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文档简介

1、第8章: 细菌感染的检查 方法与防治原则 Diagnosis and control for bacterial infection,病原菌的检查程序,直接涂片镜检,初步诊断,分离培养,标本,生化试验,血清学试验,动物试验,药物敏感试验,明确诊断,其他检测法,抗原检测,一)标本的采集和运送原则,避免杂菌污染,运送注意保存,不同期不同标本,用抗菌药物以前,采集病变明显部位,标本必须新鲜,第一节 细菌感染的检查,胆囊标本:在外科胆囊摘除手术中,采集胆囊炎患者的胆囊和胆石标本,二)细菌分离培养与鉴定 形态学检查: 形态与染色性具有特征的病原菌可直接染色镜检 直接涂片镜检 不染色法: 悬滴法,压滴法

2、暗视野显微镜、相差显微镜 染色法 革兰染色 Gram stain 抗酸染色 acid-fast stain 荧光显微镜,悬滴法,镜检,革兰阳性菌,革兰阴性菌,淋病患者尿道分泌物直接涂片镜检,2.分离培养(isolation and cultivation): 诊断的金标准,是最可靠的传统诊断技术,病原菌的分离培养:菌落,大小 形态 颜色 表面性状 透明度 溶血性,血琼脂平板上分离的菌落 取单个菌落,可获得细菌 的纯培养物,3.生化试验: 针对一个细菌菌落或纯培养物进行鉴定,生化反应,糖发酵试验 H2S试验 枸橼盐利用试验,靛基质试验,4.血清学试验:用已知抗体检测未知细菌抗原,进行群和型的鉴别

3、。 最简易的方法有玻片凝集等试验,玻片凝集,5.动物实验,常用动物 小鼠豚鼠家兔 接种途径 皮内 皮下腹腔静脉 脑内鼻腔灌胃,豚鼠:适用于白喉棒状杆菌、钩端螺旋体、结核分枝杆菌、恙虫病立克次体等病原体的分离培养或毒力检测,6.药物敏感试验,方法 纸碟法、试管法、小杯法和凹孔法 最低抑菌浓度(MIC) 最低杀菌浓度(MBC,三)病原菌抗原的检测: 用已知抗体检测未知抗原 EIA 酶免疫技术 协同凝集试验 SPA IF 免疫荧光技术 CIE 对流免疫电泳 免疫印迹技术 WB,ELISA,direct,indirect,Fluorescence Microscopy,四)检测病原菌核酸 分子生物学技

4、术 molecular biological techniques 1,核酸杂交(nucleotide hybridization) 2,多聚酶链反应 (polymerase chain reaction: PCR):一种无细胞的分子克隆技术,能在体外将一个基因或一段DNA 序列经过多次循 环的DNA复制,在数小时内扩增上百万倍。既便于基因诊断,又利于 研究。 3,基因芯片(gene chips,PCR仪,DNA的PCR扩增 产物电泳结果 (EB染色,基因芯片(microarray chip,二、血清学诊断 用已知细菌或其Ag检测相应的Ab及量的多少,作为某些病原菌感染的辅助诊断 急性期和恢复

5、期双份血清, 若恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高 4倍,有诊断价值。 方法:玻片或试管凝集试验、沉淀试验、补体结合试验和冷凝集试验,细菌感染的实验诊断方法,获得性免疫产生的方式,主动免疫 自然免疫 患病、隐性感染 人工免疫 疫苗、类毒素 被动免疫 自然免疫 胎盘、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球,人工免疫,基本概念:人工方法给机体接种疫苗、抗血清、淋巴因子等,使机体获得特异性免疫力。 常用方法:包括:人工主动免疫,人工被动免疫,过继免疫,细菌感染的特异性预防,一、人工主动免疫:将疫苗或类毒素接种于人体 (一)疫苗:死疫苗.减毒活疫苗.亚单位疫苗.重组载体疫苗.基因工程疫苗.核酸疫苗 (二)类毒素 二、人工被动免疫:注射含有特异性抗体的免疫血清 或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等免疫制剂. 抗毒素 血清丙种球蛋白 其他免疫制剂:IFN-,CSF等,生物制品:用于人工免疫的疫苗、类毒素、免疫血清、细胞制剂以及诊断用品等的生物性制剂。 疫苗:是利用微生物及其代谢产物,经过人工减毒或灭活或基因工程等方法方法制成,用于预防疾病的自动免疫制剂,第一代疫苗: 活疫苗 、死疫苗 第二代疫苗: 亚单位疫苗、基因工程疫苗 第三代疫苗: 核酸疫苗,死疫苗与活疫苗的区别,人工主动免疫与人工被动免疫的区别,第三节 细菌感染的治疗,一、抗菌药物的种类 二、抗菌药物的主要作用机制,名词解释: 疫

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