生化检验质控

1、周晓云周晓云 质量控制（quality control，QC） 室内质控是由实验室的工作人员采用一系室内质控是由实验室的工作人员采用一系 列统计学的方法，连续地评价本实验室测列统计学的方法，连续地评价本实验室测 定工作的可靠程度，判断检验报告是否可定工作的可靠程度，判断检验报告是否可 发出的过程。发出的过程。 质量控制的含义质量控制的含义 狭义（低层次） 通过控制物所得到的质控图来控制某种成分检测 误差的过程。 以室内质量控制、室间质量评价为主要方式及内 容，属回顾性质量控制方法。 广义（高层次） 全程/全面质量控制。 以预防性质量控制为主，回顾性质量控制为辅的 科学管理方法。 1 1、 室内

2、质控的目的是检测、控制本实验室室内质控的目的是检测、控制本实验室 测定工作的精密度。测定工作的精密度。 2 2、 并检测其准确度的改变，提高常规测定并检测其准确度的改变，提高常规测定 工作的批间、批内标本检测结果的一致性。工作的批间、批内标本检测结果的一致性。 质控示意图 检测检测 样样 本本 报报 告告 质质 控控 品品 结结 果果 推断推断 室内质量控制的主要方法室内质量控制的主要方法 室内质控的准备工作室内质控的准备工作 人员培训人员培训 普及质控知识、培养技术普及质控知识、培养技术 骨干。骨干。 建立标准化操作规程建立标准化操作规程 制定一系列制定一系列SOP 文件文件 仪器的检定与校

3、准仪器的检定与校准 仪器按要求进行仪器按要求进行 校准及项目要求的校准频度校准及项目要求的校准频度 质控品的准备质控品的准备 用于和待测标本共同测定，以控制样本的 测定误差。 IFCC定义，专门用于质量控制的标本或溶 液，不能用作校准。 根据质控品物理性状不同分为根据质控品物理性状不同分为冻干质控品冻干质控品、 液体质控品液体质控品和和混合血清混合血清 根据有无测定值分为定值质控品和非定值根据有无测定值分为定值质控品和非定值 质控品。质控品。 冰冻质控品 在室温充分溶解后于在室温充分溶解后于30分钟内测分钟内测 量，测定前反复混匀量，测定前反复混匀5-6次。次。 干粉质控品 小心取下瓶塞，定量

4、加入纯水小心取下瓶塞，定量加入纯水 （1%误差）；盖上瓶塞，将含水的控制品静置误差）；盖上瓶塞，将含水的控制品静置 5min,不要颠倒瓶子；不要颠倒瓶子； 缓慢晃动瓶子约缓慢晃动瓶子约30s，然后，然后 温和地颠倒瓶子温和地颠倒瓶子10次；次； 静置静置10min, 再温和地颠再温和地颠 倒瓶子倒瓶子10次；次； 再静置再静置15min,再温和地颠倒瓶子再温和地颠倒瓶子 10次并晃动瓶子，注意观察内含的冻干物是否完次并晃动瓶子，注意观察内含的冻干物是否完 全溶解。如此反复，直至控制品呈均一态。全溶解。如此反复，直至控制品呈均一态。 控制品只为质量控制服务。只有在已经确 认了稳定的检测系统具有溯

5、源性的前提下， 使用这样的检测系统对控制品的定值，这 个定值自然也通过检测使用的检测系统获 得了溯源性。 可是，这个控制品只能在这个检测系统上 使用，具有估计结果可靠性的价值。在其 它检测系统上，这个定值没有价值！ 更不可使用控制品为校准品 严格按控制品的说明书操作； 冻干控制品复溶时要确保所用溶剂的质量； 所加溶剂的量要准确，并轻轻摇匀，使内 容物完全溶解，切忌剧烈振摇； 控制品应严格按规定的方法保存，不使用 过期的控制品； 要在与患者标本同样测定条件下测定控制 品。 好的控制品在规定保存条件下至少稳定一 年； 冻干品复溶后28时稳定性大于24小时， 20时稳定性大于20天； 某些不稳定成分

6、（如胆红素、碱性磷酸酶 等）复溶后4小时内变异小于2%； 液体控制品开瓶后可稳定14-30天，但费用 昂贵 L-J质控图的制作方法质控图的制作方法 质控图用单一浓度未定值质控血清，在天间反复 测定20次，计算均值（X）、标准差（S）和变异 系数（CV），在X-S质控图纵坐标上标出X、 2S、3S的标志，将具体数值标在左侧标尺上。 用黑笔画出线为均值线，用红笔画出2S线为警 告线，用蓝笔画出3S线为失控线，在横坐标上 标明日期。 每天将同批号的质控血清按规定复溶，在开始标 本分析之前或分析过程中，随同病人标本的测定 同时测定一份质控血清，将测定值画在图上的对 应点，用直线将该点与前一天的点连接。

