脂溶剂不敏感的病毒为不具被膜的病毒。 16 病毒在水体和土壤中的存活时间主要受哪些因素的影响? 答:病毒在水体中主要受温度的影响,与病毒的种类也有关。在土壤中主要受温度和湿度的影响。 第二章 原核微生物 1 细菌有哪几种形态?各举一种细菌为代表。 答:1 球菌:金黄色葡萄球菌 2 杆菌:芽孢杆菌 3 螺旋菌:弧菌 4 丝状菌:铁丝菌 2 细菌有哪些一般结构和特殊结构?它们各有哪些生理功能? 答:细菌是单细胞生物。所有细菌均有:细胞壁
12、、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核物质。部分细 菌有特殊结构:芽孢、鞭毛、荚膜、粘液层、菌胶团、衣鞘及光合作用片层等。 细胞壁是包围在细菌体表面最外层的、具有坚韧而带有弹性的薄膜。可以起到:保护原生质体免 受渗透压引起破裂的作用。维持细菌的细胞形态。细胞壁是多孔结构的分子筛,阻挡某些分子进入 和保留蛋白质在间质(格兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域)细胞壁为鞭毛提供指点,使鞭毛运 动。 细胞质膜的生理功能有:维持渗透压的梯度和溶液的转移。细胞质膜上有合成细胞壁和形成横 膈膜组分的酶,故在膜的外表面合成细胞壁膜内陷形成的中间体含有细胞色素,参与呼吸作用。细 胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH 脱
13、氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷 酸酶。在细胞上进行物质代谢和能量代谢。细胞质膜上有鞭毛基粒,鞭毛由此长出,即为鞭毛提供附 着点。 荚膜的主要功能有:具有荚膜的 S-型肺炎链球菌毒性强,有助于肺炎链球菌侵入人体。荚膜可 保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬,保护细菌免受干燥的影响。当缺乏营养时,假膜可被用作碳源 和能源,有的荚膜还能做氮源。废水生物处理中细菌的荚膜有生物吸附作用,再爆气池中因爆气搅动 和水的冲击力容易把细菌粘液冲刷入水中,以增加水中有机物,它可被其他微生物利用。 3 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同?各有哪些化学组成? 答:革兰氏阳性菌细胞
14、壁厚约 20-80nm,结构较简单,含肽聚糖,革兰氏阴性菌细胞壁厚约 10nm,结构复杂,分外壁层和内壁层,外壁层又分三层:最外层是脂多糖,中间是磷脂层,内层是 脂蛋白。内壁含肽聚糖,不含磷壁酸。 化学组成:革兰氏阳性菌含大量肽聚糖,含独磷壁酸,不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少肽聚糖,含 独脂多糖,不含磷酸壁。 4 古菌包括哪几种?它们与细菌有什么不同 ? 答:古菌可分为三大类:产甲烷菌,嗜热嗜酸菌,极端嗜盐菌。古菌与细菌不同点主要表现在结构 的复杂程度以及各自某些独特的结构。相对细菌而言,古菌结构比较简单。大多数古菌细胞壁不含二氨 基庚二酸和胞壁酸。他的组分大多数是脂蛋白,蛋白质是酸性的。脂类
15、是非皂化性甘油的磷脂和糖脂的 衍生物。古细菌含有内含子。古菌没有肽聚糖,。细菌细胞壁主要组份是主要成分是肽聚糖,是一层较厚 (580nm) 、质量均匀的网状结构。细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。此外,古菌代谢过 程中产生许多特殊的辅酶,因此古菌代谢呈多样性。呼吸类型方面,古菌多数为严格厌氧、兼性厌氧, 还有专性好氧。古菌繁殖速度较慢,进化速度也比细菌慢。大多数古菌生活在极端环境里。 5 叙述细菌细胞质膜结构和化学组成,它有哪些生理功能? 答:细胞质膜是紧贴在细胞壁的内侧而包围细胞质的一层柔软而富有弹性的薄膜。它是半渗透膜。含 蛋白质 60%-70%,脂类 30%-40%,多糖 2%,
16、蛋白质与膜的透性及酶的活性有关。脂类是磷脂,甘 油,脂肪酸和含胆碱组成。细胞质膜的结构由上下两层致密的着色层,中间夹着一个不着色的区域组 成,不着色的区域具有正负电荷,有极性的磷脂双分子层组成,是两个极性分子。 细胞质膜的生理功能有:维持渗透压的梯度和溶液的转移。细胞质膜上有合成细胞壁和形成横 膈膜组分的酶,故在膜的外表面合成细胞壁膜内陷形成的中间体含有细胞色素,参与呼吸作用。细 胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH 脱氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷 酸酶。在细胞上进行物质代谢和能量代谢。细胞质膜上有鞭毛基粒,鞭毛由此长出,即为鞭毛提供附 着点。 6 何谓核糖体?它有什
