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文档简介
1、用。均。7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项;实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用,凸盖PCR管禁止使使用8联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撐,以防止板槽受力不实验数据用光盘刻录,禁止U盘拷取,数据可暂存于本机电脑硬盘中,各实验室D盘中有指定文件夹,中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中操作步骤开机依次打开电脑显示屏、主机,输入开机密码“7500”。待电脑启动稳定后,按压7500仪器电源按扭,等待仪器启动(约30s)a当仪器只显示Power状 态指示灯时,方可按压托盘 以打开它放入反应板注:关闭仪器
2、托盘时,应按一个角度推压托盘的右侧(以下过程按字母顺序a-q进行操作)创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件;在对话框中选择Create New Documentf或选择菜单栏File New;a 从 Assay F 拉 列表中选择反应板类型.反臧板文件类型有以下几种:1. Relative Quantification (ddCt) Plate i(相对定虽)1I2. Absolute Quantrfication (Standard :、Curve)(纳对定虽:.标准曲线):M Allelic Discrimination (等位基丙鉴: 别J4. Plus/Mmus (
3、阳性/阴性实验)!b. 为反应板文件命名二Herno-ePassiye fleleiencc;(RDXL*J 一New Document WijordDetectws in DosurrentRNcP1Selec! DetecforsSelect ihe da&Jtors yuu wil be using iri the ducuTiertFind:die亠TACR2FAM(noneRXRAFAM(nmelRrMasePSPAMncnelRNase: P 2FAM(nonojRNase P1FAM(neneRAR3FAMtncne;RFAFAM(none;PTGFRFAM(nene:NF1FA
4、M(riaie;NCAM1F.A.M(nonKAI1FAM(non/I PC riFiprnrInternal Pns:lt;v VICridDetecior 附mt | DEScriptkMi | ReporterQd. 选择要添加 到反应板文件的探针 (引物h单击Add添 加选中探针Canede. 如果在列表 中未列出所需採针,请 单击 New Detector 创 建新探针itf Next为每个反应孔指定探针和任务New Dwumem Wizo rd工5orap $qnvlc Pkitc亠一 1JSEtup :he sa-pfe pa:9tfi tao$, giferttiee andd
5、=tectZK.Uee IDolBCiar /Itepanar1 auBnc4)B凶mK1 Color 1 入 .1 - - -*_- NV - AlB* 一 - -*(nF:ACVR1(none)FAMpM泅(w:MMMiaaHzry=L为反应孔设置样品名Target! Target各选取探针相同的反应孔h.点击反应孔对应的探针Fi单击Task栏的下边 指進探针任务&j选择U坯(使用)。lc单击Finish (完成S3copy6E1/Setup/Flatt8*7500 System SDS So.ftvajTe - Jlahl i;5tfir.dara CtireelJ.童 Eie View
6、 Tools Instrument Analysis-独indoc Help I DsPH aai0 ?1Instrunent YRestrpnsI K| bLUZflHLIH1 w w. :r.J 厂 T r.9Expon祜応口ExportPov/eroirtExpon AlVa PowerPCCtrGlCtrlCTJrUvI.选取反应孔,宜接 输入根应样品名(也可 右键.调出反Well Inspector对话框,在 Sample Name屮进行修 改)设定PCR循环参数.运行程序stimatud Tin-:jlcStep園叵盂1 El *9 ?童75tom scs soft/Ad renp
7、erituri?- 5in pl*: Covat-I S(4As:-CycleStQigQ::Rep:7herrr.?J Cycler FrntDrolTittiriTiProfilii Aato Inct-eTicnt &曲p KolUStane I 加弊MSffloe ?Rc|: F1 LA4St At*2:MnSflVLicj Sanplti WJunp莎Eum. Fl&de|0WOO|Stuiard *?500Ajdd Cycled Add. Hold.Collfidtion : jstifo 3? StQp 2(60.D (2 1.00) V|m” 选 择Instrument选项卡,默 认条件F显示标准 PCR条件,可跟据实脸 具体情况修改:n.单击 Add Dissociation Stage 添加 浴解曲线循环;o.修改PCR反 应体积;p.将反应板文 件保存至指窪路径。q.点击 Start 运
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