7、 质控图正常分布规律 95%数据落在2S内； 不应该有落在3S以外的点（仅0.3%）； 不能连续2个点落在2S以外； 不能有连续5次结果在同一侧； 不能有5次结果渐升或渐降。 注意：所有数据均落在1S内不说明质控结果很 好！ 对新批号的控制品进行测定，根据20或更 多批获得的质控测定结果，进行离群值检 验（剔除超过3s外的数据），计算出平均 数和标准差，作为暂定均值和暂定标准。 以此暂定均值和标准差作为下一月室内质 控图的均值和标准差进行室内质控。 一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控 测定结果汇集在一起，计算累积平均数和累积标 准差（第一个月），以此累积的平均数和标准差 作为下一个月

8、质控图的均值和标准差。 重复上述操作过程，连续3至5个月，以最初20个 数据和3至5个月在控数据汇集的所有数据计算累 积平均数和标准差，以此作为该控制品有效期内 的常用均值和常用标准差。 12S：1个质控测定值超过2S，提示警告。 13S：1个质控测定值超过3S质控限。 22S：2个连续质控测定值同时超过2S或2S 质控限。 R4S：在同一批中最高质控测定值与最低质控测 定值之差超过4S 41S：1个控制品连续4次的测定值都超过1S或 1S，2个控制品连续2次的测定值都超过1S或 1S。 10X：10个连续的质控测定值落在平均值的一侧。 日常使用注意事项: （1）12s为警告规则，不是失控规则

9、。若本批检验有1个 控制结果超出2s限值（不包括正好落在2s限值上的结 果），表示本批结果可能有问题，按多规则程序去检查是 否确实有上述的5种失控表现。 （2）出现失控时，必然已经有了12s表现。没有出现 12s表现，即使有多次结果偏于x一侧，甚至偏于+1s 或-1s以外，这些都不属失控。但检验人员应主动寻 找原因予以纠正，但不作为失控后的措施。 几种不恰当的做法及其避免方法： （1）控制结果落在2s线上就认为失控。 （2）控制结果超出2s，马上就重做。并 且将原来的结果抹去，点上新的接近x的结 果。 （3）直接使用厂商的定值及允许范围作为 控制图的均值和标准差。 13s和R4s规则指示随机误

10、差增大造成的失 控。 22s、41s、10 x指示系统误差造成的失控。 对系统误差中的漂移或倾向分类，可能更 有帮助。出现随机误差失控的表现则较突 然。 质控数据质控数据 否否 12S 在控，接受分析批，发报告在控，接受分析批，发报告 是是 否否 否否 否否 否否否否 13S 22S R4S 41S 10 x 是是 是是 是是 是是 是是 失失 控控 ，拒发报告，拒发报告 预防性维护的警告预防性维护的警告 一般影响系统误差的因素有：一般影响系统误差的因素有： （1 1）使用不同批号的试剂或校准品）使用不同批号的试剂或校准品 （2 2）试剂或校准品在配制过程中发生错误）试剂或校准品在配制过程中发

11、生错误 （3 3）试剂或校准品被污染或变质）试剂或校准品被污染或变质 （4 4）反应温度产生变化）反应温度产生变化 （5 5）加样器部分堵塞造成加样不足）加样器部分堵塞造成加样不足 （6 6）相关的反应参数被修改）相关的反应参数被修改 影响随机误差的因素影响随机误差的因素 （1 1）标本或试剂管路中存在气泡）标本或试剂管路中存在气泡 （2 2）搅拌机构被污染）搅拌机构被污染 （3 3）清洗机构存在故障）清洗机构存在故障 （4 4）交叉污染引起）交叉污染引起 （5 5）比色灯衰老造成光能量不均匀）比色灯衰老造成光能量不均匀 1、试剂批间差 2、试剂的保存 3、试剂的稳定性 4、产生气泡 5、试剂

12、的均匀性 6、错加试剂或试剂被污染 1 1）填写失控报告）填写失控报告 ； 2 2）简单迅速地回顾整个操作过程，分析查找）简单迅速地回顾整个操作过程，分析查找 最可能发生误差的因素。最可能发生误差的因素。 质控品质控品 试剂试剂 校准品校准品 分析仪器分析仪器 其他如环境、人员等因素其他如环境、人员等因素 原则：从易到难原则：从易到难 重新测定同一质控品。此步主要是用以查重新测定同一质控品。此步主要是用以查 明人为误差，每一步都应认真仔细操作，明人为误差，每一步都应认真仔细操作， 以查明失控原因；另外，这一步还可以查以查明失控原因；另外，这一步还可以查 出随机误差，如是随机误差则重测的结果出随