17、么生理功能? 答:原核微生物的核糖体是分散在细胞质中的亚微颗粒,使合成蛋白质的部位。它有恶核糖核酸和蛋 白质组成。生理功能:可以起到维持形态和稳定功能的作用,还能起到转录作用。 7 在 pH 为 6、pH 为 7、pH 为 7.5 的溶液中细菌各带有什么电荷?在pH 为 1.5 溶液中细菌代有什 么电荷?为什么 ? 答:在 pH 为 6、pH 为 7、pH 为 7.5 的溶液中细菌带负电荷。在 pH 为 1.5 溶液中细菌带正电荷。 因为细菌的等电点为 pH 为 2-5。若培养液的 pH 比细菌等电点高,细菌的游离氨基电离受抑制,游 离羧基电离,细菌带负电。若培养液的pH 比细菌等电点低,细菌
18、的游离羧基电离受抑制,游离氨 基电离,细菌带正电。 8 叙述革兰氏染色的机制和步骤。 答:机制: 革兰氏染色与细菌等电点有关 革兰氏染色与细胞壁有关 步骤:1 在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀,固定。2 用草酸结 晶紫染液 1 分钟,水洗。 3 用碘-碘化钾媒染 1 分钟,水洗。 4 用中性脱色剂(如乙醇)脱色,革兰 氏阳性菌不褪色仍呈紫色,格兰仕阴性菌褪色,呈无色。5 用蕃红染液复染 1 分钟,革兰氏阳性菌 仍呈紫色,格兰仕阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来 9 何谓细菌菌落?细菌有哪些培养特征?这些培养特征有哪些实践意义? 答:细菌菌落就是由一
19、个细菌繁殖起来由无数细菌组成具有一定形态特征的细菌集团。 细菌培养特征: 1 在固体培养基上的培养特征 :菌落特征。 2 在明胶培养基中的培养特征:能产 生明胶水解酶水解明胶,不同的细菌将明胶水解成不同的溶菌区。3 在半固体培养基中的培养特征: 细菌可呈现各种生长状态,根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型和鞭毛有无。4 在液体培养基 中的培养特征:在液体培养基中,细菌整个个体与培养基接触,可以自由扩散生长。 10 可用什么培养技术判断细菌的呼吸类型和能否运动?如何判断? 答:细菌在半固体培养基中培养:细菌可呈现各种生长状态,根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类 型、鞭毛有无以及能否运动。如果细菌
20、在培养基的表面以穿刺线的上部生长者为好氧细菌。沿着穿刺 线自上而下生长者为兼性厌氧菌或兼性好氧菌。如果只沿着穿刺线生长没有鞭毛,不运动的细菌;如 果不沿着穿刺线生长而且穿透培养基 扩散生长者为有鞭毛。运动的细菌。 11 何谓放线菌?革兰氏染色是何种反应? 答:在固体培养基上呈辐射状生长的菌种,成为放线菌。除枝动菌属革兰氏阴性菌,革兰氏染色呈红 色外,其余全部放线菌均为革兰氏阳性菌,革兰氏染色呈紫色。 12 蓝细菌是一类什么微生物?分几纲,其中有哪几属与水体富营养化有关? 答:兰细菌使古老的微生物,只有原始核,没有核膜和核仁,只有染色体,支局叶绿素,没有叶绿体。 吸收二氧化碳,无机盐和水合成有机
21、物作为自身营养,并放出氧气。分为两纲,分别为:色球藻纲和 藻殖段纲。其中微囊藻属和腔球藻属可以引起富营养化水体发生升华。鱼腥藻属在富营养化水体中形 成升华。 第三章 真核微生物 1 何谓原生动物?它有哪些细胞起和营养方式? 答:原生动物是动物中最原始、最底等、结构最简单的单细胞动物。原生动物为单细胞,没有细胞壁, 有细胞质膜、细胞质,有分化的细胞器,其细胞和具有核膜。营养方式有:全动性营养、植物性营养、 腐生性营养 2 原生动物分几纲?在废水生物处理中有几纲? 答:原生动物分为四纲: (1)鞭毛纲;(2)肉足纲;(3)纤毛纲;(4)孢子纲. 在废水生物处理中有 (1)鞭毛纲;(2)肉足纲;(3
22、)纤毛纲三纲。在废水生物处理中系统中,活性污泥培养 初期或在处理效果差时鞭毛虫大量出现,可作污水处理的指示生物。在废水生物处理中系统中,活性 污泥培养中期有变形虫出现(肉足纲)。在废水生物处理中系统中,活性污泥培养中期或在处理效果 差时纤毛虫会出现。 3 你如何区分鞭毛纲中的眼虫和杆囊虫? 答:眼虫体行小,前端钝圆,后端尖。虫体前端凹陷渗入体内的叫胞咽,胞咽末端膨胀大呈储蓄泡, 鞭毛由此通过胞咽伸向体外。眼虫是靠一根鞭毛快速摆动并作颤抖式前进的。 4 纤毛纲中包括哪些固着型纤毛虫(钟虫类)?你如何区分固着型纤毛虫的各种虫体? 答:有钟虫属、独缩虫属、聚缩虫属、累枝虫属、盖纤虫属。钟虫属是单个个
