44 饲料中粗脂肪的测定

1、4.4 4.4 饲料中粗脂肪的测定饲料中粗脂肪的测定 索氏提取法索氏提取法 江西农业大学动物科技学院江西农业大学动物科技学院 5/13/2021 前言前言 脂类（lipid）亦译为脂质，是一类不溶于 水而能溶于非极性溶剂的生物有机分子。 其化学本质是脂肪酸和醇所形成的酯类 及其衍生物。 脂类的元素组成主要是c h o,有些尚含n s p。 5/13/2021 前言前言 按化学组成分类: 单纯脂类 脂肪（脂肪（fatfat）: :甘油三酯（三酰甘油) 蜡蜡（是长链脂肪酸和长链一元醇或固醇形成的酯） 复合脂类 磷脂磷脂（含磷酸和含氮碱） 糖脂糖脂（含糖） 硫脂硫脂（含硫酸） 衍生脂类（类脂）：由单

2、纯脂类或复合脂类衍生而来或与它们关系密切。 萜类：萜类：天然色素、香精油、天然橡胶 固醇类：固醇类：固醇（甾醇、性激素、肾上腺皮质激素） 其他类脂：其他类脂：维生素a、d、e、k等。 5/13/2021 前言前言 粗脂肪粗脂肪（crude fat 或或ether extract，ee） 饲料中可以溶于脂溶性溶剂（乙醚、石油醚、氯仿等） 的物质总称，除包括脂肪外，还包括可溶于乙醚的其它有 机物质，如游离脂肪酸、有机酸、腊质、固醇类、脂溶性 维生素、色素等，故称为粗脂肪或乙醚提取物。 同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能 直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法游离脂类定量测定法。

3、 测定方法：测定方法：油重法、残余法、水解法。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 1 1适用范围适用范围 适用于多种单一饲料、混合 饲料、浓缩饲料和配合饲料的 分析。 2 2原理原理 索氏（soxhlet）脂肪提取器 中用乙醚反复反复浸提饲料样品， 使其中脂类物质溶于乙醚，并 收集于盛醚瓶中，然后将所有 的浸提溶剂加以蒸发回收，直 接称量盛醚瓶中的脂类物质重， 即可计算出饲料样品中的粗脂 肪含量。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 2 2原理原理 它是利用溶剂的回流回流和虹吸虹吸原理， 对固体混合物中所需成分进行连续 提取。当抽提

4、管中回流下的溶剂的 液面超过索氏提取器的虹吸管时， 抽提管中的溶剂流回圆底烧瓶内， 即发生虹吸。随温度升高，再次回 流开始，每次虹吸前，固体物质都 能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利 用，缩短了提取时间，所以萃取效 率较高。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 3. 3. 试剂试剂 无水乙醚或石油醚（分析纯） 4. 4. 仪器设备仪器设备 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 4 4测定步骤测定步骤 （1）索氏提取器应干燥无水索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在 1052烘箱(4.5)中烘干60min，干燥器中冷却30min，称

5、 重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于 0.0008g为恒重。 （2）称取试样15g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或 用滤纸包好并标号，放入105烘箱中，烘干烘干120min（或 称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒滤纸筒应高于高于 提取器虹吸管的高度（？），滤纸包长度滤纸包长度应以可全部浸泡全部浸泡 于乙醚中为准。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 4 4测定步骤测定步骤 （3）用长镊子将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60 100ml（抽提瓶容积的2/3），在6075的水浴(用蒸馏水)上加热，使乙 醚回流，控制乙醚回

6、流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试 样约70次)或用滤纸点滴检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提用滤纸点滴检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提 终点。终点。 （4）取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽 提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入1052烘箱 中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重 ， 两次重量之差小于0.001g为恒重。 抽提瓶增加的重量即为粗脂肪重量。抽提瓶增加的重量即为粗脂肪重量。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 5 5测定结果的计算测定结果的

7、计算 计算见下式： 粗脂肪()(m2m1)m100 式中：m 风干试样重量，g； m1已恒重的抽提瓶重量，g； m2已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。 6 6重复性重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10以上(含10)允许相对偏差为3。 粗脂肪含量在10以下时，允许相对偏差为5。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 操作中应注意的问题：操作中应注意的问题： 测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理脱水处理。（为（为 什么，大家想想！）什么，大家想想！） 这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶 出，导

8、致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易 被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2的水），从而影响抽提效率； 第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易 将脂肪抽提干净。脱水处理！脱水处理！ 试样粗细度要适宜。试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末 过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。 适宜的样品粉碎粒度！适宜的样品粉碎粒度！ 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 操作中应注意的问题：操作中应注意的问题： 将称好的样品转移到定性滤纸上打包，并用脱脂棉线扎 紧。扎包扎包 在包好样品的定性滤纸外面，用铅笔标记样品号

9、。记号记号 不要用油笔或钢笔等标记，以免被乙醚冲洗掉。不要用油笔或钢笔等标记，以免被乙醚冲洗掉。 滤纸包放入抽提管中时，不能超过虹吸管上端。 抽出的油应是清亮的。否则应重做。 5/13/2021 一、油重法测粗脂肪含量一、油重法测粗脂肪含量 操作中应注意的问题：操作中应注意的问题： 取出滤纸包放入相应铝盒中，在室温通风口处使乙醚挥 发，不要立即放入不要立即放入(105(1052)2)烘箱中烘干烘箱中烘干，否则会引起 燃烧。 *必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存 在或用明火加热，保持室内良好通风！在或用明火加热，保持室内良好通风！ 否则否则 5/13/2021 二、残余法测粗脂肪含量二、残余法测粗脂肪含量 1 1原理原理 用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样 品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，来计算粗脂肪含 量。 2 2步骤步骤 按油重法（1）、（2）、（3）操作。当脂肪浸提干净 后取出小包，置于干净表面皿上凉干凉干2030min，然后装 入同号码称量瓶中，置1052烘箱内烘至恒重。 需要称量抽提需要称量抽提 瓶重量吗？瓶重量吗？ 5/13/2021 二、残余法测粗脂肪含量二、残余法测粗脂肪含量 3 3计算计算 粗脂肪()(m2m1)m100 式中：m1为装有试样滤包或筒浸提前烘干