



下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、常用生化试剂品名Tris : Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 分 子 式 : NH2C(CH2OH)3 分 子 量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液,常配成 PH 值为 6.8, 7.4,8.0, 8.8。 其 PH 值随温度变化很大。一般来说,温度每升高一度, PH 值下降 0.03 。EDTA : Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸 分 子 式 : C10H16N2O8 分 子 量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌 合
2、物, EDTA 在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。尿素 : (脲 碳酰胺 ; 碳酰二胺脲) 尿素: 脲 ; 碳酰胺 碳酰二胺脲) Urea ( 分 子 式: CH4N2O 分 子 量: 60.05 尿素易溶于水,在 20时 100 毫升水中可溶解 105 克。SDS: dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠 : 分 子 式 : C12H25SO4Na 分 子 量: 288.38 溶解性: 溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。 健康危害: 对粘膜和上呼吸道有 刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。可引起呼 吸系统过敏性反应。 SDS 是一种已知的能 够使蛋
3、白质变性的去污剂。 它用于确定蛋白分子量的聚丙烯 酰胺凝胶电泳。 它也可以用于 核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合 物。在乳液聚合反应中,可充当两相溶 液的乳化剂。DTT :DL-Dithiothreitol 二硫苏糖醇 分子式为 C4H10O2S2 ,分子量为 154.25 常用还原剂, 有抗氧化作用,进口分装。 DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但 DTT 的刺激性气味要小 很多,毒性也比巯基乙醇低很多。 DTT 的用途之一是作为巯基化 DNA 的还原剂和去保护 剂。巯基化 DNA 末端硫 原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。 这种二聚化大大 降低了一些偶联反
4、应实验(如 DNA 在生物感应器中的固定)的效率;而 在 DNA 溶液中加入 DTT , 反应一段时间后除去, 就可以降低 DNA 的二聚化。 DTT 也 常常被用于蛋白质中二硫键的还原, 可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形 成的蛋白质 分子内或分子间二硫键。但 DTT 往往无法还原包埋于蛋白质结构内 部(溶剂不可及)的 二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温 。反之,根据 DTT 存 加热或 加入变性剂,如 6M 盐酸胍、 8M 尿素或 1% SDS ) 在情况下,二硫键还原速度的不同, 可以判断其包埋程度的深浅。 1mol/L 二硫苏糖醇(DTT ) 溶液 【配制方法】用
5、20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶 液(pH5.2)溶解 3.09g DTT ,过滤除菌后 分装成 1ml 小份贮存于 -20 。 DTT 或含有 DTT 的溶液不能进行高压处理。CHAPS : 3-(3-胆固醇氨丙基 二甲基氨基 : 胆固醇氨丙基 )二甲基氨基 胆固醇氨丙基 二 甲基氨基 -1-丙磺酸 丙磺酸 分子式为 C32H58N2O7 ,分子量为 614.88 两性表面活性剂, CHAPS 是一种非变性的 zwitterionic 去垢剂、 蛋白质裂解 液,用于增溶膜蛋白和裂解蛋白 -蛋白之间的相互作用。 CHAPS 是两 性离子去垢剂,分子结构中具有一个胆酸和硫代甜 菜碱。在紫外
6、区的低吸 光性成为用紫外方法检测膜蛋白的首选去垢剂, CMC 值均为 8 mM 。常用 于于双向电泳等实验。 原理:CHAPS 保护蛋白质的天然状态, 可溶 解膜蛋白, 从而解除蛋白与蛋白质间的相互作用。透析可除去。PMSF : Phenylmethanesulfonyl fluoride , 也 称 Phenylmethylsulfonyl fluoride , 或 -Toluenesulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟 分子式为 C7H7FO2S,分子量为 174.19 1 ) 抑制 丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋 白酶(如木瓜蛋白酶) ; 2) 10m