23、体固着生活,其它为群 体生活,独缩虫和聚缩虫的虫体相像,每个虫体的尾柄内有肌丝,独缩虫的尾柄相连,但肌丝不相连, 聚缩虫的尾柄相连,肌丝也相连。累枝虫和盖纤虫相像, ,尾柄都分支,尾柄内没有肌丝,但累枝 虫的虫体口缘有两圈纤毛环形成的似波动膜,盖纤虫的虫口缘有两圈纤毛环形成的盖型物,或者小柄 托住盖型物,能运动,因有盖而得名。 5 原生动物中各纲在水体自净和污水生物处理中如何其指示作用? 答:(1)鞭毛纲:在污水生物处理中系统中,活性污泥培养初期或在处理效果差时鞭毛虫大量出现, 可作污水处理的指示生物。 (2)肉足纲:变形虫喜 -中污带或 -中污带的自然水体中生活。在污水 生物处理中系统中,活
24、性污泥培养中期有出现。(3)纤毛纲:纤毛纲中的游泳型纤毛虫多数是在- 中污带或 -中污带,少数在寡污带中生活。在污水生物处理中系统中,活性污泥培养中期或在处理 效果差时纤毛虫会出现。 6 何谓原生动物的胞囊?它是如何形成的? 答:原生动物的胞囊是抵抗不良环境的休眠体。形成过程:先是虫体变圆,鞭毛、纤毛或伪足等细胞 器缩入体内或消失,细胞水分陆续由伸缩泡排出,虫体缩小,最后伸缩泡消失,分泌一种胶状物质于 体表,尔后凝固形成胞壳。胞壳有两层,外层较厚,表面凸起,内层薄透明。 7 微型后生动物包括哪几种? 答:(1)轮虫; (2)线虫; (3)寡毛类动物 ; (4)浮游甲壳动物 ; (5)苔藓虫;
25、(6)羽苔虫. 8 常见的浮游甲壳动物有哪些?你如何利用浮游甲壳动物判断水体的清澈程度? 答:常见的有:剑水蚤和水蚤。水蚤的血液含有血红素。血红素的含量常随着环境中的溶解氧量的高 低而变化。水中溶解氧降低,水蚤血红素含量高,水中溶解氧升高,水蚤血红素含量低,而清澈的水 中溶解氧高,因此我们可以利用水蚤的这个特点判断水体的清澈程度。 9 藻类的分类依据是什么 ?它分几门? 答:分类依据是根据藻类的光合色素的种类、个体形态、细胞结构、生殖方式和生活史等将藻类分为 10 门:蓝藻门、裸藻门、绿藻门、轮藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、红藻门及褐藻门。 10 裸藻和绿藻有什么相似和不同之处? 答:
26、裸藻不具有细胞壁,绝大部分裸藻有叶绿体,叶绿体呈绿色。裸藻还含油类,裸藻的繁殖为纵裂, 细胞核先进行有丝分裂,尔后细胞由前向后纵向裂殖为二,一个子细胞接受原有的鞭毛,另一个子细 胞长出一条新的鞭毛。绿藻具有2-4 根顶生的、等长的尾鞭型鞭毛。含有较多的叶绿素a、b,叶 黄素,泥黄素, -胡萝卜素也较多。绿藻的生殖方式为无性生殖和有性生殖。 11 绿藻在人类生活、科学研究和水体自净中起什么作用? 答:小球藻和栅藻富含蛋白质可供人食用和动物作饲料。绿藻是藻类生理生化研究的材料及宇宙航行 的供氧体,有的可制藻胶。绿藻在水体自净中起净化和指示生物的作用。 12 硅藻和甲藻是什么样的藻类?水体富营养化与
27、哪些藻类有关/ 答:硅藻为单细胞,形体像小盒,由上壳和下壳组成。硅藻的细胞壁由硅质和果胶组成。甲藻多为单 细胞个体,前后或左右略扁,前、后端常有突出的角。多数有细胞壁,少数为裸型。细胞核大,有核 仁和核内体。水体富营养化与裸藻和甲藻有关。 13 真菌包括哪些微生物?它们在废水生物处理中各起什么作用? 答:真菌包括:酵母菌、霉菌和伞菌。淀粉废水、柠檬酸残糖废水和油脂废水以及味精废水均可利用 酵母菌处理;镰刀霉分解无机氰化物的能力强,对废水中氰化物的去除率达90%以上。有的霉菌 还可以处理硝基化合物废水;伞菌可处理无毒的有机废水。 14 酵母菌有哪些细胞结构?有 几种类型的酵母菌? 答:酵母菌有细
28、胞壁、细胞质膜、细胞核、细胞质及内含物。酵母菌有发酵型和氧化型两种。 15 霉菌有几种菌丝?如何区别霉菌和放线菌的菌落? 答:霉菌有:营养菌丝和气生菌丝。霉菌的菌落呈圆形、绒毛状、絮状或蜘蛛状,比其他微生物的菌 落都大。放线菌的菌落是由一个分生孢子或一段营养菌丝生长繁殖引起许多菌丝互相缠绕而成的,质 地紧密,表面呈绒状或密实干燥多皱。 第四章 微生物的生理 1. 酶是什么?它有哪些组成?各有什么生理功能? 答:酶是动物、植物及微生物等生物体内合成的,催化生物化学反应的,并传递电子、原子和化学基 团的生物催化剂。酶的组成有两种: 单成分酶,只含蛋白质; 全酶,由蛋白质和不含氮的小分 子有机物组成
29、,或由蛋白质和不含氮的小分子有机物加上金属离子组成。每个组分的生理功能为:酶 蛋白起加速生物化学反应的作用;辅基和辅酶起传递电子、原子和化学基团的作用;金属离子除传递 电子外,还起激活剂的作用。 2. 什么是辅基?什么是辅酶?有哪些物质可以作辅基或辅酶? 答:辅基是与酶蛋白共价结合的金属离子或一类有机化合物,辅基在整个酶促反应过程中始终与酶的 特定部位结合,用透析法不能除去。 辅酶是某些为催化活性所必需的,与酶蛋白疏松结合的小分子 有机物质,用透析和其它方法很易将它们与酶分开。辅酶A、NAD、FMN、辅酶 Q、磷酸腺苷、 生物素、四氢叶酸、金属离子、辅酶M、MPT 等可以作辅基或辅酶。 3.