13、机误差，如是随机误差则重测的结果 应在允许范围内应在允许范围内( (在控在控) )，若重测结果仍不，若重测结果仍不 在允许范围则可以进行下一步操作。在允许范围则可以进行下一步操作。 新开一瓶质控品，重测失控项目新开一瓶质控品，重测失控项目 如果新开的质控血清结如果新开的质控血清结 果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时 间过长而变质，或者被污染，若结果仍不在允许范围，则间过长而变质，或者被污染，若结果仍不在允许范围，则 进行下一步。进行下一步。 新开一批质控品，重做失控项目，若结果在控，说明前新开一批质控品，重做失控项目，若结果在控

14、，说明前 一批血清可能都有问题，检查它们的有效期和贮存环境，一批血清可能都有问题，检查它们的有效期和贮存环境， 以查明问题所在，如果结果仍不在允许范围，则进行下一以查明问题所在，如果结果仍不在允许范围，则进行下一 步。步。 重新校准，重测失控项目。用新的校重新校准，重测失控项目。用新的校 准液校准仪器，排除校准液因素。准液校准仪器，排除校准液因素。 更换试剂，用同一批号或不同批号，更换试剂，用同一批号或不同批号， 重测失控项目。排除试剂因素。重测失控项目。排除试剂因素。 仪器因素，检查仪器状态，查仪器因素，检查仪器状态，查 明光源是否需要更换，比色杯（电明光源是否需要更换，比色杯（电 极）是否

15、需要清洗或更换，对仪器极）是否需要清洗或更换，对仪器 进行清洗等维护，另外还要检查试进行清洗等维护，另外还要检查试 剂此时可更换试剂以查明原因，如剂此时可更换试剂以查明原因，如 果结果仍不在允许范围，则进行下果结果仍不在允许范围，则进行下 一步一步 请专家帮助，如果前六步都未能得到请专家帮助，如果前六步都未能得到 在控结果，那可能是仪器或试剂的原在控结果，那可能是仪器或试剂的原 因，因， 只有和仪器或试剂厂家联系请求只有和仪器或试剂厂家联系请求 他们的技术支援了。他们的技术支援了。 如果多个项目同时出现质量失控问题，应 从出现问题的共性上寻找原因： （1）是否使用相同的比色波长 （2）是否使用

16、相同的光源 （3）是否使用了相同的检测模式 （4）这些项目是否同时被校准或确认 （5）这些项目是否具有共同的某些理化因 素 失控类型13S 某水平质控品有一个项目偶尔13S失控，考 虑为随机误差，重测质控品，加强仪器日 常保养 某水平质控品有一个项目经常13S失控，考 虑为试剂存在交叉污染，一般解决方法为 调整项目检测顺序。如达不到效果，可在 检测该项目时增加特殊清洗程序。如Mg、 K等 某水平质控品有多个项目出现 13S失控，考虑为质控品问题。 核对质控品信息确保正确后， 按日常操作重新溶解质控品检 测 失控类型22S 某项目偶尔出现22S失控，考虑为标准 曲线已不适合该批试剂，重新校准后

17、再检测质控。 某项目22S失控概率较高，排除修改了 项目室内质控的SD，考虑为该批试剂 稳定性较差。如果试剂不能改换，可 通过增加校准频率来解决。 一段时间较多项目出现22S失控概率较高，考虑 为仪器光路系统的稳定性下降。特别是CKMB、 ALT、AST等检测波长为340nm这些项目出现22S 失控概率较高，应该更换仪器灯泡，并根据情况 看是否需要更换比色杯。离子则应检查电极和管 道。 一段时间一个或多个项目通过定标不能解决失控 问题，排除试剂和质控品原因。可核对校准品信 息确保正确后，按日常操作重新溶解校准品校准。 校准曲线不合适引起10X失控，由于校准不 成功或试剂发生变化引起，可通过重新校 准解决。 如果校准不能解决10X失控，在免疫比浊法 项目多见，解决办法是选择一个可靠的目 标系统，选取5个项目进行简易比对，如果 比对通过，检测20个质控数据累计平均值 和 SD. （1）如实记录质控结果，实时点画质 控图； （2）保留原始数据； （3）分析失控原因，采取纠正措施； （4）记录纠正后的在控结果，并点画 在质控图上； （5）填写失控报告。 室内质控数据的管理室内质控数据的管理 当月所有项目原始质控数据和原始记录