7、g/ml 溶于异丙醇(或无水乙醇)中;它对异丙醇没有特殊要求,分 析纯即可,它 也可以用 DMSO 进行配置,储存浓度同样为 100mM 3 )在室温可保存一年 ,一般保存在 -20 度或 4 度.; 4) 工作浓度: 17174ug/ml (0.11mM ) ,储存液浓度为 100 或 200mM ; 5) 在水液体溶液中不稳定, 30 分钟就会降解一半, 必须在每一分离和纯 化步骤中加入新 鲜的 PMSF,样品处理超过 1h,补加一次。 (见水分解,使用 前加入)NOTES : : 1. PMSF 剧毒,严重损害呼吸道粘膜、 眼睛及皮肤, 吸入、吞进或通过皮肤 吸 收后有致命危险。为了安全
8、和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 一旦眼睛或皮肤接 触了 PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被 PMSF 污染的 衣物应予丢弃。 2. PMSF 在水 溶液中不稳定。 应在使用前从贮存液中 3. PMSF 在水溶液中的活性丧失速率随 pH 为碱性 现用现加于裂解缓冲液中。值的升高而加快,且 25的失活速率高于 4。 pH 值为 8.0 时, 20mmol/l PMSF 水溶 液的半寿期大约为 85min,这表明将 PMSF 溶液调节 (pH8.6 )并在室温放置数小时后, 可安全地予以丢弃。 存: 2-8可以存放数月之久。欲长期保存,可冻存在-20 PMSF 的储APS: ammoniu
9、m persulfate 过硫酸铵 : 分子式为 (NH4)2S2O8 ,分子量为 228.20 健康 危害: 对皮肤粘膜有刺激性和腐蚀性。吸入后引起鼻炎、喉炎、气短 和咳嗽等。眼、皮肤 接触可引起强烈刺激、疼痛甚至灼伤。口服引起腹痛、 恶心和呕吐。长期皮肤接触可引起 变应性皮炎。 燃爆危险: 本品助燃,具腐蚀性、刺激性,可致人体灼伤。TEMED : N,N,N,N-Tetramethylethylenediamine N,N,N,N- 四甲基乙二胺 四甲基乙二胺 分 子式: (CH3)2NCH2CH2N(CH3)2 ,分子量为 116.20。 用于配制 PAGE 胶等。 TEMED 可 以催
10、化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙 烯酰胺凝胶的聚合。 保存条件: 4保存。 注 意事项: 易燃,有腐蚀性。易挥发,使用后盖紧瓶盖。穿实验服戴一次性手套操作。 巯基乙醇 : ME 或 ME 巯基乙醇: 分子式为 HOCH2CH2SH 分子量 78.1 挥 发性液体, 具有较强烈的刺激性气味。 ME 通常用于二硫键的还原, 可 以作为生物学实验 中的抗氧化剂。它被广泛使用的原因是它的羟基使它能 够溶解于水中,并且降低它的挥发 性。具有特殊臭味的无色透明液体,易 溶于水、苯和醇。 由于 -巯基乙醇能够打开蛋白 质的结构,它常常被用于蛋白质分析。而 巯基乙醇也常常被用于保护蛋白质中自由的半胱氨酸巯基之
11、间不会错误形 成二硫键。 危险品! 经皮肤、吞咽吸收有致命危险; 刺激眼睛、 呼吸道粘膜,引起慢 性咽炎!Tris 饱和酚 一般 PH 大于 7.8,用于 DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使 细胞或组织中的蛋白质变性析出。 而 Tris 的主要作用是防治止酚类氧化, 若酚类氧化, 则会形成醌 (两个苯环) ,醌含有强自由基, 会破坏核酸结构。 同时, 由于 PH 值大于 7, 在碱性环境中 DNA 处于水相, RNA 处于有机相。 从而分离上清,即可得到 DNA 。 本 试剂是用 Tris-Cl pH8.0 饱和过的重蒸酚, 为浅黄色透明液体, 有刺激性 气味, 上层为 Tris
12、 盐酸缓冲液, pH7.8 ,溶液内加有抗氧化的 8-羟基喹啉。 本品适用于分离 DNA 。 注意事项: Tris 平衡酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。 如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。溴酚蓝 : Bromophenol blue;Albutest 分子式为 C19H10Br4O5S 同时形成溴酚蓝钠盐水溶 液。 用途】 pH 指示剂, pH=3.0 时呈黄色, pH=4.6 时呈蓝紫色。酸碱指示剂; 非水滴 定用指示剂,蛋白电泳染色;病毒化验等。1% 的溴酚蓝 将托盘天平上称取 1g 溴酚蓝定溶于 100ml 无水乙醇中, 转移入滴瓶中, 贴标签 备用。
13、0.05% 的溴酚蓝 配 western blot 用 的 2*SDS 上样缓冲液需要用到 0.1% 的溴酚蓝, 2-DE 中溴酚蓝 一般也是配成 0.1% 母液。 实际上,溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将 0.1g 溴 酚蓝溶于 100ml 水是有困难的。下 面是其较合适的配制方法: 0.05% 的溴酚蓝配 制方法:取溴酚蓝 0.1g,加 0.05mol/L 氢氧 化钠溶液 3.0ml 使溶解,再加水稀释 至 200ml,即得。变色范围 pH2.84.6(黄 蓝绿) 。 只是不知道加入 NaOH 会 不会影响 2-DE 实验。估计影响不大,因为指示剂用量毕竟很 少。 1溴酚蓝 加 1g 水溶