30、简述酶蛋白的结构和酶的活性中心。 答:酶蛋白是由 20 种氨基酸组成。组成酶蛋白的氨基酸按一定的排列顺序由肽键连成多肽链,两条 多肽链之间或一条多肽链卷曲后相邻的基团之间以氢键、疏水键、范德华引力及金属键等相连而成。 酶的活性中心是指酶蛋白分子中与底物结合,并起催化作用的小部分氨基酸微区。 4. 按酶所在细胞的不同部位,酶可分成哪几类?按催化化学反应类型可分为哪几类?这两种划分如 何联系和统一? 答:按酶所在细胞的不同部位,酶可分成:胞外酶、胞内酶和表面酶; 按催化化学反应类型酶可分为:水解酶类、氧化还原酶类、异构酶类、转移酶类、裂解酶类和合成酶 类。 5. 酶的催化作用有哪些特征? 答:(1
31、) 酶积极参与生物化学反应,加快反应速度,缩短反应到达平衡的时间,但不改变反应的平衡 点。酶在参与反应的前后,其性质和数量不变。(2) 酶的催化具有专一性,一种酶只作用于一种物 质或一类物质,或催化一种或一类化学反应,产生一定的产物。(3) 酶的催化作用条件温和,酶只 需在常温常压和中性溶液中就可催化反应的进行。(4) 酶对环境条件极为敏感。高温高压、强酸强 碱都可使酶失去活性。 (5) 酶的催化效率极高,比无机催化剂的催化效率高几千倍至几百万倍。 6. 影响酶活力(酶促反应速度)的主要因素有哪些?并加以讨论。 答:(1) 酶浓度对酶促反应的影响:酶促反应速度与酶分子的浓度成正比。但是,当酶的
32、浓度很高时, 底物转化速度逐渐平缓。 (2) 底物浓度对酶促反应的影响:底物的起始浓度较低时,酶促反应速度与 底物浓度成正比,当所有酶与底物结合后,即使再增加底物浓度,中间产物浓度也不会增加了。 (3) 温度对酶促反应的影响:各种酶在最适范围内,酶活性最强,酶促反应速度最大。在适宜温度范 围内,温度每升高 10 度,酶促反应速度可提高 1-2 倍。(4) pH 对酶促反应的影响:酶在最适pH 范围内表现出来的活性,大于或小于最适pH,都会降低酶的活性。 (5) 激活剂对酶促反应的影响: 许多酶只有当某种激活剂存在时,才表现出催化剂活性或强化其催化活性。(6) 抑制剂对酶促反应 的影响:抑制剂能
33、减弱甚至破坏酶活性,它可降低酶促反应速度。 7. 微生物含有哪些化学组分 ?各组分占的比例多少? 答:(1) 水分,占微生物机体质量的 70%-90% (2) 干物质:占微生物机体质量的10%-30%,由有 机物和无机物组成。有机物占干物质质量的90%-97%,无机物占干物质质量的 3%-10% 8. 微生物需要那些营养物质?供给营养时应注意些什么?为什么? 答:(1) 水;(2) 碳源和能源 ; (3) 氮源; (4) 无机盐; (5) 生长因子 供给营养时要注意碳氮磷的比例,因为不同微生物细胞的元素组成比例不同,对各营养元素要求 的比例也不同,因此要合适的碳氮磷的比例。 9. 根据微生物对
34、碳源和能源的需要不同可把微生物分成哪几种类型? 答:根据微生物对碳源和能源的需要不同可把微生物分成:无机营养微生物;有机营养微生物;混合 营养微生物; 10. 当处理某一工业废水时,怎样着手和考虑配给营养? 答:污水生物处理中好氧微生物群体要求碳氮磷比为BOD5:N:P=100:5:1 11. 什么叫培养基?按物质的不同,培养基可分为哪几类?按试验目的和用途的不同,可分为哪几类? 答:根据各种微生物的营养要求,将水、碳源、氮源、无机盐及生长因子等物质按一定比例配制而成 的,用以培养微生物的基质,即培养基。 按物质的不同,培养基可分为 :合成培养基;天然培养基;复合培养基; 按试验目的和用途的不
35、同,可分为:基础培养基;选择培养基;鉴别培养基;富集培养基。 12. 什么叫选择培养基?那些培养基属于选择培养基? 答:用以抑制非目的微生物的生长并使所要分离的微生物生长繁殖的培养基。麦康盖培养基为含胆汁 酸盐的培养基,用于大肠杆菌的培养的选择培养基;乳糖发酵培养基也是适用于大肠杆菌生长的选择 培养基。 13. 什么叫鉴别培养基?那些培养基属于鉴别培养基? 答:几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同,其菌落通过指示剂显示出不同的颜色而被区 分开,这种其鉴别和区别不同细菌作用的培养基,叫做鉴别培养基。远藤氏培养基能区别大肠埃希氏 菌,枸橼酸盐杆菌,产气杆菌,副大肠杆菌。此外,还有醋酸铅培养
