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文档简介
实验八,重组质粒的酶切鉴定,一、实验目的,学习和掌握重组质粒的少量酶切、电泳及分析插入DNA片段的大小,二、实验原理,EcoRI 30, 50,(2) 双酶切反应,EcoRI 37, 50,2. 凝胶电泳检测,0.8%Aga,30ml TAE,煮沸 冷却至55,2l EtBr 倒胶,插梳子,凝固20 2l上样液+样品 100V电泳,观察,酶切失败的可能原因,不全切或基本未切 缓冲体系不合适 酶量过多 样品杂质含量高 DNA被降解 痕量DNase,注意事项,吸量要准确 最后加酶 冰上操作 勿触管盖内面 EP管盖严,五、作业,思考题P140 2、5,
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