14、性钠型溴酚蓝于 100ml 水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 溴酚蓝 其钠盐易溶解在水里。考马斯亮蓝 :Coomassie brilliant blue 考马斯亮蓝有 G250 和 R250 两种。其中考马斯亮蓝 G250 由于与蛋白质的 结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝 R250 与蛋 白质反应虽然比较缓慢, 但是可以被洗脱下去, 所以可以用来对电泳条带 染色。甲醇 Methanol 分子式为 CH3OH 分子量 32.04 能与水、乙醇、乙醚、苯、酮、卤代烃和 许多其他有机溶剂相混溶,但是 不与石油醚混溶, 遇热、 明火或氧化剂易燃烧。 甲醇有较 强的毒性,对人体
15、的神经系统和血液系统影响最大,它经消化道、 呼吸道或皮肤摄入都会 产生毒性反应,甲醇蒸气能损害人的呼吸道粘膜和 视力。 分子量 670.02 溶解情况】 微 溶于水,易溶于甲醇、乙醇和苯,可自由溶于氢氧化钠溶液, 解毒方法 甲醇中毒,通常可以用乙醇解毒法。其原理是,甲醇本身无毒, 而代谢产物有毒,因此可以通过抑制代谢的方法来解毒。甲醇和乙醇在人 体的代谢都是同 一种酶,而这种酶和乙醇更具亲和力。因此,甲醇中毒者, 可以通过饮用烈性酒(酒精度 通常在 60 度以上)的方式来缓解甲醇代谢, 进而使之排出体外。而甲醇已经代谢产生的 甲酸,可以通过服用小苏打(碳 酸氢钠) 的方式来中和。 急性甲醇中毒
16、患者应及时送医院 抢救。误饮 甲醇者,早期可用苏打水洗胃,以排除甲醇在胃内的贮留。超过 3 日者, 可 用发汗剂及泻药。遇到视力紊乱时,应反复进行腰椎穿刺,以预防视神 经萎缩,并给以大 量维生素 B 族和血管扩张剂,或给以氧气吸入和少量多 次输血。也可采用针刺和中药等 治疗。丙烯酰胺 Acrylamide 分子式 CH2=CHCONH2 分子量 7108 人体可通过消化道、 呼吸道、 皮肤黏膜等多种途径接触丙烯酰胺,丙烯酰 胺进入体内又可通过多种途径被人体吸收,其 中经消化道吸收最快。进入 人体内的丙烯酰胺约 90%被代谢,仅少量以原形经尿液排出。 丙烯酰胺进 入体内后, 会在体内与 DNA
17、上的鸟嘌呤结合形成加合物, 导致遗传物质损 伤 和基因突变。丙烯酰胺具有神经毒性作用。神经毒性和生殖发育毒性。 丙烯酰胺在体内和 体外试验均表现有致突变作用,可引起哺乳动物体细胞 和生殖细胞的基因突变和染色体异 常,如微核形成、姐妹染色单体交换、 多倍体、非整倍体和其他有丝分裂异常等,显性致 死试验阳性。并证明丙 烯酰胺的代谢产物环氧丙酰胺是其主要致突变活性物质。硫脲 Thiourea ; Thiocarbamide ; 分子式 CH4N2S ; SC(NH2)2 溶于冷水、乙醇、微溶于 乙醚。 吸入、食入、经皮吸收。健康危害:本品反复作用时,可抑制甲状腺和造 血器官。 有可能引起变态反应。吸
18、入本品粉尘对上呼吸道有刺激性,出现 胸部不适、咳嗽等。对眼 有刺激性。口服刺激胃肠道。慢性影响:长期接 触出现头痛、嗜睡、无力、面色苍白、面 部虚肿、基础代谢降低、白细胞 减少等。对皮肤有损害,出现皮肤瘙痒、手掌出汗、皮炎 及皲裂等。碘乙酰胺 : iodacetamide, 2-Iodoacetamide 或 2-Iodoacetamide , 分子式为: C2H4INO5S , 储存温度: 2-8 分子量: 184.96 性质:白色至黄色结晶。熔点95。溶于热水,易 分子量 76.12溶于乙醇,冷藏保存。碘代乙酰胺用于有机合成,在蛋白组学中组氨酸和 半胱氨酸的烷基化试剂,用于多肽测序以及酶抑制剂等,蛋白组学级试剂。硫酸铵 : ammonium sulfate 化学式: (NH4)2SO4 出蛋白质等。 侵入途径: 吸入、 食入、 经皮吸收。 健康危害: 对眼睛、粘膜和皮肤有刺激作用。 皮肤接触: 脱去污染的衣着, 用大量流动清水冲洗。 眼睛接触: 提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入: 脱离现场至空气新鲜处。如呼吸困难,给输氧。就医。 食入: 饮足量温水,催吐。就医。T
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 2025年土木工程材料试卷及答案
- 2025年社区服务与发展相关考试试卷及答案
- 2025年机器学习工程师考试试题及答案的准备
- 2025年会计专业职称考试试题及答案
- 2025年经济法职业资格考试试题及答案
- 2025年高等数学研究生入学考试试卷及答案
- 语文学科:《高中文言文阅读教学方法设计》
- 我爱你我的家乡650字(11篇)
- 最美那老奶奶的心7篇范文
- 黄姑鱼苗种买卖合同书
- 《化疗药物不良反应处理》课件
- 校园食品安全和膳食经费管理突出问题专项整治工作方案范文
- 浙江杭州2025年公开招聘农村党务(村务)工作者笔试题带答案分析
- 锂电池、新能源汽车火灾事故灭火救援处置
- 上海宝山区公开招聘社区工作者考试高频题库带答案2025年
- 《老年服务礼仪与沟通》高职养老服务类专业全套教学课件
- 安全隐患的课件
- 小区安全隐患课件
- 国家安全共同守护-国家安全教育日主题班会课件-2024-2025学年初中主题班会课件
- 2025-2030中国倒装芯片球栅阵列行业市场现状供需分析及投资评估规划分析研究报告
- 机动车环检试题及答案
评论
0/150
提交评论