36、基,伊红-美蓝培养基。 14. 如何从粪便污染的水样中将大肠杆菌群中的四种菌逐一鉴别出来? 答:使用鉴别培养基,大肠埃希氏菌,枸橼酸盐杆菌,产气杆菌,副大肠杆菌均能在远藤氏培养基上 生长,但它们对乳糖的分解能力不同:前三者能分解乳糖,但分解能力有强有弱,大肠埃希氏菌分解 能力最强,菌落呈紫红色带金属光泽;枸橼酸盐杆菌次之,菌落呈紫红或深红色;产气杆菌第三,菌 落呈淡红色,副大肠杆菌不能分解乳糖,菌落无色透明。这样,这四种菌被鉴别出来了。 15. 如何判断某水样是否被粪便污染? 答:如果水样中检测出有大肠杆菌群,则认为该水样被粪便污染。 16. 营养物质是如何进入细胞的? 答:各种营养物质依靠细
37、胞质膜的功能进入细胞。不同营养物质进入细胞的方式也不同,一共有:单 纯扩散;促进扩散;主动转运以及基团转位四种方式。单纯扩散是物理过程,不包括细胞的主动代谢。 杂乱运动的、水溶性的溶质分子通过细胞质膜中含水的小孔从高浓度区向低浓度区扩散,不与膜上的 分子发生反应。这一过程不需要消耗能量。促进扩散是在细胞质膜外表面与营养物质发生可逆结合, 携带营养物质通过细胞质膜进入细胞,然后与营养物质分离,它本身再返回细胞质膜外表面与另一营 养物质可逆性结合,如此不断循环。主动运输是当微生物内所积累的营养物质的浓度高于细胞外的浓 度时,营养物质就不能按浓度梯度扩散但细胞内,而是逆浓度梯度被“抽”进细胞内。这种
38、逆浓度梯 度积累营养物质的过程,叫主动运输。基团转位是由一种需要代谢能量的运输方式。通过基团转位进 入细胞的物质有糖、嘌呤、嘧啶、乙酸等。 17. 营养物质顺浓度梯度进入细胞的方式有哪些?是如何进入? 答:有单纯扩散和促进扩散。单纯扩散是物理过程,不包括细胞的主动代谢。杂乱运动的、水溶性的 溶质分子通过细胞质膜中含水的小孔从高浓度区向低浓度区扩散,不与膜上的分子发生反应。这一过 程不需要消耗能量。促进扩散是在细胞质膜外表面与营养物质发生可逆结合,携带营养物质通过细胞 质膜进入细胞,然后与营养物质分离,它本身再返回细胞质膜外表面与另一营养物质可逆性结合,如 此不断循环。 18. 营养物质逆浓度梯
39、度进入细胞的方式有哪些?是如何进入? 答:有主动运输和基团转运。主动运输是当微生物内所积累的营养物质的浓度高于细胞外的浓度时, 营养物质就不能按浓度梯度扩散但细胞内,而是逆浓度梯度被“抽”进细胞内。这种逆浓度梯度积累 营养物质的过程,叫主动运输。基团转位是由一种需要代谢能量的运输方式。通过基团转位进入细胞 的物质有糖、嘌呤、嘧啶、乙酸等。 19. 什么叫主动运输?什么叫基团转位? 答:主动运输是当微生物内所积累的营养物质的浓度高于细胞外的浓度时,营养物质就不能按浓度梯 度扩散但细胞内,而是逆浓度梯度被 “抽”进细胞内。这种逆浓度梯度积累营养物质的过程,叫主动 运输。基团转位是由一种需要代谢能量
40、的运输方式。通过基团转位进入细胞的物质有糖、嘌呤、嘧啶、 乙酸等。 20. 什么叫新陈代谢? 答:微生物从外界环境中不断的摄取营养物质,经过一系列的生物化学反应,转变成细胞的组分,同 时产生出废物并排泄到体外,这个过程叫新陈代谢。 21. 微生物呼吸作用的本质是什么?可分为哪几种类型?各类型有什么特点? 答:微生物呼吸作用的本质是氧化与还原的统一过程,这过程中有能量的产生和转移。微生物呼吸作 用的可分为发酵、好氧呼吸和无氧呼吸。发酵:在无电子受体时,微生物氧化一些有机物。有机物仅 发生部分氧化,以它的中间产物为最终电子受体,是放少量能量,其余的能量保留在最终产物中。好 氧呼吸:当存在外在的最终
41、电子受体 分子氧时,底物可全部被氧化成二氧化碳和水,并产生 ATP。无氧呼吸:在电子传递体系中,氧化NADH2 时的最终电子受体不是氧气,而是氧气以外的 无机化合物。无氧呼吸的氧化底物一般为有机物,如葡萄糖、乙酸和乳酸。它们被氧化成二氧化碳, 有 ATP 生成。 22. 葡萄糖在好氧条件下是如何氧化彻底的? 葡萄糖在好氧呼吸过程中,氧化分解分两个阶段:1. 葡萄糖经 EMP 途径酵解。这一过程不耗氧,形成中 间产物丙酮酸。2. 丙酮酸的有氧分解。氧化过程的一系列步骤总称为三羧酸循环(即 TCA)循环。 23. 什么叫底物水平磷酸化、氧化磷酸化和光合磷酸化? 基质(底物)水平磷酸化:厌氧微生物和
