第三章 紫外可见分光光度法

1、第三章 紫外-可见分光光度法,一、紫外-可见吸收光谱 二、影响紫外-可见光谱的因素 三、Lambert-Beer定律,四、 分光光度计的类型,UV-1240(单光束）,UV-2450/2550,单波长双光束分光光度计的优缺点,1 .补偿了仪器不稳定性的影响，开机即可进行测量； 2 .实现了快速自动吸收光谱扫描； 3 .不能消除试液的背景成分吸收干扰。,3、双波长分光光度计 将不同波长的两束单色光(1、2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。,4、光导纤维探头式分光光度计,五、紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用,分光光度法是药物分析中应用较多的一类方法，大多数药物对紫外光有吸收，在规定的

2、溶剂中测定吸收峰、谷的波长和一定浓度溶液的吸收度可作为鉴别和定量的依据。,Fig. 3. UV absorption spectra and linearity. (A) UV absorption spectra of -PGA aqueous solutions with different concentrations (B) The linear range of -PGA (201000 g/ml in deionized water).,双波长分光光度法测定乳酸环丙沙星滴眼液的含量,环丙沙星在277.0 nm处有最大吸收,确定为测定波长。 干扰组分与277.0 nm处等吸收的波长经

3、测定为233.8 nm,作为参比波长。 测定A。,导数光谱法,导数光谱法也称微分光谱法，通过在分光光度法中引入微分技术，扩展了分光光度法的应用范围。导数光谱法具有加强光谱的精细结构和对复杂光谱辨析能力的特点,是解决光谱干扰的又一种技术。它的应用研究在近年来国内外药物分析文献中占有较大的比例,主要应用于药物制剂的含量测定、质量控制等。,一阶导数光谱法测定氯霉素滴眼液中氯霉素的含量,在一阶导数的光谱图中,氯霉素在300 nm的波长处有一明显的吸收峰,在此波长处,基质及其他成分吸收值基本与基线重合。,回收率：99.9% （n=5） RSD：1.2%,Biosensors and Bioelectro

4、nics 25 (2010) 19221927,Biosensors and Bioelectronics 25 (2010) 19221927,Chem. Commun., 2008, 22422244,Figure 2. TEM showing the effect of 1.67 10-3M NaBH4 on Au nanorods. Adding reducing agent to the nanorods solution changes the aspect ratio from 1.8 to 1.6. Each picture is a representative image of the average size distribution of a nanorods solution.,Figure 3. UV-visible absorption spectra showing the spectral s