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文档简介
1、生物信息学在园林植物的应用拟南芥MYB基因生物信息学分析MYB类转录因子家族是指含有MYB结构域的一类转录因子。MYB结构域是一段约51-52个氨基酸的肽段,包含一系列高度保守的氨基酸残基和间隔序列。其功能是参与植物苯丙烷类次生代谢途径的调节,苯丙烷类代谢是植物主要的3条次生代谢途径之一,它起始于苯丙氨酸,经过几个共同步骤后,分成两个主要分支途径,其中一条分支称为黄酮类代谢途径 ,主要与植物色素合成相关。R2R3-MYB转录因子作为调节蛋白广泛参与苯丙烷类代谢途径的调控。 从NCBI中调取MYB转录因子的DNA序列:gi|ref|NM_.4| Arabidopsis thaliana myb
2、family transcription factor mRNA, complete cdsTTTCTCTCACTTTCCCGGGAAAATCGGCGACCAAAATTGGAAAATGTACTCAGCGATTCGCTCGCTTCCACTCGATGGTGGACACGTTGGTGGTGACTACCATGGACCTCTTGACGGAACCAATCTTCCCGGTGACGCTTGTTTGGTTTTAACGACTGACCCTAAACCTCGTCTCCGGTGGACAACTGAGCTTCATGAGAGATTCGTTGACGCCGTTACTCAGCTCGGTGGTCCTGACAAAGCGACTCCCAAAA
3、CTATTATGAGAACAATGGGAGTGAAGGGTCTCACTCTCTACCACCTCAAATCACATCTTCAGAAATTCCGCCTAGGGAGGCAAGCTGGCAAAGAATCAACTGAGAACTCTAAAGATGCTTCTTGTGTAGGGGAGAGTCAGGACACAGGTTCATCTTCGACATCATCAATGAGAATGGCGCAGCAGGAGCAGAACGAGGGTTACCAAGTCACCGAAGCTCTACGTGCTCAGATGGAAGTCCAAAGAAGACTACACGATCAATTGGAGGTGCAACGGAGGCTCCAGCTGAGGATAGAGGCAC
4、AAGGAAAATACCTGCAATCGATTCTTGAAAAAGCTTGCAAGGCCTTTGACGAGCAAGCTGCTACTTTTGCTGGACTTGAGGCTGCTAGGGAAGAGCTATCAGAGCTAGCCATCAAAGTCTCCAATAGCTCTCAAGGAACATCAGTCBLAST(/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch&BLAST_SPEC=OGP_3702) 将MYB基因序列和拟南芥基因组序列进行BLAST分析,发现其与拟南芥3号染色体完全吻合。Graphic SummaryPromote
5、r Scan(/molbio/proscan/) 采用Promoter Scan预测其启动子区域,结果并未发现启动子区域。CpGplot(http:/www.ebi.ac.uk/Tools/seqstats/emboss_cpgplot/)采用CpGplot分析MYB基因,发现CpG岛一处,长度为208bp,位置为50-257。CPGPLOT islands of unusual CG compositionNM_.4 from 1 to 1110 Observed/Expected ratio 0.60 Percent C + Perce
6、nt G 50.00 Length 200 Length 208 (50.257)蛋白质序列分析拟南芥MYB基因编码氨基酸比较多,从NCBI调取其相关序列如下:gi|emb|CAA90748.1| MYB-related protein Arabidopsis thalianaMGRRPCCEKIGLKKGPWSAEEDRILINYISLHGHPNWRALPKLAGLLRCGKSCRLRWINYLRPDIKRGNFTPHEEDTIISLHQLLGNRWSAIAAKLPGRTDNEIKNVWHTHLKKRLHHSQDQNNKEDFVSTTAAEMPTSPQQQSSSSADISAITTLGNNND
7、ISNSNKDSATSSEDVLAIIDESFWSEVVLTDCDISGNEKNEKKIENWEGSLDRNDKGYNHDMEFWFDHLTSSSCIIGEMSDISEFMVQTETDQRMGLNLNLSIYSLPKPLSQFLDEVSRIKDNHSKLSEIDGYVGKLEEERNKIDVFKRELPLCMLLLNEEIVFLCVAIGALKDEARKGLSLMASNGKFDDVERAKPETDKKSWMSSAQLWISNPNSQFRSTNEEEEDRCVSQNPFQTCNYPNQGGVFMPFNRPPPPPPPAPLSLMTPTSEMMMDYSRIEQSHHHHQFNKPSSQSHHIQK
8、KEQRRRWSQELHRKFVDALHRLGGPQVATPKQIRDLMKVDGLTNDEVKSHLQKYRMHIRKHPLHPTKTLSSSDQPGVLERESQSLISLSRSDSPQSPLVARGLFSSNVGHSSEEDEEEEDEEEEKSDGRSSCRNDETKKKRQVLDLEL蛋白质一级结构分析ProtParam(/protparam/)蛋白质序列太短?没有得出结果ProtScale(/protscale/)应用ProtScale绘制拟南芥蛋白序列的亲疏水性序列谱,使用的氨基酸标度(amino a
9、cid scale)为Hphob./Kyte & Doolittle算法(默认值),该算法通过已知的20种氨基酸的亲疏水标度定义蛋白质序列的亲疏水性,score(分值)0表示亲水性,score0表示疏水性,其中score1.5表示高疏水性。窗口尺度(window size)为9。蛋白质二级结构分析PSIPRED(http:/bioinf.cs.ucl.ac.uk/psipred/)应用PSIPRED预测拟南芥蛋白序列二级结构,下面为图形分析结果。图中,C代表无规则卷曲,用横线表示;E代表折叠,用黄色箭头表示;H代表螺旋,用粉色圆柱体表示;Conf.表示可信度(confidence),用蓝色方柱
10、表示,柱体越高,说明可信度越大;Pred.表示为预测的蛋白质二级结构。COILS(/software/COILS_form.html)应用COILS预测牛ARF1蛋白序列的卷曲螺旋(coiled-coil)。卷曲螺旋区域一般是由abcdefg等7个残基(heptad)为单位,因此窗口宽度(window width)一般为7的倍数,如14、21、28。默认选择全部窗口搜索,矩阵(matrix)选择为MTIDK(默认值),结果可见6个卷曲区域(score0.1),位于150-200,220-280,300-400,420-450,500-530,600-650。蛋白质三级结构分析Pfam(/search)应用Pfam对拟南芥MYB蛋白进行结构域分析,结果与Pfam-A数据库有3个结构域家族匹配。InterProScan 4(http:/www.ebi.ac.uk/Tools/pfa
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