42、兼性厌氧微生物在基质氧化过程中,产生一种含高自由能的中 间体,如发酵中产生含高键能的 1,3-二磷酸甘油酸。这一中间体将高键能交给 ADP,使 ADP 磷酸化而 生成 ATP。 氧化磷酸化:好氧微生物在呼吸时,通过电子传递体系产生 ATP 的过程。 光合磷酸化:光引起叶绿素、菌绿素或菌紫素逐出电子,通过电子传递产生 ATP 的过程。 24. 何谓光合作用?比较产氧光合作用和不产氧光合作用的异同。 利用 CO2和 H2O 合成有机物,构成自身细胞物质,叶绿素是将光能转化为化学能的基本物质。 藻类光合作用细菌光合作用 微生物蓝细菌、真核藻类 紫硫细菌、绿硫细菌、紫色 非硫细菌 叶绿素类型 叶绿素
43、a(吸收红光) 、 b、c、d、e 细菌叶绿素(有些吸收远红 光) 光系统 1(环式光合磷酸化)有有 光系统 2(非环式光合磷酸化) 有无 产生氧有无 供氢体H2O H2S、H2、有机化合物(有 机光合细菌) 第五章 微生物的生长繁殖与生存因子 1微生物与温度的关系如何?高温是如何杀菌的?高温杀菌力与什么有关系? 答:温度是微生物的重要生存因子。在适宜的温度范围内,温度毎升高 10 摄氏度,酶促反应速度将提高 12 倍,微生物的代谢速率和生长速率均可相应提高。适宜的培养温度使微生物以最快的生长速率生长, 过高或过低的温度均会降低代谢速率和生长速率。 高温主要破坏微生物的机体的基本组成物质蛋白质
44、,酶蛋白和脂肪。 。蛋白质被高温严重破坏而 发生凝固,为不可逆变性,微生物经超高温处理后必然死亡。细胞质膜含有受热易溶解的脂类,当用超 高温处理时,细胞质膜的脂肪受热溶解使膜产生小孔,引起细胞内含物泄漏而死亡。 高温的杀菌效果和微生物的种类,数量,生理状态,芽孢有无及 pH 都有关系。 2什么叫灭菌?灭菌方法有哪几种?试述其优缺点。 答:灭菌是通过超高温或其他的物理、化学因素将所有的微生物的营养细胞和所有的芽孢或孢子全部杀 死。 灭菌的方法有干热灭菌法和湿热灭菌法。 湿热灭菌法比干热灭菌法优越,因为湿热的穿透力和热传导都比干热的强,湿热时微生物吸收高温 水分,菌体蛋白易凝固变性,所以灭菌效果好
45、。 3什么叫消毒?加热消毒的方法有哪几种? 答:消毒是用物理、化学因素杀死致病菌,或是杀死所有微生物的营养细胞或一部分芽孢。 方法有巴斯德消毒法和煮沸消毒法两种。 4嗜冷微生物为什么能在低温环境生长繁殖? 答:嗜冷微生物具备更有效的催化反应的酶,其主动传送物质的功能运转良好,使之能有效地集中必需 的营养物质,嗜冷微生物的细胞质膜含有大量的不饱和脂肪酸,在低温下保持半流动性。 5高温菌和中温菌在低温环境中的代谢能力为什么减弱? 答:在低温条件下,微生物的代谢极微弱,基本处于休眠状态,但不致死。嗜中温微生物在低于十摄氏 度的温度下不生长,因为蛋白质合成的启动受阻,不能合成蛋白质。又由于许多酶对反馈
46、抑制异常敏感, 很易和反馈抑制剂紧密结合,从而影响微生物的生长。处于低温下的微生物一旦获得适宜温度,即可恢 复活性,以原来的生长速率生长繁殖。 6细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、藻类和原生动物等的正常生长繁殖分别要求什么样的 pH? 答:大多数细菌、藻类和原生动物的最适宜 pH 为 6.57.5,它们的 pH 适应范围在 410 之间。放线菌为 7.58.0。酵母菌和霉菌在 36。 7试述 pH 过高或过低对微生物的不良影响。用活性污泥法处理污(废)水时为什么要保持在 pH6 以上? 答:(1) pH 过低,会引起微生物体表面由带负电变为带正电,进而影响微生物对营养物的吸收。(2) 过高 或者过低
