PCR引物设计实验_第1页
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文档简介

1、一、 实验目的 学习引物设计软件primerpremier5的基本使用方法。二、实验内容 1.从ncbi的数据库 查出hpv-16的e6 e7基因并存为plain text记事本格式。 2.下载并安装primerpremier5,导入key,激活软件.3.打开e6 e7基因序列,显示双链格式.翻译为蛋白序列.找出motif和酶切位点.4.进行primer search,找出sense、antisense及pairs最合适的引物.1.“premier”软件启动界面如下: 2.进行引物设计时,点击“premier”按钮,界面如下:3.进一步点击search按钮,出现“search criteria

2、”窗口,有多种参数可以调整。搜索目的(seach for)有三种选项,pcr 引物(pcr primers) ,测序引物(sequencing primers) ,杂交探针(hybridization probes) 。搜索类型(search type)可选择分别或同时查找上、下游引物(sense/anti-sense primer,或 both) ,或者成对查找(pairs) ,或者分别以适合上、下游引物为主(compatible with sense/anti-sense primer) 。另外还可改变选择区域(search ranges) , 引物长度 (primer length) , 选择方式 (search mode) , 参数选择 (search parameters)等等。使用者可根据自己的需要设定各项参数。如果没有特殊要求,建议使用默认设置。然后按 ,随之出现的 search progress窗口中显示 search completed 时,再按 ,这时搜索结果以表格的形式出现,有三种显示方式,上游引物(sense) ,下游引物(anti-sense),成对显示(pairs)。默认显示为成对方式,

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