47、的 pH 还可影响培养基中的有机化合物的离子作用,从而间接影响微生物。因为细菌表面带负电, 非离子状态化合物比离子状态化合物更容易渗入细胞。(3) 酶只在最适宜的 pH 时才能发挥其最大活性, 极端的 pH 使酶的活性降低,进而影响微生物细胞内的生物化学过程,甚至直接破坏微生物细胞。(4) 过 高或者过低的 pH 均降低微生物对高温的抵抗能力。 8. 在培养微生物过程中,什么原因使培养基 pH 下降?什么原因使 pH 上升?在生产中如何调节控制 pH? 答:微生物在培养基中分解葡萄糖,乳产生有机酸会引起培养基的 pH 下降,培养基变酸。微生物在含有 蛋白质、蛋白胨及氨基酸等中性物质培养基中生长
48、,这些物质可经微生物分解,产生 NH 和胺类等碱性 3 物质,使培养基 pH 上升。 在生产过程中,处理城市生活污水、污泥中含有蛋白质,可不加缓冲性物质。如果不含蛋白质、氨等物 质,处理前就要投加缓冲物质。缓冲物质有碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化铵及氨等。以碳酸氢 钠最佳。 霉菌和酵母菌对有机物具有较强的分解能力。pH 较低的工业废水可用霉菌和酵母菌处理,不需要碱 调节 pH,可节省费用。 9. 微生物对氧化还原电位要求如何?在培养微生物过程中氧化还原电位如何变化?有什么办法控制? 答:各种微生物要求的氧化还原电位不同。一般好氧微生物要求的 E 为+300+400mV;E 在+100mV
49、hh 以上,好氧微生物生长。兼性厌氧微生物在 Eh为+100mV 以上进行好氧呼吸,在 Eh为+100mV 一下时进 行无氧呼吸。专性厌氧菌要求 Eh为-200-250mV,专性厌氧的产甲烷菌要求的 Eh更低,为-300- 400mV,最适为-330mV。 在培养微生物的过程中,由于微生物繁殖消耗了大量氧气,分解有机物产生氢气,使得氢气还原电 位降低,在微生物对数生长期降到最低点。 氧化还原电位可用一些还原剂加以控制,使微生物体系中的氧化还原电位维持在低水平上。这类还原剂 有抗坏血酸、硫二乙醇钠、二硫苏糖醇、谷胱甘肽、硫化氢及金属铁。 10. 好氧微生物需要氧气作何用?充氧效率与微生物生长有什
50、么关系? 答:氧对好氧微生物有两个作用:(1) 作为微生物好养呼吸的最终电子受体;(2)参与甾醇类和不饱和脂肪 酸的生物合成。 充氧量与与好氧微生物的生长量、有机物浓度等成正相关性。 11. 兼性厌氧微生物为什么在有氧和无氧条件下都能生长? 答:兼性厌氧微生物既有脱氢酶也有氧化酶,所以,既能在无氧条件下,又能在有氧条件下生存。在好 痒条件下生长时,氧化酶活性强,细胞色素及电子传递体系的其他组分正常存在。在无氧条件下,细胞 细胞色素及电子传递体系的其他组分减少或全部丧失,氧化酶无活性;一旦通入氧气,这些组分的合成 很快恢复。 12. 专性厌氧微生物为什么不需要氧?氧对专性厌氧微生物有什么不良影响
51、? 答:因为专性厌氧微生物一遇到氧就会死亡。 在氧气存在时,专性厌氧微生物代谢产生的 NADH2和 O2反应生成 H2O2和 NAD,而专性厌氧微生物没 有过氧化氢酶,它将被生成的过氧化氢杀死。O2还可以产生游离 O ,由于专性厌氧微生物没有破坏 O 2 的超氧化物歧化酶而被 O 杀死。耐氧的厌氧微生物虽具有超氧化物歧化酶,能耐 O2然而他们缺乏氧 2 2 化氢酶,仍会被氧化氢杀死。 13. 紫外线杀菌的机理是什么?何谓光复活和暗复活现象? 答:紫外辐射的波长范围是 200390nm,紫外辐射对微生物有致死作用是由于微生物细胞中的核酸、嘌 呤、嘧啶、及蛋白质对紫外辐射有特别强的吸收能力。DNA
52、 和 RNA 对紫外辐射的吸收峰在 260nm 处, 蛋白质对紫外辐射的吸收峰在 280nm 处.紫外辐射能引起 DNA 链上两个邻近的胸腺嘧啶分子形成胸腺嘧 啶二聚体,致使 DNA 不能复制,导致微生物死亡。 经紫外辐射照射的菌体或孢子悬液,随即暴露于蓝色可见光下,有一部分受损伤的细胞可恢复其活 力,这种现象叫光复活。在黑暗条件下修复 DNA 链称为暗复活。 14. 几种重金属盐如何起杀菌作用的? 答:重金属汞、银、铜、铅及其化合物可以有效的杀菌,它们都是蛋白质的沉淀剂。其杀菌机理是与酶 的-SH 基结合,使酶失去活性;或与菌体蛋白质结合使之变性或沉淀。 15. 氯和氯化物的杀菌机理是什么?
53、 答:氯和氯化物对细胞壁有较强的吸附穿透能力,可有效地氧化细胞内含巯基的酶,还可以快速地抑制 徽生物蛋白质的合成来破坏微生物。 16. 有哪几种有机化合物杀菌剂?它们的杀菌机理死是什么? 答:(1) 醇:醇是脱水剂和脂溶剂,可使蛋白质脱水,变性,溶解细胞质膜的脂类物质,进而杀死微生物 机体。(2) 甲醛:甲醛可与蛋白质的氨基结合而干扰细菌的代谢能力。(3) 酚:酚与其衍生物能引起蛋白 质变性,并破坏细胞质膜。(4)新洁而灭:是一种表面活性强的杀菌剂。对许多非芽孢型的致病菌、革兰 氏阳性菌及革兰氏阴性菌有着极强的致死作用。(5) 合成洗涤剂:去污能力强,还有杀菌作用。(6) 染料: 有抑菌作用。
54、 17. 为何渗透压?渗透压有与微生物有什么关系? 答:任何两种浓度的液体被半渗透膜隔开,均会产生渗透压。当两液面高差产生的压力足够阻止水在流 动时,渗透停止,这时出现的两液面高差间的压力就是渗透压。 在等渗透压中的微生物生长得很好,在低渗透压中溶液中的水分子大量渗入微生物体内,使微生物 发生膨胀,严重者破裂,在高渗透压溶液中,微生物体内水分子大量渗到体外,使细菌质壁分离。 18. 水的活度与干燥对微生物有什么影响? 答:大多数股微生物在 a为 0.950.99 时生长最好。嗜盐细菌属的细菌很特殊,它们在低于 0.80 的含 w NaCl 的培养基中生长最好。少数霉菌和酵母菌在 a为 0.60
55、0.70 时仍能生长。在 a为 0.600.65 时大多 ww 数微生物停止活动。 干燥能使细菌体内的蛋白质变性,引起代谢活动停止,所以干燥会影响微生物的活性以及生命力。 19. 何谓表面张力?它对微生物有什么影响? 答:表面张力是分子力的一种表现。它发生在液体和气体接触时的边界部分。是由于表面层的液体分子 处于特殊情况决定的。液体内部的分子和分子间几乎是紧挨着的,分子间经常保持平衡距离,稍远一些 就相吸,稍近一些就相斥,这就决定了液体分子不像气体分子那样可以无限扩散,而只能在平衡位置附 近振动和旋转。在液体表面附近的分子由于只显著受到液体内侧分子的作用,受力不均,使速度较大的 分子很容易冲出
56、液面,成为蒸汽,结果在液体表面层(跟气体接触的液体薄层)的分子分布比内部分子分布 来得稀疏。相对于液体内部分子的分布来说,它们处在特殊的情况中。表面层分子间的斥力随它们彼此 间的距离增大而减小,在这个特殊层中分子间的引力作用占优势。因此,如果在液体表面上任意划一条 分界线 MN 把液面分成 a、b 两部分,如图所示。F 表示 a 部分表面层中的分子对 b 部分的吸引力,F6 表 示右部分表面层中的分子对 a 部分的吸引力,这两部分的力一定大小相等、方向相反。这种表面层中任 何两部分闻的相互牵引力,促使了液体表面层具有收缩的趋势,由于表面张力的作用,液体表面总是趋 向于尽可能缩小,因此空气中的小液滴往往呈圆球形状。 表面张力是润湿的函数。如果细菌不被液体培养基润湿,它们将在表面生成一层薄菌膜。如果它们 被润湿,则在培养基中均匀生长、培养基变混浊。若要使那些在液体培养基中均匀生长的细菌呈膜状生 长,则可增加类脂质含量,保护菌体不受润湿,细菌则可呈膜状生长。 20. 抗生素是如何杀菌和抑菌的? 答:
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